根结线虫拮抗放线菌NZ-5菌株的鉴定及其发酵条件优化

根结线虫拮抗放线菌NZ-5菌株的鉴定及其发酵条件优化

论文摘要

以根结线虫二龄幼虫为试材,研究1株分离自土壤样本的放线菌菌株NZ-5的杀线虫活性,其发酵培养滤液对根结线虫二龄幼虫有较强的毒杀活性,24 h校正死亡率达到84.36%。为了高拮抗菌株进一步应用于田间生产实践,采用形态特征观察、培养特征观察和理化特性检测方法,结合16S rDNA基因序列分析,对其进行鉴定,同时对菌株发酵液对二龄幼虫的致死率来明确该菌株的最优发酵条件。结果表明:菌株的上述特征与链霉菌属Streptomyces中的微白黄链霉菌S.albidoflavus相似性很高,因此菌株NZ-5被鉴定为链霉菌属Streptomyces微白黄链霉菌S.albidoflavus。进一步的发酵条件优化试验发现,该菌株在以燕麦片为碳源、酵母粉为氮源、培养温度为25℃,摇床转速在210 r·min-1震荡培养4 d,起始pH为7,装液量为75 mL时菌株发酵培养液对根结线虫的毒杀活性为93.29%,相比优化前提高了8.93个百分点,菌株NZ-5能够有效杀死根结线虫二龄幼虫,可作为优良菌株进行杀线虫生物农药的进一步研发。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 试验材料
  •     1.1.1 菌株及线虫
  •     1.1.2 培养基
  •   1.2 试验方法
  •     1.2.1 发酵液的制备
  •     1.2.2 试验设计
  •       1) 碳源:
  •       2) 氮源:
  •       3) 培养温度:
  •       4) 培养时间:
  •       5) 摇床转速:
  •       6) 起始pH:
  •       7) 装液量:
  •   1.3 项目测定
  •     1.3.1 毒杀活性测定
  •     1.3.2 活性菌株形态学观察
  •       1) 光学显微镜观察:
  •       2) 电子显微镜观察:
  •     1.3.3 活性菌株培养特征观察
  •     1.3.4 活性菌株生理生化特性鉴定
  •     1.3.5 16S rDNA序列分析法鉴定
  •     1.3.6 活性菌株发酵条件的优化
  •   1.4 数据分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 形态学观察
  •   2.2 培养特征观察
  •   2.3 理化特性
  •   2.4 16S rDNA序列分析
  •     2.4.1 PCR扩增结果
  •     2.4.2 测序结果和序列分析
  •   2.5 分类鉴定结果
  •   2.6 NZ-5菌株发酵条件的优化
  •     2.6.1 不同碳源对杀线虫活性的影响
  •     2.6.2 不同氮源对杀线虫活性的影响
  •     2.6.3 培养温度对杀线虫活性的影响
  •     2.6.4 培养时间对杀线虫活性的影响
  •     2.6.5 摇床转速对杀线虫活性的影响
  •     2.6.6 起始pH对杀线虫活性的影响
  •     2.6.7 装液量对杀线虫活性的影响
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 马喆

    关键词: 根结线虫,放线菌,杀线虫活性,鉴定,发酵

    来源: 北方园艺 2019年13期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,工程科技Ⅰ辑

    专业: 有机化工,一般化学工业,植物保护

    单位: 北京农业职业学院

    基金: 北京市科委资助项目(Z181100002418002)

    分类号: TQ458;TQ920.6

    页码: 59-67

    总页数: 9

    文件大小: 2860K

    下载量: 240

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