导读:本文包含了淡水白鲳细胞系论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞系,淡水,凋亡,低温,细胞,活性氧,线粒体。
淡水白鲳细胞系论文文献综述
俞宏,朱敏杰,严文静,张铭[1]（2006）在《低温诱导淡水白鲳细胞凋亡的研究》一文中研究指出为探讨10℃低温导致淡水白鲳尾鳍细胞系CBT死亡的原因及其可能机制.采用CCK-8试剂盒法检测细胞存活率,荧光染料H2DCFDA染色测定细胞内活性氧(ROS)含量,亚二倍体峰和Tunel分析检测细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳进行DNA片段分析,Hoechst33258染色观察凋亡细胞核形态变化,比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率.结果表明随CBT细胞受10℃低温作用时间的延长,细胞存活率显着下降,细胞内ROS含量和LDH释放率显着增加(P<0.01).低温处理3 d的CBT细胞经流式细胞仪检测出现亚二倍体峰,凋亡率为13%.再经32℃复温12 h后,琼脂糖凝胶电泳显示DNA凋亡梯带;Tunel检测,低温处理3、4和5 d的CBT细胞分别有23.49%,27.72%和35.10%发生凋亡.低温处理5 d的CBT细胞核分裂成多个小核,呈现出典型的凋亡小体.因此10℃低温能诱导CBT细胞凋亡.ROS参与了10℃低温致CBT细胞损伤及凋亡过程.(本文来源于《浙江大学学报(农业与生命科学版)》期刊2006年02期）
严文静,陈汉民,赵小立,俞宏,张铭[2]（2005）在《低温诱导淡水白鲳尾鳍细胞系早期凋亡》一文中研究指出淡水白鲳属喜温性鱼类,本文以其尾鳍细胞系CBT为研究材料,探讨低温胁迫(10℃)对细胞的影响。实验采用MTT法测定细胞活力,透射电子显微镜观察超微结构,激光扫描共聚焦显微镜检测磷脂酰丝氨酸(PS)对翻和线粒体膜电位的变化。结果显示:低温处理导致细胞活力和线粒体膜电位显着下降(P<0.01);电镜下可见核质过聚等现象;10℃处理3d,Annexin-V-FITC/PI双染表明87.7%的细胞进入早期凋亡。由此认为,冷胁迫淡水白鲳CBT细胞致死的途径是细胞凋亡。(本文来源于《实验生物学报》期刊2005年02期）
严文静[3]（2004）在《淡水白鲳尾鳍细胞系的建立及低温诱导细胞凋亡的研究》一文中研究指出淡水白鲳属于喜温性鱼类，水温降至10℃时就出现寒害死亡。作者以淡水白鲳尾鳍组织为材料，植块培养法建立细胞系，命名为CBT。CBT细胞呈圆形或多边形，多为上皮样细胞，体积较大。核型分析表明，该细胞系的染色体数目是54条，为正常二倍体细胞。 本文以CBT细胞为研究对象，探讨了低温胁迫(10℃)对细胞的影响。实验应用Hoechst33258染色观察细胞形态变化；光学显微镜观察细胞骨架的改变：台盼兰、MTT法测定细胞活力；透射电子显微镜观察超微结构；激光扫描共聚焦显微镜检测磷脂酰丝氨酸(PS)外翻和线粒体膜电位的变化；流式细胞仪检测细胞凋亡亚峰；琼脂糖凝胶电泳观察DNA降解片段。实验结果表明，低温处理导致细胞收缩变圆，失去贴壁能力，伴随着张力纤维断裂破碎；随着低温处理时间的延长，细胞活力和线粒体膜电位显着下降(P＜0.01)；电镜下可见核质边聚现象，即染色质凝集成块靠近核膜，呈花瓣状、新月状或“8”字形：annexin-V-FITC／PI双染表明冷孵育可直接诱导细胞进入早期凋亡；流式细胞仪检测到10℃处理4d细胞凋亡率为23.04％。而晚期凋亡特征“DNA Ladder”和凋亡小体现象出现在复温阶段(冷孵育5～8d，32℃复温12h)。由此认为，冷胁迫淡水白鲳细胞致死的加04年浙江大学硕士学位论文途径是细胞凋亡，冷孵育可以直接诱导细胞进入早期凋亡，晚期凋亡现象必须经历复温阶段。同时，对冷诱导细胞凋亡机理的初步探讨表明，冷孵育后胞内氧化水平明显升高(P<0.01)，抗氧化剂维生素E可以显着保护细胞。结果提示:冷诱导淡水白鳗CBT细胞凋亡可能是由活性氧(ROS)介导的。(本文来源于《浙江大学》期刊2004-06-01）
徐德立[4]（2002）在《低温胁迫对草鱼ZC-7901细胞系和淡水白鲳CBS细胞系某些细胞功能影响的研究》一文中研究指出本文以培养的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)吻端细胞系ZC-7901和淡水白鲳(Colossoma brachypomum)吻端细胞系CBS为模型，研究低温胁迫对其细胞膜流动性、钙离子水平、ATP酶、丙二醛(MDA)含量、超氧化物阴离子(O2-')水平以及抗氧化酶系统的影响，以期探讨它们与细胞耐寒性的关系。 与对照(ZC-7901，28℃；CBS，37℃)相比，2-3℃低温胁迫6h、12h、24h、48h、72h时，草鱼ZC-7901细胞的微粘度(η)分别是对照的1.110、0.926、0.726、0.646、0.696倍；脂质流动性为0.862、1.118、1.610、1.927、1.716倍；细胞膜的流动性为0.901、1.080、1.377、1.547、1.435倍。而在8℃低温胁迫下淡水白鲳CBS细胞的微粘度(η)为对照的1.068、0.905、0.937、1.024、1.071倍；脂质流动性为0.912、1.154、1.098、0.966、0.908倍；细胞膜的流动性为0.937、1.105、1.068、0.976、0.934倍。结果提示在低温胁迫开始较短时间(6h)内，草鱼细胞和淡水白鲳细胞膜流动性均下降，草鱼细胞随着低温时间的延长，膜流动性开始增高，低温48h时，达到最高，随后又下降，但仍高于对照。而淡水白鲳细胞在低温胁迫12h时膜流动性达到最大值，随低温时间延长，膜流动性下降，在低温胁迫48h时膜流动性低于对照，低温胁迫72h时膜流动性更低。可见在低温胁迫下草鱼细胞仍能保持合适的流动性，而淡水白鲳只在较短时间内保持一定的流动性。 草鱼ZC-7901细胞在2-3℃低温胁迫6h，钙离子(Ca2+)水平即升高，低温胁迫12h时，Ca2’水平达到峰值。随着低温时间的延长，Ca2’水平开始下降，在低温48h时，Ca2+／’水平比正常时的稍高，在低温处理72h时，Ca2’水平稍低于正常水平。淡水白鲳细胞在8℃低温处理6h，Ca2’水平同样升高，低温处理至12h时，C／’水平达到峰值，低温处理24h时Ca2’水平又下降，但仍高于正常水平。但随着低温时间的延长，Ca2’水平又增加。可见草鱼细胞内的Ca2’在低温胁迫时仍能保持一种稳态平衡，而淡水白鲳在较短时间(24h)内能保持钙的稳态平衡，但随着低温时间的延长，这种平衡遭到破坏。 与对照相比，低温胁迫6h、12h、24h、48h、72h时，草鱼ZC-7901细胞的MDA含量分别为对照组的1.40、1.75、1.36、1.31、1.27倍，低温胁迫12h时，MDA含量达到最高；其O2—水平在低温胁迫6h时达到最高，然后逐渐下降，但 惭 仁 人 沓 林十含 伍《大 仍稍高于对照组。淡水白鸥CBS细胞内MDA含量分别是对照的l．06d．14、l．22。 1．26、1．25倍；其 0。水平低温胁迫 6h时达最高，12h时下降，但随低温胁迫时 间的延长，其水平又逐渐升高并高出对照组较多。 在同样条件处理下，草鱼ZC－7901细胞的ATP酶活力分别为对照组的0．522。 0．896、豆．246、3．716、12．455． 10．873倍，力入放线菌素 D（终浓度 0．lpg／ml） 与瞟吟霉素（终浓度 lpg／ml）后再低温胁迫 48h，对 ATP酶活力的抑制率分别为 50．8％和64．3％：CBS细胞ATP酶活力分别为对照的0．710、0．567、0．805、0．832、 0899、0．808倍。ZC－7901细胞SOD酶活力为对照的0．892、1．5、l二5、1．26、 1．22倍；CAT酶活力为 0．913、2．27、6．73、1．78、1．13倍；POD活力为 0．8093、 0．9048、1．5、l刀05、l刀04倍；GSH－PX酶活力为0．604、1．3、l刀8、l刀7、0．987 倍。SOD及 GSH－PX酶活力在低温胁迫 12h时达到最大值；而 CAT和 POD酶活 力在低温胁迫24h时达到最大值。所有这4种酶在低温胁迫6h时酶活力均降至 最低。(本文来源于《浙江大学》期刊2002-06-01）
郑春静[5]（2002）在《淡水白鲳细胞寒害致死机理初步研究》一文中研究指出本研究利用已建立的淡水白鲳细胞系，从细胞生物学水平对非耐寒鱼类淡水白鲳细胞在低温下死亡的机理进行分析。 样品处理方法：淡水白鲳细胞在37℃下培养作为参照组，对照组细胞从37℃转到10℃或3℃中培养，处理时间分别为3h、6h、12h、24h、48h、72h。淡水白鲳成体鱼在不同温度下培养6h，再进行解剖取不同组织提取测定。 本研究采用的主要实验方法：通过荧光显微观察、电镜超微结构观察确定CBT(淡水白鲳臀鳍细胞)和CP(草鱼胚胎细胞)在低温处理后的显微与超微结构的变化。应用DNA电泳分析细胞DNA在低温处理后的断裂现象。用荧光探针PI(碘化丙碇)、Indo-1及Rhodamin123分别检测细胞在低温度处理后DNA含量、细胞内钙离子浓度和线粒体膜电位。NBT法测定细胞内超氧阴离子(O_2~-)；采用邻苯叁酚自氧化的方法测定低温下CP、CBT细胞系SOD活性以及不同温度下淡水白鲳成体不同组织SOD活性。 结果表明：(1)CBT在低温协迫下，细胞圆缩，细胞核变形，染色质浓缩且边位，细胞质空泡状；细胞死亡率随处理时间的增加而增加；细胞内钙离子浓度随处理时间延长而递增；线粒体膜电位差在低温处理早期急速上升，随后一直下降；细胞内超氧阴离子(O_2~-)在低温处理前期出现高峰，接着呈下降趋势；细胞内SOD活性在低温处理前期减弱，接着上升，然后持续下降。经低温处理的CBT细胞DNA电泳并未出现表征凋亡的“DNA Ladder”梯带。(2)CP细胞系在10℃低温下细胞死亡率与时间成正比，120d的细胞具典型的凋亡现象，即细胞核固缩、染色体边集在核膜内侧；细胞体积变小；琼脂糖凝胶电泳上显示特征性的“梯状”带。在低温3℃协迫下，CP细胞线粒体膜电位差呈下降趋势，钙离子浓度则呈上升态。(3)从所测的每尾鱼的各种组织细胞总的SOD活性可见：随着温度的升高，鱼整体的SOD水平也随着上升。成体淡水白鲳随着温度下降，不同组织的SOD活性变化略有不同，脑部SOD的活性随着养殖水温的下降先升高，而后下降。从整体鱼分析，SOD主要分布在脑、肝、肾、肌肉及鳃组织。(4)从实验 中可见低温（门℃）使鱼体色变深，突然升温导致鱼体色变白，随着养殖时间延长， 3天后又恢复原来的体色。从解剖中看到，当温度下降到17℃时，淡水白娼的脑 腔内脂类呈半流动状态，随着温度的下降滞流现象更为严重。 结论：（）初步研究认为淡水白娼细胞在低温下的死亡可能属于非凋亡形式 的程序性细胞死亡。（2）细胞凋亡是 CP细胞在 10 C保存时间过长导致细胞不能 在正常生长温度下恢复生长的根本原因。（3）CBT和 CP低温致死机制有所不同。 （4）随着温度的升高，鱼整体的 SOD水平也随着上升，表明淡水白娼新陈代谢 水平随温度升高而提高，生命活动旺盛。低温协迫导致淡水白娼脑部缺氧，SOD 活性持续上升。(本文来源于《浙江大学》期刊2002-05-01）
张铭,陈荪红,赵小立1[6]（2001）在《淡水白鲳细胞建系及其生长温度特性的研究》一文中研究指出Four cell lines originated from embryo,caudal fin,anal fin and snout of Colossoma brachypomum were established,and subcultured for 70,47,45 and 40 passages to the present.The results of the experiment indicated that the four cell lines were fibroblast|like diploid cells,and the model number of their chromosome is 54.These cell lines could grow under temperature of 20-35℃,and its optimum temperature was 27-30℃.The cells grew slowly at 20℃,stopped growth at 15℃,and died below 10℃.This indicated that the growth temperature of the these cell lines was coincident with that of fish.In addition,the attachment time,doubling time,mitotic index,passage survival rate and cell cycle were determined and compared.(本文来源于《生物工程学报》期刊2001年01期）
淡水白鲳细胞系论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
淡水白鲳属喜温性鱼类,本文以其尾鳍细胞系CBT为研究材料,探讨低温胁迫(10℃)对细胞的影响。实验采用MTT法测定细胞活力,透射电子显微镜观察超微结构,激光扫描共聚焦显微镜检测磷脂酰丝氨酸(PS)对翻和线粒体膜电位的变化。结果显示:低温处理导致细胞活力和线粒体膜电位显着下降(P<0.01);电镜下可见核质过聚等现象;10℃处理3d,Annexin-V-FITC/PI双染表明87.7%的细胞进入早期凋亡。由此认为,冷胁迫淡水白鲳CBT细胞致死的途径是细胞凋亡。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
淡水白鲳细胞系论文参考文献
[1].俞宏,朱敏杰,严文静,张铭.低温诱导淡水白鲳细胞凋亡的研究[J].浙江大学学报(农业与生命科学版).2006
[2].严文静,陈汉民,赵小立,俞宏,张铭.低温诱导淡水白鲳尾鳍细胞系早期凋亡[J].实验生物学报.2005
[3].严文静.淡水白鲳尾鳍细胞系的建立及低温诱导细胞凋亡的研究[D].浙江大学.2004
[4].徐德立.低温胁迫对草鱼ZC-7901细胞系和淡水白鲳CBS细胞系某些细胞功能影响的研究[D].浙江大学.2002
[5].郑春静.淡水白鲳细胞寒害致死机理初步研究[D].浙江大学.2002
[6].张铭,陈荪红,赵小立1.淡水白鲳细胞建系及其生长温度特性的研究[J].生物工程学报.2001