（四川省自贡市中医医院四川自贡643000）
【摘要】选取我院72例血液的样本，分别使用高液压相层分析法和免疫法以及亲和色谱法为其检测，分析3种检测方法的结果和不精密度。结果表明，高液压相层分析、亲和色谱法和免疫法三种检测方法检测糖化血红蛋白，高液压相层分析、亲和色谱法的检验结果更为准确可靠。
【关键词】高液压相层分析法；免疫法；亲和色谱法；糖化血红蛋白
【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2017）05-0194-02
糖尿病患者主要依靠糖化血红蛋白作为筛查标准，有效的为糖尿病患者诊断和后期血糖治疗和控制血糖提供有利的诊断依据，2002年糖尿病血糖的水平已经是美国糖尿病协会诊断糖尿病病情发展的“金标准”[1]。糖化血红蛋白是反应患者2～3个月中的血糖水平，也是我国糖尿病控制的标准，我院为研究各种测定糖化血红蛋白的方法的结果和不精密度，整理材料和报告如下。
1.资料与方法
1.1血液标本来源
选取我院72例血液的样本，（糖尿病患者和健康体检人群EDTA抗凝全血），所有采集的血样标本6h后必须检测完。
1.2糖化血红蛋白方法
所有血液样本分别使用以下3种分析方法进行糖化血红蛋白测定。按照CLSIEP9—A2方案中，每天采集新鲜血液标本8份，用4种检测方法对这8份标本按照1→8的顺序进行检测，在按照8→1的顺序重复检测，本次共计72份血液标本，9天完成，检测的结果进行记录。
1.2.1高液压相层分析法[2]糖化血红蛋白机器型号：美国Bio—RadD—10，试剂批号：1号液，（AA01911）；2号液：AA01912，wash液：AA01913，校准批号：Level1—AA00927，Level2—AA00928；严格按照仪器使用说明书，对血液样本进行测定，质控品由伯乐公司提供，批号：Level1—33801。
1.2.2亲和色谱法[3]整套糖化血红蛋白仪器由挪威Axis—Shield公司提供，型号：AfinionAS100，校准品批号：10146319；严格按照仪器使用说明书，对血液样本进行测定，质控品由伯乐公司提供，批号：Leve2—33802。
1.2.3免疫法糖化血红蛋白仪器由瑞士罗氏公司提供，型号：Tina—QuantHbALCⅡ试剂，校准品批号：158507—01，质控品批号：260311，对血液样本进行预处理后再上机测定。
1.3检测分析判定标准[4]
按照HPLC为测定结果的参照，计算3种检测方法的结果（Y）和均值(X)，根据EP9—A2的方法进行离群值检查，排除离群值，判断（X）值的范围Y=BX+a，（r≥0.975或r2≥0.95），并计算出检测系统的偏倚：偏倚公式：（Xc×允许误差)/2，预期偏倚公式：a+(b-1)Xc，计算比对系统(Y)与参考系统(X)之间的相对偏差(SE%)。如果预期偏倚小于允许偏倚则为可接受，否则为不可接受。
1.4统计学方法
采用SPSS16.0软件包对本组实验全部数据进行统计处理，采用Cusum方法检测，偏倚分析采用Bland-Altman方法，相关性分析采用Pearson相关。
2.结果
2.1三种检测方法测定糖化血红蛋白相关性和相对偏倚分析结果
三种检测方法测定72例血液样本离群点的检验，均未发现离群点，因高液压相层分析法符合范围要求，所以本次计算没有该种方法。根据卫生部临床检验中心HbA1c标准中允许误差为总体均值±20%，根据允许偏移公式，（7.2%×±20%)/2=±0.72%，因此，免疫法以及亲和色谱法偏移值分别为0.18%和0.14%，符合允许偏移值72%。
2.2三种检测方法不精密度测定结果
高液压相层分析、亲和色谱法和免疫法三种检测方法分别采用高低两个质控品测定总CV值，分别是：2.1%、1.7%、4.2%、3.7%、1.8%、1.4%，其中免疫法均值、批内、批间和总CV值明显高于其他两种检测方法，见表。
3.讨论
HbAlc是血红蛋白的主要成分，该种成份与血液中荀萄格浓度持续升高成正比，而与采血时的血糖浓度并不相关，目前，临床常用的HbA1c测定方法进行糖化血红蛋白测定主要有三种检测方法：离子交换高效液相色谱法(HPLC)、免疫法及亲和层析法[5]。1995年我国才制定了糖化血红蛋白的参考物质和参考测定方法。经过本次研究结果显示：高液压相层分析、亲和色谱法和免疫法三种检测方法分别采用高低两个质控品测定总CV值，分别是：2.1%、1.7%、4.2%、3.7%、1.8%、1.4%，其中免疫法均值、批内、批间和总CV值明显高于其他两种检测方法。
以上结果充分说明，高液压相层分析、亲和色谱法和免疫法三种检测方法检测糖化血红蛋白，高液压相层分析、亲和色谱法的检验结果更为准确可靠。
【参考文献】
[1]李义龙，单战海，韩冰，等.酶法糖化血红蛋白试剂盒方法学比对评价[J].中国实验诊断学，2010，14(8):1336.
[2]杨书田．糖化血红蛋白检验在糖尿病诊治中的应用体会[J]．中国医药指南，2012，10（32）：213-214．
[3]张婕，陈宇红．糖化血红蛋白在糖尿病诊治中的临床应用[J]．内科理论与实践，2011，6（4）：312-315．
[4]王冬环，张传宝，陈文祥，等.应重视糖化血红蛋白测定技术及其量值溯源[J].中华检验医学杂志，2008，31:965-968.
[5]赵彩虹．糖化血红蛋白检测对糖尿病诊治的临床价值探讨[J]．中国医学创新，2010，27（27）：176-177．