长毛明对虾酚氧化酶原基因cDNA克隆及组织表达分析

长毛明对虾酚氧化酶原基因cDNA克隆及组织表达分析

论文摘要

酚氧化酶(phenoloxidase,PO)属于对虾免疫系统的核心酶,在机体抵抗微生物感染过程中起到重要的作用。本研究利用RT-PCR和RACE技术克隆长毛明对虾(Fenneropenaeus penicillatus)酚氧化酶原(prophenoloxidase,proPO)基因(F-proPO)。cDNA全长3 003 bp,包含63 bp的5′-UTR、879 bp的3′-UTR和编码686个氨基酸的2 061 bp的开放阅读框(ORF),预测分子量为78.05 kD,理论等电点(pI)为5.79;含有3个串联式血蓝蛋白结构功能域、2个保守的Cu2+结合位点和6个组氨酸残基;多重比对结果表明,F-proPO与中国明对虾proPO相似度最高(98%),与其他甲壳类动物proPO相似度为51%~93%。实时荧光定量PCR检测结果表明,该基因的表达具有组织特异性,在血淋巴中表达量最高。人工感染溶藻弧菌后,该基因在鳃、血淋巴、肠和性腺中表达水平显著上调;人工感染白斑综合征病毒后,该基因在脑、鳃、心、血淋巴和肠中表达水平显著上调。可见,长毛明对虾PO是参与机体免疫防御反应的一种重要分子。

论文目录

  • 1 结果与分析
  •   1.1 F-proPO cDNA序列分析
  •   1.2 F-proPO同源序列及系统进化分析
  •   1.3 F-proPO基因在各组织中表达分析
  •   1.4 病原感染后F-proPO基因表达模式变化
  • 2 讨论
  • 3 材料与方法
  •   3.1 实验材料
  •   3.2 溶藻弧菌和白斑综合征病毒人工感染试验
  •   3.3 样品的采集
  •   3.4 总RNA的提取及c DNA合成
  •   3.5 F-proPO基因c DNA全长克隆
  •   3.6 序列分析及进化树构建
  •   3.7 实时荧光定量PCR分析基因表达
  •   3.8 数据统计与分析
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 韦光本,伍元植,张依琳,吴凡,黄郁葱,蔡双虎,汤菊芬

    关键词: 长毛明对虾,酚氧化酶原,酚氧化酶,基因克隆,组织表达

    来源: 基因组学与应用生物学 2019年11期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技,农业科技

    专业: 水产和渔业

    单位: 广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室

    基金: 广东省海洋和渔业发展专项资金(鱼病防治)项目,广东海洋大学水产学院本科生进实验室项目共同资助

    分类号: S917.4

    DOI: 10.13417/j.gab.038.004910

    页码: 4910-4918

    总页数: 9

    文件大小: 5007K

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