吴继周1王燕2
(1博州食品药品检验所新疆博尔塔拉蒙古自治州833400)
(2新疆维吾尔自治区人民医院药学部新疆乌鲁木齐830001)
【摘要】目的：建立一种反相高效液相色谱法测定沙日毛都-8中栀子苷含量的方法。方法：采用反相高效液相色谱法测定沙日毛都-8中栀子苷的含量。色谱柱：EclipseXDB-C18(4.6×250mm,5μ)；流动相：乙腈-水(15：85)；流速：1.0ml?min﹣1；检测波长：238nm；柱温：30℃；进样量：10μl。结果：栀子苷进样量在0.0304～0.912μg范围内，与峰面积呈良好的线形关系(r=0.999)；平均回收率为97.98%，RSD=2.0％。结论：本方法简便﹑准确﹑重现性好，可用于该制剂的质量控制。
【关键词】高效液相色谱法栀子苷沙日毛都-8
【中图分类号】R29【文献标识码】B【文章编号】2095-1752（2014）18-0328-02
沙日毛都-8是新疆博尔塔拉蒙古自治州蒙医医院生产的常见蒙药制剂，由栀子、黄柏、香墨、甘草、红花、荜茇、熊胆、黑云香等八味蒙药组方。本品为黑绿色粉末；气香，味苦。主治功能清热凉血，固精。用于清热，尿路感染，尿中带血，妇女经下。疗效好，临床用量大，但无控制其内在质量的指标。该制剂中栀子为其中的一味主药，国内关于HPLC法测定中药中栀子苷的方法已很成熟[1]，但测定沙日毛都-8中栀子苷的含量目前尚未见报道。笔者采用HPLC法测定沙日毛都-8中栀子苷的含量，取得较为满意的效果，为制定沙日毛都-8的有效成分含量测定指标提供了依据。
1仪器与试药
LC-20AT高效液相色谱仪(SPD-20A紫外检测器；SIL-20A自动进样器；CBM-20A控制器；CTO-10ASVP柱温箱)；AE240型电子天平(METTLER)；栀子苷(中国药品生物药品检定所，供含量测定用,批号:110749-200410)；沙日毛都-8(新疆博尔塔拉蒙古自治州蒙医医院制剂室生产，批号：20130201)；甲醇、乙腈均为色谱纯；水为纯化水。
2方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱：EclipseXDB-C18(4.6×250mm,5μ)；流动相：乙腈-水(15：85)；流速：1.0ml?min﹣1；检测波长：238nm；柱温：30℃；进样量：10μl。
2.2对照品溶液制备
精密称取栀子苷对照品15.2mg，置50ml容量瓶中，加甲醇至刻度。再取10ml用甲醇稀释至100ml(每1ml含栀子苷30.4μg)。
2.3供试品溶液的制备
取本品粉末0.4g精密称定,置具塞锥形瓶中，精密加入25ml甲醇，称定重量，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
2.4空白实验
按沙日毛都-8的制法，制成不含栀子的阴性样品，并按2.3规定的方法制备阴性对照溶液，分别取对照品溶液﹑供试品溶液﹑阴性对照溶液按上述色谱条件进行测定，阴性对照液在与栀子苷相应保留时间处无色谱峰出现,表明阴性样品无干扰。
2.5线形范围考察
精密量取对照品溶液1μl﹑5μl﹑10μl﹑15μl﹑20μl﹑25μl﹑30μl分别进样，按上述色谱条件进行测定，以峰面积为横坐标，进样量(μg)为纵坐标，进行线性回归，栀子苷的回归方程为Y=1.4594×106x+25257.56，r=0.999，表明栀子苷在0.030～0.912μg范围内，与峰面积呈良好的线形关系。
2.6精密度试验取对照品溶液，重复进样5次，进样量10μl，按峰面积计算，栀子苷的RSD为0.22％。
2.7重复性试验
取同一批供试品5份，分别精密称定，按2.3规定的方法制备并测定，结果栀子苷的平均含量为0.52%,RSD为2.397％。
2.8稳定性试验
精密吸取同一份供试品溶液分别在0﹑3﹑6﹑9、12小时测定栀子苷含量，5次测定栀子苷峰面积的RSD为0.816％，说明供试品溶液在24小时内稳定。
2.9回收率试验
精密称取上述已测得栀子苷含量为0.52%的同一批号样品5份，分别精密加入对照品溶液(0.181mg/ml)5ml后，按2.3规定的方法制成供试品溶液，并进行测定。结果见表1。
3提取时间的确定
笔者将样品分别超声提取20分钟、30分钟、40分钟，其含量测定结果RSD为0.38％，表明20分钟超声提取即可使栀子苷提取完全，故选择提取时间为20分钟。
本方法简便﹑准确﹑重现性好，可用于该制剂的质量控制，建议
对该制剂增加栀子苷的含量测定。
参考文献
[1]中国药典[S]，一部，2010：231