基于可视化环介导等温扩增技术快速检测金黄色葡萄球菌

论文摘要

应用环介导等温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）建立基于颜色判定的快速、灵敏的金黄色葡萄球菌检测方法。根据金黄色葡萄球菌特异性靶基因SAR0395设计LAMP引物,建立可视化LAMP检测方法。优化的反应体系为:1.6μmol/L内引物（FIP和BIP）,0.2μmol/L外引物（F3和B3）,4.0 mmol/L MgSO4,1.0 mmol/L dNTPs,0.4 U/μL Bst 2.0 WarmStart?DNA聚合酶,120μmol/L羟基萘酚蓝,扩增温度60℃,扩增时间60 min。在可视化LAMP体系中添加两条环引物（LF和LB）反应时间可缩短至20 min。该可视化LAMP反应60 min,其基因组灵敏度可以达到0.010 3 fg/μL,菌落灵敏度可以达到1.9 CFU/mL;利用46株金黄色葡萄球菌和24株非金黄色葡萄球菌证实该可视化LAMP具有良好的特异性和可靠性。本研究中建立的可视化LAMP可为金黄色葡萄球菌的快速检测提供一种新的技术。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 郭建平,万佳佳,陆兆新,吕凤霞,张充,赵海珍,别小妹

关键词: 可视化,环介导等温扩增技术,检测,金黄色葡萄球菌,羟基萘酚蓝

来源: 食品科学 2019年20期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 南京农业大学食品科技学院

基金: 江苏省农业自主创新项目（CX(18)3053）,“十三五”国家重点研发计划重点专项(2018YFC1602500)

分类号: TS207.4

页码: 325-331

总页数: 7

文件大小: 1403K

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