原阿片碱对人肝星状细胞HSC-LX2增殖的抑制作用及机制研究

原阿片碱对人肝星状细胞HSC-LX2增殖的抑制作用及机制研究

论文摘要

目的:考察原阿片碱对人肝星状细胞HSC-LX2增殖的抑制作用,并对其机制进行初步探讨。方法:采用MTT法测定25、50、100、200、400、500μmol/L原阿片碱作用24 h对HSC-LX2细胞增殖的影响,计算细胞增殖抑制率。另取HSC-LX2细胞分为对照组(含5%胎牛血清的1640培养基)和原阿片碱低、中、高浓度组(100、200、400μmol/L),作用24 h后,流式细胞术测定细胞凋亡率;荧光定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)mRNA的相对表达量,Western blot法测定细胞中α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ、MMP-2蛋白的相对表达量。结果:25、50、100、200、400、500μmol/L原阿片碱对HSC-LX2细胞的增殖抑制率分别为0、6.9%、18.7%、34.2%、48.9%、53.9%。与对照组比较,原阿片碱低、中、高浓度组细胞中CollagenⅠ、TIMP-1 mRNA相对表达量和α-SMA蛋白相对表达量均显著降低,MMP-2蛋白相对表达量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);原阿片碱中、高浓度组细胞的凋亡率和MMP-2 mRNA相对表达量显著升高,α-SMA、CollagenⅢmRNA相对表达量和CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白相对表达量均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:原阿片碱可抑制HSC-LX2细胞增殖,诱导其凋亡,可降低α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ、TIMP-1表达,升高MMP-2表达有关。

论文目录

  • 1 材料
  •   1.1 仪器
  •   1.2 药品与试剂
  •   1.3 细胞
  • 2 方法
  •   2.1 原阿片碱溶液的制备
  •   2.2 细胞培养
  •   2.3 MTT法检测HSC-LX2细胞的增殖抑制率
  •   2.4 流式细胞术检测HSC-LX2细胞的凋亡率
  •   2.5 RT-PCR法检测HSC-LX2细胞中α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ、MMP-2、TIMP-1 mRNA表达的影响
  •   2.6 Western blot法检测HSC-LX2细胞中α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ、MMP-2蛋白表达的影响
  •   2.7 统计学方法
  • 3 结果
  •   3.1 细胞增殖抑制率
  •   3.2 细胞凋亡率
  •   3.3 细胞中α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ、MMP-2、TIMP-1 mRNA的表达
  •   3.4 细胞中α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ、MMP-2蛋白表达
  • 4 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 吴新玉,李靖,张金娟,廖尚高,梅青,吴亚云,席晓岚

    关键词: 原阿片碱,肝星状细胞,增殖,凋亡,机制

    来源: 中国药房 2019年23期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 药学

    单位: 贵州医科大学药学院,国家苗药工程技术中心教育部民族药与中药开发应用工程研究中心,贵州医科大学基础医学院,贵州医科大学附属医院感染科

    基金: 国家自然科学基金资助项目(No.81460642)

    分类号: R96

    页码: 3210-3215

    总页数: 6

    文件大小: 1859K

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