产Surfactin芽孢杆菌的筛选及特性研究

论文摘要

以发酵上清液表面活性的排油活性、乳化能力、表面张力为初筛参数,srf A基因为复筛指标,定向筛选产表面活性剂surfactin的菌株。通过薄层层析（thin layer chromatography,TLC）定性分析和超高效液相色谱-电喷雾四级杆飞行时间质谱（ultra performance liquid chromatography/electrospray ionization quadrupole time-of-flight high-resolution/mass spectrometry,UPLC-ESI/Q-TOF/MS）定量分析,筛选获得1株可利用啤酒糟高产surfactin的菌株41-3,鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）,采用液质分析所产surfactin同系物组分。B. subtilis 41-3在MSM培养基中发酵,surfactin产量为541. 32 mg/L,同系物以脂肪酸链为C14和C13的surfactin为主,两者含量约占75%。以啤酒糟酶解液作为碳源,发酵生产surfactin,产量提高1. 38倍,达到746. 35 mg/L。且surfactin的合成向长链脂肪酸surfactin迁移,表明其具有更强的生物表面活性。该研究结果为surfactin菌株筛选提供新的思路,为发酵生产surfactin提供了新的原料来源,为啤酒糟综合利用提供新的途径,具有应用前景。

论文目录

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

1.2 培养基

1.3 仪器与设备

1.4 方法

1.4.1 发酵上清液性质测定

1.4.1. 1 排油活性（ODA）测定

1.4.1. 2 乳化指数（E24）测定

1.4.1. 3 表面张力（SFT）测定

1.4.2 srf A基因特异PCR分析

1.4.3 发酵产物分析

1.4.3. 1 薄层层析（TLC）

1.4.3. 2 UPLC-ESI/Q-TOF MS条件

1.4.4 surfactin定量检测

1.4.5 利用预处理BSG酶解液中发酵生产surfactin

1.4.6 发酵产物纯化及保湿性测定

1.4.7 菌株鉴定

1.4.7. 1 菌株形态观察

1.4.7. 2 菌株16S r DNA分析

2 结果与分析

2.1 产surfactin菌株定向筛选

2.1.1 基于发酵上清液表面活性特性的初筛

2.1.2 基于菌株srf A基因特异PCR的复筛

2.2 利用BSG的高产菌株的选择

2.2.1 发酵产物的定性分析

2.2.1. 1 TLC法定性分析发酵产物

2.2.1. 2 菌株41-3发酵液提取物中surfactin定性分析

2.2.2 surfactin高产菌株的筛选

2.2.3 利用BSG产surfactin菌株surfactin产量及同系物成分分析

2.2.3. 1 利用BSG产surfactin菌株surfactin产量

2.2.3. 2 不同碳源条件下发酵产物中surfactin同系物分析

2.2.4 高产surfactin菌株鉴定

2.2.4. 1 菌株41-3形态观察

2.2.4. 2 菌株41-3分子生物学鉴定

3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李彦林,张蔚,李晓玉,鲁心怡,曹钰

关键词: 生物表面活性剂,枯草芽孢杆菌,啤酒糟,同系物分析

来源: 食品与发酵工业 2019年13期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 有机化工,一般化学工业

单位: 江南大学生物工程学院,教育部工业生物技术重点实验室(江南大学)

基金: 高等学校学科创新引智计划(111计划)资助项目(111-2-06),江苏高等优势学科建设工程资助项目(PAPD),江苏省现代工业发酵协同创新中心资助项目,江苏高校品牌专业建设工程资助项目(TAPP)

分类号: TQ423;TQ920.6

DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.019918

页码: 31-37

总页数: 7

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