催化发夹组装用于碱基切除修复酶活性检测研究

催化发夹组装用于碱基切除修复酶活性检测研究

论文摘要

碱基切除修复酶在DNA损伤修复过程中具有重要作用,且其检测与癌症等疾病的诊断相关。传统的碱基切除修复酶检测方法操作复杂、灵敏度低,且仅对酶的浓度进行定量分析而非酶的活性。为此,建立了基于催化发夹组装介导信号放大用于核酸内切酶IV(Endo IV)活性的检测方法。该方法利用Endo IV的活性作用于底物探针,将引发序列释放而引发催化发夹自组装信号放大,以实现Endo IV的活性检测分析。通过荧光检测实验可知,该方法检测下限为3.7×10-7 U/mL,可选择性地对Endo IV的活性进行检测,是一种设计简单、操作简便、灵敏度高的碱基切除修复酶活性检测方法。

论文目录

  • 1 研究背景
  • 2 实验部分
  •   2.1 主要试剂与仪器
  •   2.2 基于催化发夹组装信号放大的Endo IV活性测定
  •   2.3 琼脂糖凝胶电泳测定
  •   2.4 底物探针HP浓度的优化
  • 3 结果与讨论
  •   3.1 催化发夹组装信号放大用于Endo IV活性分析的实验原理验证
  •   3.2 底物探针HP浓度的优化
  •   3.3 分析方法的选择性研究
  •   3.4 传感器分析性能研究
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王涛,汤建新,李青

    关键词: 催化发夹组装,碱基切除修复酶,酶活性检测,无酶信号放大,核酸内切酶

    来源: 包装学报 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅱ辑,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 湖南工业大学生命科学与化学学院

    基金: 国家自然科学基金资助项目(21705042),中国包装联合会“绿色包装与安全”专项研究基金资助项目(2017ZBLY14)

    分类号: Q75

    页码: 24-29

    总页数: 6

    文件大小: 3008K

    下载量: 76

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