导读:本文包含了鸡卵黄免疫球蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:卵黄,免疫球蛋白,杆菌,抗生素,免疫,菌株,雏鸡。
鸡卵黄免疫球蛋白论文文献综述
程瑶,黄丽珊,闫梦茹,刘蕊,吴莺[1]（2019）在《卵黄免疫球蛋白治疗幽门螺旋杆菌感染研究进展》一文中研究指出幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染能导致消化性溃疡、胃炎、胃癌等胃肠性疾病,以及与冠心病、糖尿病、肝胆疾病等胃外疾病具有相关性。研究显示根除Hp可显着降低消化性疾病的发生率。临床常用抗生素联合疗法进行治疗,但随着抗生素耐药性的增加,疗效一直在下降。多项研究均探讨卵黄免疫球蛋白(Immunoglobulin of yolk,IgY)对Hp感染的治疗作用。IgY是以特异性抗原免疫禽类获得的一种免疫球蛋白。研究表明以Hp的特异性致病因子作为免疫原制备的IgY在治疗Hp感染有很好的效果。本文主要叙述了Hp的致病因素及针对Hp各类致病因子制备的IgY治疗感染作用。(本文来源于《海峡药学》期刊2019年11期）
王芳[2]（2018）在《卵黄免疫球蛋白IgY改善实验动物牙周炎和口臭的研究》一文中研究指出IgY(Immunoglobulin of Yolk,IgY)是卵生动物主要免疫球蛋白,功能上等同于哺乳动物进化上的高级IgG,卵生动物IgY通过卵黄传输至胚胎,成为保护胚胎不受外界病原菌侵袭的抗体。鸡抗体IgY的收集和分离快速而经济,母鸡经特定微生物免疫后,从免疫母鸡的蛋黄中能获得效价高而持久的IgY抗体,被应用于抗菌、抗病毒、抗肿瘤和免疫检验。基于免疫球蛋白IgY的体内外功效作用,发现特异性IgY改善口腔厌氧致病菌(Porphyromonas gingivalis,Prevotella intermedius和Fusobacterium nucleatum)感染的大鼠牙周炎和口臭的典型症状,阐明IgY治疗口腔疾病的作用。1.免疫球蛋白IgY的制备和生物化学特性。P.gingivalis,P.intermedius和F.nucleatum菌液加入甲醛和弗氏佐剂,制成灭活疫苗,分3次免疫优质来杭蛋鸡(Leghorn),收集鸡蛋,分离蛋黄,采用0.01 mol/L pH5.0的醋酸缓冲液充分搅拌,4℃冷藏沉降脂质物质,离心后收集上清液,采用100 kDa孔径透析进行浓缩,获得IgY,经真空冷冻干燥和ELISA效价检测,其含量为360 mmol/L,对P.gingivalis,P.intermedius和F.nucleatum的效价分别为1:25600、1:12800和1:25600。SDS-PAGE显示IgY的分子量180 kDa,由两条重链(67-70 kDa)和两条轻链(25kDa)组成。2.免疫球蛋白IgY作用实验动物的免疫特性。以IgY作为体外入侵抗原,检测Wistar大鼠血液中CD4~+和CD8~+的数量和比值,免疫调节因子组胺、IgM、IgE和IgG等的变化,分析IgY可能引起的Wistar大鼠的免疫应答,新西兰兔的皮肤刺激和豚鼠的皮肤变态反应,评价样品的急性、多次皮肤刺激和皮肤变态反应强度,评价IgY对实验动物的免疫作用特性。结果显示,实验组和对照组的大鼠体重和进食量均无显着变化,组胺和IgM在第9天显着升高后恢复正常水平,IgG和IgE基本无变化,CD4~+和CD8~+细胞数量分别为1902.60和974.00、免疫细胞中占比为54.36%和27.83%,CD4~+/CD8~+比值为1.95,都显着低于阳性对照(p<0.05),且在正常范围内。皮肤刺激试验急性1-72 h、慢性1-14 d均无刺激,皮肤变态试验激发后24 h和48 h有2例积分>2的动物,属于微弱变态反应。免疫应答、皮肤刺激和皮肤变态试验结果表明IgY不会引起大鼠的免疫应答,对新西兰兔皮肤无刺激性,对豚鼠皮肤有微弱的变态反应,当IgY的含量降低时其皮肤变态反应将得到有效控制,表明IgY作为外来抗原对机体无致敏性。3.免疫球蛋白IgY治疗大鼠牙周炎的功效。用口腔厌氧致病菌P.gingivalis,P.intermedius和F.nucleatum建立大鼠牙周炎动物模型,给药期间,每周探针检测并记录牙龈指数(GI)、菌斑指数(PI)和探诊出血指数(BOP),ELISA试剂盒测定血液中IL-6和TNF-α的含量,取组织固定,采集X射线标本数码照片,观察牙槽骨吸收情况,制作病理切片,观察牙周组织的病理变化情况。结果显示给药后GI、PI和BOP的分数分别降低90.00%、81.82%和100.00%,血液中IL-6和TNF-α的浓度降低63.04%和54.05%,与对照组相比,特异性IgY能够显着降低(p<0.05)GI、PI和BOP指数,有效改善牙龈炎症、菌群共聚和牙周组织出血等症状,缓解牙周炎大鼠牙周组织病变,并可促进新牙周纤维及新骨的生成,减轻因牙周炎造成的炎症应答,表明IgY对口腔致病菌介导的牙周炎有显着的预防和治疗作用。4.免疫球蛋白IgY对口臭动物模型的影响。基于口臭的发病机理,采用P.gingivalis、P.intermedius和F.nucleatum诱导,饮用蔗糖水促进口腔厌氧致病菌定植的方式,制备大鼠口臭模型,给药IgY,检测GI、PI和口臭指数(HI)的变化,顶空固相萃取-气相色谱质谱联用技术(SPME-GCMS)发现大鼠口臭模型的口腔中厌氧致病菌代谢物的种类和含量变化,ELISA试剂盒检测血液中IL-6和TNF-α水平。结果显示,口腔中厌氧致病菌代谢物,主要由醛类、酮类、羧酸类和含氮化合物类组成,给药后GI、PI和HI的评分减少55.67%、57.14%和50.00%,血液中IL-6和TNF-α的浓度降低74.44%和85.09%,口腔中厌氧致病菌代谢物变化最大的有正己醛、2,5-二甲基-3(2H)呋喃酮、乙酸、正己酸、氨和乙烯基异丙基醚,相对含量分别降低8.84%、7.84%、8.11%、11.24%、8.51%和12.00%,且高剂量降低的百分比大于低剂量,表明特异性IgY能有效缓解由口腔厌氧致病菌引起的口腔健康问题和代谢物产生的异味,对口腔厌氧致病菌介导的口臭具有预防和治疗的功效。5.免疫球蛋白IgY抑制口腔厌氧致病菌增殖特性的研究。以人工唾液为培养基,模拟在口腔环境中不同剂量IgY对P.gingivalis、P.intermedius和F.nucleatum叁种口腔厌氧致病菌以及组合菌液的增殖抑制作用,气味扫描仪(E-Nose)对人工唾液模拟体系中气味轮廓成分进行主成分分析,GCMS分析人工唾液模拟体系中口腔厌氧致病菌的代谢产物挥发性有机物(VOCs)的种类以及含量变化,Halimeter检测人工唾液模拟体系中口腔厌氧致病菌的代谢产物挥发性硫化物(VSCs)的含量变化。结果显示P.gingivalis在人工唾液中呈S型生长曲线,HI指数呈现逐渐上升的趋势;添加叁种剂量IgY后,能够有效抑制口腔厌氧致病菌在人工唾液模拟体系中的增殖,尤其是高剂量IgY在6 h可显着抑制(p<0.05)口腔厌氧致病菌的生长繁殖;气味扫描仪对人工唾液模拟体系中气味轮廓成分主成分分析显示IgY给药组能与对照组显着区分,且具有浓度依赖性,VOCs的种类有酮类、羧酸类、酯类、芳香族和含氮化合物,其中2,4-二叔丁基苯酚、1,4-二氧代全氢吡咯并[1,2-a]吡嗪、反式芥酸酰胺、5-氯-3-溴-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶和十一烷变化量最大,分别降低1.01%、1.43%、1.13%、0.94%、1.15%、0.72%,不同剂量给药组的VSCs的含量比对照组降低16~44%,表明人工唾液模拟体系中气味成分发生了明显的变化,特异性IgY有效降低口腔厌氧致病菌中VSCs和VOCs的产量,通过抑制口腔厌氧致病菌的增殖,降低致病菌代谢物的产生,缓解由代谢物引起的口腔炎症和异味,阻断口腔疾病的发生。比较IgY与鱼精蛋白、乳铁蛋白和甲硝唑3种抑菌剂的抑菌作用,结果显示高浓度的IgY对P.gingivalis和F.nucleatum的增殖有显着的抑制,而高浓度的乳铁蛋白对P.intermedius的增殖有显着的抑制,但当浓度降低后,中低浓度的IgY对P.intermedius增殖的抑制能力明显大于中低浓度的乳铁蛋白,表明IgY的抑菌能力更加出众。响应面法优化IgY对口腔厌氧致病菌的抑制,结果显示IgY在165-181mmol/L的剂量下能够最大限度抑制口腔厌氧致病菌的增殖和代谢物的产生。母鸡经特定微生物免疫后,产生特异性抗体IgY,浓缩和聚集在蛋黄中,收集鸡蛋,提取纯化IgY,含量高,特异性强,对实验动物没有刺激和过敏反应,作用于牙周炎和口臭动物模型,能明显改善牙周炎和口臭的典型症状,体外人工唾液模拟体系中特异性的抑制叁种口腔致病菌的增殖和代谢物的释放,免疫球蛋白IgY通过抑制口腔厌氧致病菌增殖治疗实验动物牙周炎和口臭等口腔疾病。(本文来源于《上海海洋大学》期刊2018-05-20）
杨海明,巨晓军,王志跃,马尹鹏,马义国[3]（2016）在《卵黄免疫球蛋白对雏鸡生长性能和免疫机能的影响》一文中研究指出本试验旨在研究饲粮中添加卵黄免疫球蛋白(IgY)对雏鸡生长性能和免疫机能的影响。选取同一批出雏、体重相近的1日龄罗曼褐蛋鸡公雏240只,随机分为2组(对照组和试验组),每组6个重复,每个重复20只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验组在对照组饲粮基础上添加0.1%的IgY。试验期5周。分别于1、3、5周龄,每个重复选取接近该重复平均体重的试验鸡2只,称重、采血并用于血清免疫指标测定,然后取免疫器官、空肠食糜用于相关指标测定。结果表明:1)与对照组相比,试验组1、3、5周龄雏鸡平均日增重有增大的趋势(0.05<P<0.10)。2)试验组1、5周龄雏鸡胸腺相对重和1周龄脾脏相对重显着高于对照组(P<0.05),试验组1、5周龄雏鸡法氏囊、脾脏、胸腺中IgY含量与对照组差异均不显着(P>0.05)。3)试验组1周龄雏鸡血清球蛋白、α-干扰素、白细胞介素-2含量和溶菌酶活性,3周龄雏鸡血清总蛋白、球蛋白和白细胞介素-2含量,5周龄雏鸡血液淋巴细胞数量均显着高于对照组(P<0.05)。4)试验组1周龄雏鸡肠道食糜中分泌型免疫球蛋白A含量显着高于对照组(P<0.05)。由此可知,雏鸡饲粮中添加IgY可以促进雏鸡1~5周龄生长性能和免疫机能的提高,但从提高免疫机能的角度看,育雏前期(1~3周龄)的作用效果更为明显。(本文来源于《动物营养学报》期刊2016年11期）
郑琦,胡博志,邹潮,王保华[4]（2016）在《鸡卵黄免疫球蛋白(抗体)在预防和治疗病原微生物感染中的作用》一文中研究指出在全球范围内每年因细菌严重感染而死亡的患者已达数百万之多,并仍呈上升趋势。所以致病病原微生物已逐渐成为全球性的主要的健康威胁。由于病原微生物的新陈代谢快、生命周期较短及抗生素的大量滥用,使得小分子抗生素的药物结合位点突变的概率大大增加,最终出现抗性菌株。而目前新一代抗生素的发现的速度又远小于耐药性菌株出现的速度,所以新一代替代抗生素的抗菌药物研发的意义十分主要。近些年,随着大量的体外(in vitro)和体内(in vivo)研究发现,特异性鸡卵黄免疫球蛋白(抗体)-Ig Y,可以成为一个非常好的抗病原微生物感染的替代抗生素药物。除此之外,鸡卵黄-Ig Y呈现出较多的优点如:生产成本低、安全性高等,而且特异性的保护性抗体可以较为容易的大规模制备。基于大量的研究结果,我们总结特异性Ig Y用于感染性疾病的预防和治疗,抵抗绝大多数病原微生物的感染。(本文来源于《人人健康》期刊2016年20期）
贺时飞,张颖,贺建军[5]（2016）在《抗轮状病毒鸡卵黄免疫球蛋白治疗小儿轮状病毒肠炎临床观察》一文中研究指出目的:探讨抗轮状病毒鸡卵黄免疫球蛋白治疗小儿轮状病毒肠炎的临床效果。方法:选取小儿轮状病毒肠炎患儿130例,采用随机抽样方法分为对照组和观察组各65例,两组患儿入院后均给予常规对症治疗,对照组患儿加用双歧杆菌乳杆菌叁联活菌治疗,观察组患儿加用抗轮状病毒鸡卵黄免疫球蛋白治疗,比较两组患儿临床疗效、平均病程、治疗后不同时间点腹泻次数、SIg A水平及轮状病毒含量等。结果:观察组患儿临床总有效率为95.38%,显着高于对照组的78.46%,差异有统计学意义(P<0.01);对照组患儿病程为(5.67±1.22)d,长于观察组的(4.50±1.09)d,差异有统计学意义(P<0.01);两组患儿治疗后不同时间点腹泻次数、SIg A水平及轮状病毒含量组内比较差异有统计学意义(P<0.05),其中对照组患儿治疗后3 d轮状病毒含量显着高于其他时间点,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患儿治疗3 d、5 d、7 d及10 d后腹泻次数和轮状病毒含量均显着少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患儿治疗1 d、3 d、5 d、7 d及10 d后SIg A水平均显着高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:抗轮状病毒鸡卵黄免疫球蛋白治疗小儿轮状病毒肠炎,有助于促进病毒清除及SIg A形成,可有效改善临床症状体征,缩短病程。(本文来源于《儿科药学杂志》期刊2016年06期）
贺真蛟[6]（2016）在《鸡卵黄免疫球蛋白N-糖基化及其对分子结构稳定作用研究》一文中研究指出糖基化是非常重要的蛋白质翻译后修饰之一。免疫球蛋白属于糖蛋白,其N-糖链存在不均一性,主要结构为双天线型复杂寡糖链。糖链的存在可维持IgG Fc片段的活性构象,不同糖型可调节IgG的抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用(ADCC)与补体依赖的细胞毒性作用(CDC),延长其在血清中半衰期。同时糖链的存在提高了IgG分子热稳定性,尤其对其CH2结构域贡献最大。糖链的存在可形成空间位阻效应,遮蔽蛋白酶的酶切位点,提高IgG抗蛋白酶水解的能力。鸡卵黄免疫球蛋白IgY存在糖基化修饰现象,与哺乳动物IgG相比,糖基化位点、糖型结构的不同将对IgY分子的结构与功能产生差异性的作用,本文系统研究了N-糖基化对IgY分子结构稳定性的作用,研究结果如下:1.分离鉴定了IgY,并建立了非变性条件制备去糖基化IgY的方法。经3.5%PEG6000、8.5%PEG 6000两步沉淀可获得粗提IgY。随后通过凝胶过滤色谱法对粗提IgY进一步纯化,在凝胶过滤色谱图中出现单一的分离峰。还原型SDS-PAGE结果表明在70 kDa与25 kDa有两条清晰的条带,经过MALDI-TOF/TOF MS与MASCOT表征,获得IgY轻链与重链水解肽段对应的特征离子峰,得分值在35以上,且肽段覆盖率达到36%以上。经过12%PEG 6000沉淀与凝胶过滤色谱纯化,高效液相表征IgY纯度达到92.01%,满足蛋白质结构研究的纯度要求。考查了PNGase F用量及孵育时间对IgY去糖基化程度的影响。实验发现随着酶用量的提高及孵育时间的延长,经高碘酸-希夫染色的IgY条带颜色逐渐变浅,表明去糖基化完成越彻底。确定去糖基化优化条件为800 NEB unit PNGase F、1 mg IgY 37℃孵育48 h。随后通过阴离子交换色谱技术对去糖基化IgY进行分离富集。2.研究了糖基化修饰对IgY分子结构的影响。傅里叶变换红外光谱显示,去糖基化后1200 cm-1~900 cm-1峰强度显着降低,表明糖链的切除。圆二色光谱结果表明,去糖基化后IgY分子二级结构发生了较显着的变化,α-螺旋结构含量由30.9%降至2.2%,β-折迭由41.8%降至23.3%,β-转角从22.3%升至25%,无规卷曲从5%升至28.5%。内源性荧光光谱结果表明去糖基化后IgY色氨酸微环境极性改变,分子疏水性变强,分子构象由舒展向紧凑状态转变,推测寡糖链的存在维护IgY结构的稳定性。盐酸胍变性实验证明,N-糖链的存在可将IgY抵抗盐酸胍诱导的去折迭能力提高了0.6 M,比IgG的高约0.1 M盐酸胍。以上结果可能是由于IgY比IgG分子糖基化位点多,且分布在IgY的不同区域,因此糖基化修饰对IgY分子结构稳定性作用更大。3.研究了糖基化在热力诱导IgY分子聚合过程中的作用。通过SDS-PAGE与SEC-HPLC分析发现,IgY在55℃孵育6 h时开始产生多聚体,且随着温度的升高多聚体数量快速增加;温度在60℃及以上时随着孵育时间的延长,多聚体的数量显着增加。去糖基化后,IgY在50℃下孵育6.5 h时产生少量的多聚体,且随着温度的升高、孵育时间的延长,IgY多聚体含量快速增加。实验结果表明N-糖基化对提高IgY热稳定性具有重要作用,约5℃;糖链的存在可以延缓热力诱导的IgY分子聚集,这对IgY生产过程中的巴氏杀菌工艺具有重要指导意义。4.优化了胃蛋白酶、木瓜蛋白酶消化IgY产生Fab片段的条件,(1)胃蛋白酶与IgY比例为1:10(w/w),孵育3 h;(2)木瓜蛋白酶与IgY比例为1:10(w/w),孵育3 h。考查了N-糖链对IgY抵抗蛋白酶水解的作用,酶与底物比例为1:40(w/w)时,胃蛋白酶、木瓜蛋白酶及糜蛋白消化过程中,去糖基化IgY被消化6 h后分子条带消失,但糖基化IgY经相同时间消化后仍存在明显的分子条带;IgY被胰蛋白酶消化90 min后仍有分子条带残留,但去糖基化IgY经90 min消化后分子条带消失,表明糖链的存在提高了IgY抗蛋白酶的水解性。5.分析了糖基化位点、糖型结构以及糖链对IgY分子量的贡献率。检测到两个糖基化肽段:SGSTYSLSSRVNVSGTDWR与PMVLQEHFNGTYSASSAVPVSTQD WLSGER,均为IgY重链肽段。其中SGSTYSLSSRVNVSGTDWR中存在糖基化位点Asn308,肽段PMVLQEHFNGTYSASSAVPVSTQDWLSGER中含有糖基化位点A sn407。IgY的N-糖链包含了两种糖型结构:高甘露糖链、复合型糖链,并以高甘露糖链居多;糖链末端存在唾液酸、半乳糖修饰;糖链分子量5.5922 kDa,占IgY总分子量的3.29%。(本文来源于《华中农业大学》期刊2016-06-01）
彭姣,徐丁,白挨泉,卢超,祁振强[7]（2016）在《两种复合型卵黄免疫球蛋白粉对仔猪腹泻病防治效果的研究》一文中研究指出试验旨在开发能够有效预防和治疗仔猪细菌性腹泻和病毒性腹泻的卵黄免疫球蛋白粉相关产品,将卵黄抗体的先进技术更好地应用于畜牧养殖中。采用两种复合型卵黄免疫球蛋白粉对人工感染细菌(ETEC)和病毒(PEDV和TGEV)的21日龄断奶仔猪进行预防和治疗试验。将复合型卵黄免疫球蛋白粉Ⅰ型按0.4%添加至仔猪断奶日粮中,攻毒后仔猪没有出现死亡情况,只有5头仔猪在攻毒初期出现轻微腹泻情况,随着饲喂的继续,5头仔猪腹泻很快得到控制,而攻毒对照组仔猪全部死亡;对21日龄仔猪攻毒,攻毒24h内仔猪陆续出现腹泻症状。在攻毒24h后采用复合型卵黄免疫球蛋白粉Ⅱ型产品以1∶3的比例配以葡萄糖生理盐水进行灌服治疗,经3d治疗后仔猪腹泻情况得到很大的改善,5d后腹泻仔猪基本痊愈,治愈率可达84%~88%。对存活仔猪进行带毒检测,结果显示,预防组存活仔猪带毒水平较其他组更低,治疗组其次,而药物治疗对照组带毒情况严重。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2016年05期）
李健春,王琼[8]（2015）在《核酸疫苗制备卵黄免疫球蛋白研究进展》一文中研究指出卵黄免疫球蛋白(Ig Y)由于其独特的分子结构和稳定性能,使得Ig Y的制备成为抗体领域的研究热点。核酸疫苗作为一种新型疫苗,在生产成本、免疫剂量和免疫保护力等方面比大多数传统疫苗更具有优势。核酸疫苗制备Ig Y结合了两者的优点,比常规免疫方法更具有优势,产生的Ig Y适用范围也更广。本文综述了一种经济、快速的Ig Y制备方法:核酸疫苗制备Ig Y。(本文来源于《中国实验动物学报》期刊2015年04期）
佟晨瑶[9]（2015）在《鸡卵黄免疫球蛋白的糖基化与功能特性的机制规律研究》一文中研究指出鸡卵黄免疫球蛋白,简称Ig Y(chicken egg yolk immunoglobulin)。由于Ig Y原料易得、制备简单、不与类风湿因子以及哺乳动物的补体发生交叉反应,应用十分广泛。目前Ig Y的分离纯化方法复杂且耗时长,性质不稳定,易受温度、p H值、酶的影响。Ig Y免疫球蛋白的糖链在维持其理化性质、抗原特性等功能中扮演着重要角色,对Ig Y进行糖基化修饰不仅可以维持空间构象、稳定糖蛋白结构、保护其免受某些蛋白酶裂解等方面有重要作用,而且还能改变某些生物活性和抗原特性。因此对Ig Y蛋白质进行糖基化修饰,具有十分重要的意义。本论文通过建立一种高效、简便的分离纯化的方法,制备了不同种类单糖与聚糖糖基化Ig Y,比较糖基化修饰前后Ig Y的结构与功能性的关系。研究结果如下:1.建立了一种适用于工业化生产高效、低成本的Ig Y提取方法。选用五种多糖(果胶、卡拉胶、羧甲基纤维素、甲基纤维素、硫酸葡聚糖)和五种浓度(0.01%、0.05%、0.1%、0.15%、0.2%)配制的去脂液,比较了其对Ig Y分离效果的影响,通过SDS-PAGE、Western blots以及HPLC对Ig Y的提取量、纯度进行分析。果胶、硫酸葡聚糖、卡拉胶、羧甲基纤维素均在0.1%浓度时对Ig Y分离效果最好,提取量可分别达到8.36 mg/m L、9.31 mg/m L、7.64 mg/m L和8.1 mg/m L,纯度分别达83.3%、80.1%、80.94%和79.94%,而甲基纤维素在0.15%处对Ig Y分离效果最好,其提取量和纯度分别为7.65 mg/m L,78.17%。ELISA分析表明提取的Ig Y均保持较高的免疫活性。综合比较,由0.1%果胶配制的去脂液分离纯化Ig Y的效果最好,提取量8.36mg/m L,纯度83.3%。本方法能快速除去鸡卵黄中的脂蛋白,操作简单,适合工业化生产。2.选择了四种单糖(葡萄糖、果糖、岩藻糖、甘露糖)和不同糖链长度的葡聚糖(5000K、20000K、40000K、70000K),利用美拉德反应分别对Ig Y进行糖基化修饰改性,对其产物进行结构表征。紫外光谱和SDS-PAGE结果表明,单糖与聚糖糖基化修饰的Ig Y,褐变程度均随着糖基化时间的增加而增大。其中,四种单糖中果糖最易发生糖基化反应,葡聚糖糖链长度越短,越易发生糖基化。同时,利用红外、圆二光谱和荧光光谱监测了糖基化Ig Y蛋白质随糖基化时间的延长二级结构的变化。结果表明,随着反应时间的延长,糖基化修饰Ig Y产物的荧光强度下降,说明其分子周围疏水环境发生变化。CD光谱表明糖基化后Ig Y的α-螺旋程度升高,β-折迭下降。氨基酸分析显示糖基化后Ig Y赖氨酸和精氨酸的含量明显减少。3.对单糖与聚糖基化Ig Y产物的热稳定性进行了研究。DSC结果表明糖基化能明显改善Ig Y的热稳定性。天然Ig Y的热变性温度为70.4°C,葡萄糖糖基化Ig Y热变性温度在反应18 d达到最高(79.8°C),甘露糖糖基化Ig Y在24 d提高到最高(77°C),而果糖糖基化和岩藻糖糖基化Ig Y在12 d提高到最高,分别达到78.5°C和79°C。本文也比较了四种不同糖链长度的葡聚糖(5000K、20000K、40000K、70000K)糖基化对Ig Y热稳定性的影响。DSC结果表明,分子量5000聚糖修饰Ig Y产物的热变性温度在24 d达到最高(77.3°C),分子量20000聚糖修饰Ig Y产物在18 d达到最高值(75.9°C),分子量40000聚糖修饰Ig Y在18d提高最大(74.5°C),70000聚糖修饰Ig Y产物产物在12 d提高最大(74°C)。4.对单糖与聚糖糖基化Ig Y产物的免疫活性进行了研究。ELISA结果表明,葡萄糖、甘露糖、岩藻糖、果糖Ig Y糖基化产物的免疫活性在反应到第6天达到最高,分别比天然Ig Y提分别提高了30.3%、13.7%、12%、22.4%。分子量5000的Ig Y葡聚糖糖基化产物在反应到达第24天达到最高,但比天然Ig Y降低14.3%,分子量20000、40000、70000的Ig Y葡聚糖糖基化产物在反应到达第6天最高,分别降低37.4%、40.4%、44.3%。同时发现,葡聚糖糖链长度越短,免疫活性越高,其中G5000K>G20000K>G40000K>G70000。5.对单糖与聚糖糖基化Ig Y产物在模拟胃肠液中的稳定性进行了研究。ELISA结果表明,天然Ig Y经过模拟胃肠液消化后活性保持率在20.1%。葡萄糖和岩藻糖糖基化Ig Y产物的免疫活性保持率均在18天达到最高,分别比天然Ig Y提高了201%和121%;甘露糖基化Ig Y产物在12天达到最高,比天然Ig Y提高了200%;果糖糖基化Ig Y产物在24天达到最高,比天然Ig Y提高了180%。同时研究发现,随糖基化反应时间增加,聚糖Ig Y糖基化产物在模拟胃肠液中的稳定性有不同程度降低。(本文来源于《华中农业大学》期刊2015-06-01）
巨晓军,杨海明,王志跃,马尹鹏,谢艳娟[10]（2015）在《卵黄免疫球蛋白在畜禽生产中的研究与应用》一文中研究指出卵黄免疫球蛋白又称卵黄抗体,是指蛋黄中存在的抗体,是母鸡血液中的免疫球蛋白传递至鸡蛋卵黄并在鸡胚孵育过程中及孵育后对雏鸡起保护作用的免疫球蛋白,对雏鸡早期生长发育作用突出。随着对卵黄免疫球蛋白研究的不断深入,卵黄免疫球蛋白在家禽、猪和反刍动物上都有了广泛的应用。目前,卵黄免疫球蛋白在畜禽生产及疾病预防治疗方面的作用越来越受到关注和重视。本文主要对卵黄免疫球蛋白的特性、作用机理及其在畜禽生产中的应用等方面作一综述。(本文来源于《动物营养学报》期刊2015年03期）
鸡卵黄免疫球蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
IgY(Immunoglobulin of Yolk,IgY)是卵生动物主要免疫球蛋白,功能上等同于哺乳动物进化上的高级IgG,卵生动物IgY通过卵黄传输至胚胎,成为保护胚胎不受外界病原菌侵袭的抗体。鸡抗体IgY的收集和分离快速而经济,母鸡经特定微生物免疫后,从免疫母鸡的蛋黄中能获得效价高而持久的IgY抗体,被应用于抗菌、抗病毒、抗肿瘤和免疫检验。基于免疫球蛋白IgY的体内外功效作用,发现特异性IgY改善口腔厌氧致病菌(Porphyromonas gingivalis,Prevotella intermedius和Fusobacterium nucleatum)感染的大鼠牙周炎和口臭的典型症状,阐明IgY治疗口腔疾病的作用。1.免疫球蛋白IgY的制备和生物化学特性。P.gingivalis,P.intermedius和F.nucleatum菌液加入甲醛和弗氏佐剂,制成灭活疫苗,分3次免疫优质来杭蛋鸡(Leghorn),收集鸡蛋,分离蛋黄,采用0.01 mol/L pH5.0的醋酸缓冲液充分搅拌,4℃冷藏沉降脂质物质,离心后收集上清液,采用100 kDa孔径透析进行浓缩,获得IgY,经真空冷冻干燥和ELISA效价检测,其含量为360 mmol/L,对P.gingivalis,P.intermedius和F.nucleatum的效价分别为1:25600、1:12800和1:25600。SDS-PAGE显示IgY的分子量180 kDa,由两条重链(67-70 kDa)和两条轻链(25kDa)组成。2.免疫球蛋白IgY作用实验动物的免疫特性。以IgY作为体外入侵抗原,检测Wistar大鼠血液中CD4~+和CD8~+的数量和比值,免疫调节因子组胺、IgM、IgE和IgG等的变化,分析IgY可能引起的Wistar大鼠的免疫应答,新西兰兔的皮肤刺激和豚鼠的皮肤变态反应,评价样品的急性、多次皮肤刺激和皮肤变态反应强度,评价IgY对实验动物的免疫作用特性。结果显示,实验组和对照组的大鼠体重和进食量均无显着变化,组胺和IgM在第9天显着升高后恢复正常水平,IgG和IgE基本无变化,CD4~+和CD8~+细胞数量分别为1902.60和974.00、免疫细胞中占比为54.36%和27.83%,CD4~+/CD8~+比值为1.95,都显着低于阳性对照(p<0.05),且在正常范围内。皮肤刺激试验急性1-72 h、慢性1-14 d均无刺激,皮肤变态试验激发后24 h和48 h有2例积分>2的动物,属于微弱变态反应。免疫应答、皮肤刺激和皮肤变态试验结果表明IgY不会引起大鼠的免疫应答,对新西兰兔皮肤无刺激性,对豚鼠皮肤有微弱的变态反应,当IgY的含量降低时其皮肤变态反应将得到有效控制,表明IgY作为外来抗原对机体无致敏性。3.免疫球蛋白IgY治疗大鼠牙周炎的功效。用口腔厌氧致病菌P.gingivalis,P.intermedius和F.nucleatum建立大鼠牙周炎动物模型,给药期间,每周探针检测并记录牙龈指数(GI)、菌斑指数(PI)和探诊出血指数(BOP),ELISA试剂盒测定血液中IL-6和TNF-α的含量,取组织固定,采集X射线标本数码照片,观察牙槽骨吸收情况,制作病理切片,观察牙周组织的病理变化情况。结果显示给药后GI、PI和BOP的分数分别降低90.00%、81.82%和100.00%,血液中IL-6和TNF-α的浓度降低63.04%和54.05%,与对照组相比,特异性IgY能够显着降低(p<0.05)GI、PI和BOP指数,有效改善牙龈炎症、菌群共聚和牙周组织出血等症状,缓解牙周炎大鼠牙周组织病变,并可促进新牙周纤维及新骨的生成,减轻因牙周炎造成的炎症应答,表明IgY对口腔致病菌介导的牙周炎有显着的预防和治疗作用。4.免疫球蛋白IgY对口臭动物模型的影响。基于口臭的发病机理,采用P.gingivalis、P.intermedius和F.nucleatum诱导,饮用蔗糖水促进口腔厌氧致病菌定植的方式,制备大鼠口臭模型,给药IgY,检测GI、PI和口臭指数(HI)的变化,顶空固相萃取-气相色谱质谱联用技术(SPME-GCMS)发现大鼠口臭模型的口腔中厌氧致病菌代谢物的种类和含量变化,ELISA试剂盒检测血液中IL-6和TNF-α水平。结果显示,口腔中厌氧致病菌代谢物,主要由醛类、酮类、羧酸类和含氮化合物类组成,给药后GI、PI和HI的评分减少55.67%、57.14%和50.00%,血液中IL-6和TNF-α的浓度降低74.44%和85.09%,口腔中厌氧致病菌代谢物变化最大的有正己醛、2,5-二甲基-3(2H)呋喃酮、乙酸、正己酸、氨和乙烯基异丙基醚,相对含量分别降低8.84%、7.84%、8.11%、11.24%、8.51%和12.00%,且高剂量降低的百分比大于低剂量,表明特异性IgY能有效缓解由口腔厌氧致病菌引起的口腔健康问题和代谢物产生的异味,对口腔厌氧致病菌介导的口臭具有预防和治疗的功效。5.免疫球蛋白IgY抑制口腔厌氧致病菌增殖特性的研究。以人工唾液为培养基,模拟在口腔环境中不同剂量IgY对P.gingivalis、P.intermedius和F.nucleatum叁种口腔厌氧致病菌以及组合菌液的增殖抑制作用,气味扫描仪(E-Nose)对人工唾液模拟体系中气味轮廓成分进行主成分分析,GCMS分析人工唾液模拟体系中口腔厌氧致病菌的代谢产物挥发性有机物(VOCs)的种类以及含量变化,Halimeter检测人工唾液模拟体系中口腔厌氧致病菌的代谢产物挥发性硫化物(VSCs)的含量变化。结果显示P.gingivalis在人工唾液中呈S型生长曲线,HI指数呈现逐渐上升的趋势;添加叁种剂量IgY后,能够有效抑制口腔厌氧致病菌在人工唾液模拟体系中的增殖,尤其是高剂量IgY在6 h可显着抑制(p<0.05)口腔厌氧致病菌的生长繁殖;气味扫描仪对人工唾液模拟体系中气味轮廓成分主成分分析显示IgY给药组能与对照组显着区分,且具有浓度依赖性,VOCs的种类有酮类、羧酸类、酯类、芳香族和含氮化合物,其中2,4-二叔丁基苯酚、1,4-二氧代全氢吡咯并[1,2-a]吡嗪、反式芥酸酰胺、5-氯-3-溴-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶和十一烷变化量最大,分别降低1.01%、1.43%、1.13%、0.94%、1.15%、0.72%,不同剂量给药组的VSCs的含量比对照组降低16~44%,表明人工唾液模拟体系中气味成分发生了明显的变化,特异性IgY有效降低口腔厌氧致病菌中VSCs和VOCs的产量,通过抑制口腔厌氧致病菌的增殖,降低致病菌代谢物的产生,缓解由代谢物引起的口腔炎症和异味,阻断口腔疾病的发生。比较IgY与鱼精蛋白、乳铁蛋白和甲硝唑3种抑菌剂的抑菌作用,结果显示高浓度的IgY对P.gingivalis和F.nucleatum的增殖有显着的抑制,而高浓度的乳铁蛋白对P.intermedius的增殖有显着的抑制,但当浓度降低后,中低浓度的IgY对P.intermedius增殖的抑制能力明显大于中低浓度的乳铁蛋白,表明IgY的抑菌能力更加出众。响应面法优化IgY对口腔厌氧致病菌的抑制,结果显示IgY在165-181mmol/L的剂量下能够最大限度抑制口腔厌氧致病菌的增殖和代谢物的产生。母鸡经特定微生物免疫后,产生特异性抗体IgY,浓缩和聚集在蛋黄中,收集鸡蛋,提取纯化IgY,含量高,特异性强,对实验动物没有刺激和过敏反应,作用于牙周炎和口臭动物模型,能明显改善牙周炎和口臭的典型症状,体外人工唾液模拟体系中特异性的抑制叁种口腔致病菌的增殖和代谢物的释放,免疫球蛋白IgY通过抑制口腔厌氧致病菌增殖治疗实验动物牙周炎和口臭等口腔疾病。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
鸡卵黄免疫球蛋白论文参考文献
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