脑心肌炎病毒VP2基因真核表达质粒的构建

论文摘要

目的构建脑心肌炎病毒（encephalomyocarditis virus,EMCV）VP2基因真核表达质粒,并于CHO细胞中表达。方法 RT-PCR法扩增EMCV VP2目的基因,克隆至载体pcDNA3. 1中,构建重组质粒pcDNA3. 1-VP2,脂质体法转染CHO细胞。转染48 h后,RT-PCR法检测EMCV VP2基因mRNA的转录情况,免疫组化法及Western blot法检测EMCV VP2蛋白的表达情况。结果经双酶切及测序鉴定,重组质粒pcDNA3. 1-VP2构建正确。EMCV VP2基因m RNA及蛋白可在CHO细胞中正常转录及表达,且EMCV VP2蛋白可与兔抗EMCV阳性血清发生特异性结合,主要分布于CHO细胞膜上。结论成功构建了重组质粒pcDNA3. 1-VP2,并有效地在CHO细胞中进行了表达,为EMCV VP2基因体外表达及其功能的进一步研究奠定了基础。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张海霞,王兴陇,王丹,李倩,韩玉梅,赵克学,梁浩勤,邓盈盈,李向茸,李琼毅,冯若飞

关键词: 脑心肌炎病毒,基因,基因重组,真核表达,细胞

来源: 中国生物制品学杂志 2019年02期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室,甘肃省动物细胞工程技术研究中心,西北民族大学生命科学与工程学院,兰州民海生物工程有限公司

基金: 国家自然科学基金项目(31460665),国家民委中青年英才计划((2018)98),教育部“长江学者和创新团队发展计划”项目(IRT_17R88)

分类号: R373

DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.002461

页码: 139-143

总页数: 5

文件大小: 327K

下载量: 117

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