市售川产水豆豉分离株中高产蛋白酶与β-葡萄糖苷酶菌株的菌属鉴定与产酶能力评价

市售川产水豆豉分离株中高产蛋白酶与β-葡萄糖苷酶菌株的菌属鉴定与产酶能力评价

论文摘要

目的筛选并鉴定72株川产水豆豉分离株中高产蛋白酶及β-葡萄糖苷酶的菌株,为深入研究水豆豉的营养价值及开发其发酵菌株提供实验依据。方法采用酪蛋白法和对硝基苯-β-D半乳糖吡喃糖苷(pNPG)法分别测定菌株产蛋白酶和β-葡萄糖苷酶的能力,选出优势菌株,通过形态学、生化特征、16S rRNA和基质辅助激光解析-电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对其进行鉴定。绘制菌株生长曲线和产酶曲线并测得其遗传稳定性。结果选择产蛋白酶能力前10名菌株中β-葡萄糖苷酶活力最高者(0.084 U/L)作为优势菌株,表型及分子生物学法鉴定其为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。菌株生长曲线、产酶曲线符合枯草芽孢杆菌特性,遗传稳定性结果显示其产酶能力能稳定遗传至第9代并于第10代开始下降。结论从72株川产水豆豉分离株中筛选出的高产蛋白酶和β-葡萄糖苷酶菌株经鉴定为枯草芽孢杆菌。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 实验菌株
  •     1.1.2 主要试剂和仪器
  •     1.1.3 引物
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 实验菌株的分离
  •     1.2.2 产蛋白酶能力的检测
  •     1.2.3 产β-葡萄糖苷酶能力的检测
  •       1.2.3.1 液体发酵培养基的配制
  •       1.2.3.2 操作方法
  •     1.2.4 优势菌株鉴定
  •       1.2.4.1 形态学鉴定
  •       1.2.4.2 生化鉴定
  •       1.2.4.3 16S rRNA鉴定
  •       1.2.4.4 MALDI-TOF-MS鉴定
  •     1.2.5 菌株生长曲线
  •     1.2.6 菌株产酶曲线
  •     1.2.7 菌株遗传稳定性实验
  • 2 结果
  •   2.1 优势菌株
  •   2.2 菌株鉴定
  •     2.2.1 形态学鉴定结果
  •     2.2.2 生化鉴定结果
  •     2.2.3 16S rRNA鉴定结果
  •     2.2.4 MALDI-TOF-MS鉴定结果
  •   2.3 菌株生长曲线
  •   2.4 菌株产酶曲线
  •   2.5 遗传稳定性实验结果
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 庞钰鑫,刘雪薇,黄嘉玲,左浩江,许欣,裴晓方

    关键词: 川产水豆豉,菌属鉴定,枯草芽孢杆菌,发酵菌株,产蛋白酶,产葡萄糖苷酶

    来源: 四川大学学报(医学版) 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业,预防医学与卫生学

    单位: 四川大学华西公共卫生学院(华西第四医院)卫生检验与检疫系,食品安全检测与风险评估四川省重点实验室

    基金: 国家重点研发计划(No.YFZ1200203)资助

    分类号: R155.5

    DOI: 10.13464/j.scuxbyxb.2019.05.016

    页码: 714-719

    总页数: 6

    文件大小: 1205K

    下载量: 137

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