黄曲霉毒素M1与赭曲霉毒素A联合作用诱导分化Caco-2细胞凋亡的机制

黄曲霉毒素M1与赭曲霉毒素A联合作用诱导分化Caco-2细胞凋亡的机制

论文摘要

目的:研究了黄曲霉毒素M1(Aflatoxin M1,AFM1)和赭曲霉毒素(ochratoxin A,OTA)交互作用诱导分化人结肠癌Caco-2细胞凋亡及其作用机制。方法:AFM1和OTA单独及联合作用于分化的Caco-2细胞后,通过阿尔玛蓝(Alamar-Blue)法测量细胞存活率,研究AFM1和OTA对细胞增殖的抑制作用;通过流式细胞术检测细胞凋亡率,活性氧荧光探针检测细胞活性氧(ROS)释放量,JC-1线粒体膜电位荧光探针检测细胞线粒体膜电位变化。蛋白免疫印迹法检测凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-9的表达水平。结果:AFM1和OTA可抑制分化的Caco-2细胞增殖并诱导其凋亡,单独使用12μmol/L AFM1和6μmol/L OTA作用于细胞存活率分别为95.59%和93.14%,联合作用下细胞存活率为81.57%,提示联合作用具有协同作用;AFM1和OTA单独处理细胞24 h后,细胞的凋亡率分别为25.68%和33.7%,联合作用细胞的凋亡率为37.4%;AFM1和OTA单独作用下细胞ROS的释放量分别是空白对照组的1.37倍和1.79倍,交互作用是空白对照组的6.21倍,交互作用对活性氧的释放量明显增加。结论:线粒体膜电位和线粒体相关凋亡蛋白的表达水平变化,说明AFM1和OTA可能通过线粒体途径诱导分化的Caco-2细胞凋亡。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 细胞株及试验试剂
  •     1.1.2 试验仪器
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 细胞培养
  •     1.2.2 细胞存活率测定
  •     1.2.3 细胞凋亡率测定
  •     1.2.4 细胞活性氧释放量检测
  •     1.2.5 线粒体膜电位
  •     1.2.6 线粒体相关蛋白表达检测
  •     1.2.7 数据分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 AFM1和OTA单独及联合作用对分化Ca-co-2细胞活性的影响
  •   2.2 AFM1和OTA单独及联合作用对分化Ca-co-2细胞凋亡的影响
  •   2.3 AFM1和OTA单独及联合作用对分化Ca-co-2细胞活性氧释放量的影响
  •   2.4 AFM1和OTA单独及联合作用对分化Ca-co-2细胞线粒体膜电位的影响
  •   2.5 AFM1和OTA单独及联合作用对分化的Caco-2细胞凋亡相关蛋白表达的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张焕,高亚男,郑楠,王加启,任辉

    关键词: 黄曲霉毒素,赭曲霉毒素,凋亡,分化的细胞

    来源: 中国食品学报 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 吉林大学食品科学与工程学院,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部奶及奶制品质量监督检验测试中心(北京)

    基金: 国家重点基础研究发展计划(2011CB100805),现代农业产业技术体系专项资金(nycytx-04-01),国家自然科学基金项目(31501399)

    分类号: TS252.5;TS201.6

    DOI: 10.16429/j.1009-7848.2019.03.011

    页码: 93-101

    总页数: 9

    文件大小: 2399K

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