导读:本文包含了大脑皮层神经元培养论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:神经元,皮层,细胞,磷酸化,大鼠,活性氧,新生。
大脑皮层神经元培养论文文献综述
段旭博,令狐艳,罗道朋,李强明,孙宝飞[1]（2019）在《镉对原代培养小鼠大脑皮层神经元磷酸化c-Jun氨基末端激酶的影响》一文中研究指出目的探讨原代培养的小鼠大脑皮层神经元经不同浓度镉(cadmium,Cd)处理不同时间后磷酸化c-JNK氨基末端激酶(phosphorylated c-Jun N-terminal kinase,p-JNK)表达的变化。方法原代培养的小鼠大脑皮层神经元经0、5、10、20μmol/L氯化镉染毒0、6、12、24 h后,采用MTT法检测细胞活性;用蛋白免疫印迹法检测p-JNK蛋白的表达水平。结果Cd浓度为5、10、20μmol/L时,随着Cd浓度的升高及染毒时间的延长,神经元突起变细,甚至断裂,胞体变为球形后脱落,漂浮于培养液中。与对照组比较,随着Cd浓度的升高和处理时间的延长,原代培养的小鼠大脑皮层神经元的存活率明显下降(P<0.05),且大脑皮层神经元中p-JNK的表达量升高(P<0.05)。结论 Cd可能通过上调p-JNK的表达引起原代培养小鼠大脑皮层神经元的死亡。(本文来源于《环境与健康杂志》期刊2019年04期）
张丽锦,李英綦,胡晓宇,孙亚玲,高祥[2]（2018）在《特丁基对苯二酚对氯化镧所致原代培养大鼠大脑皮层神经元氧化损伤的拮抗作用》一文中研究指出目的探讨特丁基对苯二酚(tertiary butylhydroquinone,tBHQ)对氯化镧所致原代培养大鼠大脑皮层神经元氧化损伤的拮抗作用。方法将出生24 h内清洁级Wistar大鼠的胎鼠大脑皮质神经元进行原代培养,采用神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫细胞荧光法进行神经元的纯度鉴定;将神经元分别暴露于终浓度为0(对照)、0.125、0.25、0.5 mmol/L氯化镧的DMEM培养基中染毒24 h,同时,设40μmol/L tBHQ与相应浓度氯化镧干预组。采用二乙酰二氯荧光素(DCFH-DA)探针测定神经元内活性氧(ROS)的水平,采用Western blot法测定神经元内核因子NF-E2相关因子(nuclear factor erythroid2-related factor,Nrf2)、谷胱甘肽S转移酶(glutathione S transferase,GST)和超氧化物歧化酶2(superoxide dismutase 2,SOD_2)蛋白的表达水平。结果与对照组比较,各浓度氯化镧染毒组原代培养大鼠神经元ROS水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);且随着氯化镧染毒浓度的升高,原代培养大鼠神经元内的ROS水平呈上升趋势。与相同浓度氯化镧组比较,0.25、0.5 mmol/L氯化镧+40μmol/L t BHQ干预组原代培养大鼠神经元的ROS水平均较低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,各浓度氯化镧组神经元内Nrf2、GST和SOD_2蛋白的表达水平均降低,除0.125 mmol/L氯化镧染毒组外,差异均有统计学意义(P<0.05);且随着氯化镧染毒浓度的升高,原代培养大鼠神经元内Nrf2、GST和SOD_2蛋白的表达水平均呈下降趋势。与相同浓度氯化镧组比较,0.125、0.25、0.5 mmol/L氯化镧+40μmol/L tBHQ干预组原代培养大鼠神经元的Nrf2、GST和SOD_2蛋白的表达水平均增加,除0.25 mmol/L氯化镧+40μmol/L tBHQ干预组SOD_2蛋白的表达水平外,差异有统计学意义(P<0.05)。结论氯化镧可使神经元内ROS水平增加,Nrf2,GST和SOD_2的蛋白表达水平减少,造成神经元发生氧化损伤;而tBHQ干预可拮抗镧所致的ROS水平增加、Nrf2及抗氧化蛋白的表达降低,对神经元具有保护作用。(本文来源于《环境与健康杂志》期刊2018年12期）
任艺[3]（2017）在《小窝蛋白-1在吗啡诱导小鼠原代培养大脑皮层神经元结构可塑性改变中的作用》一文中研究指出背景作为阿片类镇痛药,吗啡在疼痛治疗中应用十分广泛,但药物滥用、误用或长期用药引起的药物依赖不容忽视。目前认为,长期反复应用吗啡可引起敏感神经元发生可塑性变化,是阿片类药物成瘾的机制。小窝蛋白-1(Caveolin-1,Cav-1)在神经系统分布广泛,作为膜脂筏(Membrane lipid rafts,MLRs)绞手架蛋白,与神经可塑性密切相关。然而Cav-1在吗啡所致的神经结构可塑性改变中的作用尚缺乏深入研究。本研究探讨了在吗啡诱导原代培养小鼠皮层神经元结构可塑性改变过程中,Cav-1对神经突生长标志物生长相关蛋白43(Growth association protein-43,GAP-43)和微管相关蛋白2(Microtube-associated protein-2,MAP-2)表达水平的影响。方法分离培养出生24 h内的C57/BL/6小鼠皮层神经元。首先建立慢性吗啡暴露浓度梯度模型,于培养第7天将神经元分为4组,对照组(Control)给予等体积磷酸盐缓冲液(phosphate buffered solution,PBS),其它3组为吗啡组(Morphine),分别给予1.0、10.0、100.0μmol/L吗啡处理,继续培养48 h,引起神经元慢性吗啡暴露,通过MTT方法检测神经元活性,通过免疫蛋白印记检测Cav-1表达水平,明确吗啡浓度对神经元活性和Cav-1表达的影响。选取既对神经元活性无影响又诱导Cav-1增加的吗啡浓度10.0μmol/L进一步研究,通过q RT-PCR方法探讨吗啡对神经元Cav-1转录水平的影响,通过蛋白免疫印迹和免疫荧光检测吗啡对生长相关蛋白-43(Growth associated protein-43,GAP-43)、微管相关蛋白2(Microtube-associated protein-2,MAP-2)等神经可塑性标志物改变情况,验证神经突生长。继之,通过Cav-1敲减技术,研究Cav-1在吗啡诱导原代培养小鼠皮层神经元结构可塑性改变中的作用。将原代培养小鼠皮层神经元分为3组:对照组(Control)不进行特殊处理;无义序列组(sh RNASc组)转染携带无义序列sh RNA的慢病毒,使复感染指数(Multiplicity of Infection,MOI)为1;Cav-1敲减组(sh RNACav1组转染携带Cav-1 sh RNA的慢病毒(Lentish RNACav1),使MOI为1。7天后将上述每组再次各分为2个亚组,分别给予等体积PBS或10.0μmol/L吗啡,继续培养48 h。通过免疫蛋白印迹检测Cav-1、GAP-43等目的蛋白,通过免疫荧光激光共聚焦和高内涵分析系统对Cav-1和微管相关蛋白-2(Microtube associated protein-2,MAP-2)表达及神经元轴突长度等形态学参数进行检测。结果1)MTT分析表明,10μmol/L吗啡对神经细胞活性无影响,同时蛋白免疫印迹表明该浓度吗啡可诱导Cav-1水平升高。2)q RT-PCR结果显示10μmol/L吗啡可引起Cav-1 m RNA水平升高,在转录水平促进Cav-1表达。蛋白免疫印迹和免疫荧光表明吗啡可引起GAP-43水平升高及MAP-2为标记的神经突生长。3)通过慢病毒介导的Cav-1敲减,可抑制吗啡所致的GAP-43表达增加及MAP-2标记的神经突延长。结论吗啡可引起小鼠原代培养皮层神经元结构可塑性改变,Cav-1在该过程中发挥重要作用。抑制Cav-1表达,可减少吗啡引起的神经生长标志物GAP-43和MAP-2的增加,神经生长受抑。提示Cav-1可能是干预吗啡成瘾的潜在分子靶点。(本文来源于《首都医科大学》期刊2017-03-01）
张忠胜,余炳坚,梅元武[4]（2017）在《新生大鼠大脑皮层神经元原代培养与鉴定》一文中研究指出目的建立一种简便的新生大鼠皮层神经元的体外原代培养方法。方法取新生24 h内的大鼠,分离大脑皮层,消化后接种于L-多聚赖氨酸包被的细胞培养瓶内,以含胎牛血清的DMEM高糖培养基为种植液,24 h后换用含有B27的Neurobasal的无血清培养基维持,倒置相差显微镜下观察细胞的生长状态;采用神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫荧光染色法鉴定皮层神经元纯度。结果接种后2 h,皮层神经元开始贴壁;随着时间延长,贴壁细胞增多,细胞长出突起,神经元突起间逐渐开始交织成网。接种后7 d神经元胞体丰满,突起明显延长,相互间形成了明显的神经网络。经NSE免疫荧光技术鉴定神经元纯度为(93.57±3.9)%。结论该方法简单易行,可获得高纯度的大鼠皮层神经元。(本文来源于《热带医学杂志》期刊2017年01期）
周新华,张在军,于沛[5]（2014）在《大脑皮层神经元原代培养方法的改良及一种体外缺氧缺糖简易模型的建立》一文中研究指出目的改进SD胎鼠大脑皮层神经元体外原代培养方法及其一种缺氧缺糖(OGD)简易模型建立。方法用温和的TrypLE胰酶消化得到单个皮层神经细胞,用含有B27的Neurobasol培养基进行培养。培养7 d后,将其培养液换成无糖DMEM培养液,放入缺氧装置中分别培养4、5及6 h,利用MTT法检测细胞存活率,并用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞培养液中LDH的释放量。结果分离和培养的神经元生长状态良好,免疫荧光方法证明该方法培养的大脑皮层神经元纯度可达到(93.2±1.3)%,能够达到实验研究的要求。细胞OGD 4、5及6 h后,细胞存活率分别为(52.7±1.3)%、(26.5±3.3)%及(20.8±1.1)%;LDH的释放量分别为(52.9±4.8)%、(89.3±1.3)%及(93.2±1.1)%。结论改良后的培养方法能够稳定地获得高纯度的SD胎鼠大脑皮层神经元,用厌氧发生装置替代叁气培养箱建立了一种OGD简易模型,同时选择OGD 4 h作为缺氧缺糖模型最佳时间点。(本文来源于《中南药学》期刊2014年05期）
王承娜,林丽,段振芳,钟飞,左代英[6]（2013）在《新生SD大鼠大脑皮层神经元与星形胶质细胞的混合培养》一文中研究指出胶质细胞参与神经元发育的整个过程,对神经元有营养和保护作用[1],神经元-胶质细胞之间的相互作用对中枢神经系统的功能起着重要作用[2]。然而,神经元-胶质细胞在体内相互作用的研究仍然具有一定的难度[3],而体外实验大部分采取神经元单独培养的方法[4],对神经元-胶质细胞之间的相互作用研究(本文来源于《药学学报》期刊2013年11期）
翁启芳[7]（2013）在《新生大鼠大脑皮层神经元的原代培养》一文中研究指出目的成功建立简便易行的原代神经元培养模型的方法。方法无菌操作条件下,培养皿或培养板经L-多聚赖氨酸包被过夜,用15%完全培养液混悬神经元,以细胞密度为5×104细胞/mL的浓度种植,24h后倒置相差显微镜观察神经元贴壁后即用阿糖胞苷(10μmol/L)以抑制神经胶质细胞及非神经细胞的增殖,每48h进行每皿或每孔半量换液。结果神经元贴壁生长较多,神经胶质或成纤维细胞被抑制,在半量换液中可清除,获得相对单纯的神经元。结论简便易行的原代皮层神经元培养方法,可以得到相对单纯体外培养的神经元模型。(本文来源于《中国医药指南》期刊2013年20期）
邓莉,代荣阳,廖彦生,高小青,杨朝鲜[8]（2011）在《新生大鼠大脑皮层神经元原代培养与鉴定》一文中研究指出目的:建立一种较理想的新生大鼠大脑皮层神经元原代培养方法。方法:体外原代培养新生大鼠大脑皮质神经元,应用免疫细胞化学法鉴定神经元。结果:用神经基础培养基(Neurobasal-A)+B27培养的神经元纯度可达70%,生长状态较佳。结论:该培养技术是大鼠皮层神经元体外培养的一种较理想的方法。(本文来源于《现代医药卫生》期刊2011年05期）
周国凤,汤京龙,周亮,奚廷斐[9]（2011）在《一种改进的大脑皮层神经元原代培养方法的研究》一文中研究指出目的:建立1种简单、高效的新生乳鼠大脑皮层神经元原代培养的方法。方法:出生12 h以内的SD乳鼠为研究对象,采用胰酶消化和机械分离法相结合制备细胞悬液;在细胞培养过程中,不加入阿糖胞苷抑制神经胶质细胞生长,而是用2%B27 Neurobasal A medium维持培养。结果:神经元生长良好,形成神经元网络系统;通过神经元免疫组织化学鉴定神经元纯度达90%以上。结论:此方法是获得纯度较高的神经元的1种可靠方法。(本文来源于《药物分析杂志》期刊2011年02期）
熊怀林,高云,杨朝鲜[10]（2011）在《新生大鼠大脑皮层神经元原代培养方法》一文中研究指出目的:介绍一种简单、生长良好的大脑皮层神经元的培养方法。方法:急性分离新生鼠大脑皮层制作单细胞悬液进行原代培养,观察培养神经元的生长形态,并用免疫荧光化学法对其进行鉴定。结果:培养的神经元细胞清晰,光晕明显,生长良好,免疫荧光鉴定结果表明该方法培养的细胞纯度较高,能够达到实验研究的要求。结论:该培养方法简单、可靠,是神经元培养的良好方法。(本文来源于《泸州医学院学报》期刊2011年01期）
大脑皮层神经元培养论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨特丁基对苯二酚(tertiary butylhydroquinone,tBHQ)对氯化镧所致原代培养大鼠大脑皮层神经元氧化损伤的拮抗作用。方法将出生24 h内清洁级Wistar大鼠的胎鼠大脑皮质神经元进行原代培养,采用神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫细胞荧光法进行神经元的纯度鉴定;将神经元分别暴露于终浓度为0(对照)、0.125、0.25、0.5 mmol/L氯化镧的DMEM培养基中染毒24 h,同时,设40μmol/L tBHQ与相应浓度氯化镧干预组。采用二乙酰二氯荧光素(DCFH-DA)探针测定神经元内活性氧(ROS)的水平,采用Western blot法测定神经元内核因子NF-E2相关因子(nuclear factor erythroid2-related factor,Nrf2)、谷胱甘肽S转移酶(glutathione S transferase,GST)和超氧化物歧化酶2(superoxide dismutase 2,SOD_2)蛋白的表达水平。结果与对照组比较,各浓度氯化镧染毒组原代培养大鼠神经元ROS水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);且随着氯化镧染毒浓度的升高,原代培养大鼠神经元内的ROS水平呈上升趋势。与相同浓度氯化镧组比较,0.25、0.5 mmol/L氯化镧+40μmol/L t BHQ干预组原代培养大鼠神经元的ROS水平均较低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,各浓度氯化镧组神经元内Nrf2、GST和SOD_2蛋白的表达水平均降低,除0.125 mmol/L氯化镧染毒组外,差异均有统计学意义(P<0.05);且随着氯化镧染毒浓度的升高,原代培养大鼠神经元内Nrf2、GST和SOD_2蛋白的表达水平均呈下降趋势。与相同浓度氯化镧组比较,0.125、0.25、0.5 mmol/L氯化镧+40μmol/L tBHQ干预组原代培养大鼠神经元的Nrf2、GST和SOD_2蛋白的表达水平均增加,除0.25 mmol/L氯化镧+40μmol/L tBHQ干预组SOD_2蛋白的表达水平外,差异有统计学意义(P<0.05)。结论氯化镧可使神经元内ROS水平增加,Nrf2,GST和SOD_2的蛋白表达水平减少,造成神经元发生氧化损伤;而tBHQ干预可拮抗镧所致的ROS水平增加、Nrf2及抗氧化蛋白的表达降低,对神经元具有保护作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
大脑皮层神经元培养论文参考文献
[1].段旭博,令狐艳,罗道朋,李强明,孙宝飞.镉对原代培养小鼠大脑皮层神经元磷酸化c-Jun氨基末端激酶的影响[J].环境与健康杂志.2019
[2].张丽锦,李英綦,胡晓宇,孙亚玲,高祥.特丁基对苯二酚对氯化镧所致原代培养大鼠大脑皮层神经元氧化损伤的拮抗作用[J].环境与健康杂志.2018
[3].任艺.小窝蛋白-1在吗啡诱导小鼠原代培养大脑皮层神经元结构可塑性改变中的作用[D].首都医科大学.2017
[4].张忠胜,余炳坚,梅元武.新生大鼠大脑皮层神经元原代培养与鉴定[J].热带医学杂志.2017
[5].周新华,张在军,于沛.大脑皮层神经元原代培养方法的改良及一种体外缺氧缺糖简易模型的建立[J].中南药学.2014
[6].王承娜,林丽,段振芳,钟飞,左代英.新生SD大鼠大脑皮层神经元与星形胶质细胞的混合培养[J].药学学报.2013
[7].翁启芳.新生大鼠大脑皮层神经元的原代培养[J].中国医药指南.2013
[8].邓莉,代荣阳,廖彦生,高小青,杨朝鲜.新生大鼠大脑皮层神经元原代培养与鉴定[J].现代医药卫生.2011
[9].周国凤,汤京龙,周亮,奚廷斐.一种改进的大脑皮层神经元原代培养方法的研究[J].药物分析杂志.2011
[10].熊怀林,高云,杨朝鲜.新生大鼠大脑皮层神经元原代培养方法[J].泸州医学院学报.2011
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