封苹孟庆侠（江苏省沛县疾病预防控制中心江苏沛县221600）
【中图分类号】R37【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）28-0155-02
【摘要】目的明确制备高质量的培养基是检测工作的基础，要制备高质量的培养基应从培养基地购置、储存、配制、灭菌、质量检定等方面采取措施。方法结合本单位的具体情况从培养基制备的各个环节分析、探讨。结论认真做好培养基制备工作，为微生物检测提供保障。
【关键词】微生物实验室制备培养基
培养基地购置
选择合适供应商是培养基购买中的重要步骤。实验室可以凭实际工作经验选择合适的供应商；也可以向同级单位咨询或听取市、省级上级单位推荐。信誉高、有质量和服务保证能力的企业还应提供培养基的各种信息：成分、名称、产品编号批号、使用前PH、储存条件、有效期、性能评价、所用测试菌株等。培养基到货后，应有专人接收、验收并做好培养基数量、批号、保质期、储存方法等信息登记，填写好入库登记表。有的实验室收到货后只是摆放进试剂柜，没有一份明细的清单，不利于培养基的保存、利用和清理。
培养基地配制
1.未开封的干粉培养基保质较长，已开封的保质期会变短。在瓶体上注明开封日期，用后拧紧瓶盖。个别品种易变质，如SC增菌液，可冷藏保存。
2.若干粉培养基结块或颜色发生改变，不得使用。
3.配制用水可用蒸馏水、去离子水等，电阻率不小于30万Ω•cm，每批应检查一次。
4.称量干粉培养基时为避免污染，可用专用角匙。
5.自行配制的培养基，各营养成分应按要求顺序加入，避免产生沉淀。
6.盛放培养基的容器不宜用铜或铁锅，以防其离子混入培养基影响微生物生长。
7.称量好的干粉培养基应先溶解再高压灭菌。
8.自行配制的培养基应完全溶解后再调PH。PH值须冷后测定，因培养基所含成分不同，对冷的和热的进行测定，其PH值相差很多[1]。培养基的PH值须精确测定，否则会影响微生物的生长和反应地观察。另外，PH值不可反复调试，否则会影响培养基的渗透压。
9.需要加热煮沸的培养基应避免溢出，应边搅拌边加热。烧糊的培养基，其成分已改变，不得使用，应重配。
10.不须高压灭菌的培养基，配制用水及盛放的容器可于配制前先进行高压灭菌。
11.配制好的培养基一般采用高压灭菌，且应立即灭菌，以防微生物生长消耗养分而改变培养基成分。
12.压力蒸汽灭菌器应定期检定，平时可用生物指示菌法和化学变色纸片进行灭菌验证。灭菌时应注意排除冷空气。含糖或特殊培养基应按要求选好灭菌温度及时间。
13.灭菌后的培养基应迅速冷却到所须温度，避免长时间保存在灭菌锅中，造成过度灭菌，影响培养基的营养成分或选择性效果。
14.配制的培养基的量应恰当，未用完的可注明配制日期，并且应该在最长保值期内用完。配好的培养基应避光、冷藏保存防止蒸发。
15.凡受污染长过细菌的培养基，不得灭菌再用。
16.三（双）糖铁琼脂斜面试管塞不宜塞的过紧，否则容易影响斜面碱性反应观察[2]；LST如果试管塞过紧，影响排气，可导致灭菌后小倒管内仍有气泡。
17.需要加添加剂或抗生素的培养基应即配即用。
18.固体培养基如储存太久，使用前应再加热一次，使其表面湿润以利细菌生长[1]。
培养基的检定
基层微生物实验室对培养基的评估：配制好的培养基通过感官检测初步判断评估；高压灭菌的培养基应随机抽样5%～10%做无菌试验；无菌分装的培养基应在培养箱（36℃）过夜无菌生长才能使用；将培养基用已知阳性或阴性标准菌株做对照以检查培养基是否能用。
讨论
实际工作中培养基制备仍存在一些容易被忽视的问题，应加强培养基的实验室质量控制，如：培养基的入库、配制、灭菌、质控评估、使用记录要齐全，同时做好标准菌株地入库、储存记录；基层微生物实验室有些培养基配备不齐全，如：有些培养基保质期短，到期后不能及时购买新的补充等。总之，只有对培养基进行有效的监控，才能从根本上保证检测结果的可信和有效。
参考文献
[1]何晓青.卫生防疫检验[M].江西:江西省卫生防疫站，1980：186.
[2]齐小秋.病原生物学检验-细菌[M].北京:卫生部病原生物学检验教材编写组，2009：301.