论文摘要
目的建立快速检测实验大鼠冠状病毒和仙台病毒的双重PCR方法。方法根据大鼠冠状病毒N基因、仙台病毒L基因设计特异性引物;经过双重PCR优化,特异性和敏感性的检测,建立双重PCR体系。应用该PCR体系检测人工感染仙台病毒组织DNA样本和实验动物组织样本,并与ELISA方法比对。结果双重PCR扩增出大鼠冠状病毒(168 bp)和仙台病毒(262 bp)目的条带,PCR扩增产物测序结果利用核酸BLAST功能进行同源序列对比,仙台病毒和大鼠冠状病毒同源性分别为100%和99%。仙台病毒和大鼠冠状病毒的检测下限为1.56×102 copies/μL。特异性检测对小鼠肝炎病毒扩增,产生片段大小近似大鼠冠状病毒产物。应用建立的双重PCR体系检测人工感染仙台病毒组织DNA样本,30份DNA标本均被检出;检测94份实验动物肺组织样本,结果均阴性。结论建立的双重PCR方法操作简单、快速、特异性强、灵敏度高,能够实现对实验动物仙台病毒和大鼠冠状病毒病原体的快速检测。
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文章来源
类型: 国内会议
作者: 孟钰榕,郑龙,祝岩波,王璇,尤红煜,刘健敏,栗彦宁,连伟光,张东明,王俊霞
关键词: 大鼠冠状病毒,仙台病毒,双重
来源: 第十五届中国实验动物科学年会 2019-09-21
年度: 2019
分类: 基础科学,医药卫生科技
专业: 生物学,基础医学,基础医学
单位: 河北省实验动物重点实验室河北医科大学实验动物学部,河北医科大学第二医院
分类号: R373.1;R-332
DOI: 10.26914/c.cnkihy.2019.068203
页码: 466-475
总页数: 10
文件大小: 1198k
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