导读:本文包含了冷冻优化程序论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:精液,稀释液,程序,绵羊,超低温,小鼠,胚胎。
冷冻优化程序论文文献综述
王新奇[1](2014)在《绵羊精液稀释液、冷冻程序和离心除精浆的优化研究》一文中研究指出精液超低温冷冻保存技术是利用液氮作为冷冻源,经特殊处理后保存在超低温环境下,从而达到长期保存的目的。绵羊精子和其他物种相比,存在着生理生化方面的特性,对低温的抵抗力较其他动物低,因此绵羊精液冷冻后精子活率、顶体完整率等精子质量评价指标较低,冷冻效果一直不理想,难以在绵羊的人工授精中得以推广应用。为了提高绵羊冷冻精液品质,本实验以精液解冻后精子活率、顶体完整率、质膜完整率和谷草转氨酶及乳酸脱氢酶活性等为检测指标,对绵羊精液稀释液配方、细管冻精制作程序和离心除精浆技术进行了优化研究,实验结果如下:(1)在6种精液冷冻稀释液配方中,以含有D-果糖、柠檬酸和Tris的F配方冷冻效果最好,解冻后精子活率达到了0.41。(2)细管冻精制作过程中的精液最佳平衡时间为:2.5h,随着平衡时间的延长而解冻后精子品质开始降低;冷冻效果最好的是在温度为40℃,解冻时间为10s的条件下的解冻程序,解冻后精子活率极显着(P<0.01)高于解冻条件为70℃,6s下的解冻程序。(3)在精液冷冻的关键环节-精液冷冻降温速率中,以冷冻降温程序b(4℃~-15℃区间内降温速率;5℃/min,-15℃~-90℃区间内降温速率:20℃/min)为最优。(4)精液的最佳离心除精浆条件:离心速率为1250r/min,离心时间为5min。经过离心除精浆的解冻后精子活率极显着(P<0.01)高于不进行除精浆的精子活率。综上所述,本实验对绵羊精液超低温冷冻-解冻程序和冷冻稀释液配方以及离心除精浆技术进行了优化筛选,使绵羊精液解冻后活率达到0.35以上,可以满足生产需要。(本文来源于《内蒙古农业大学》期刊2014-06-01)
胡传活,王献伟,胡传水,凌泽继,卢晟盛[2](2011)在《猪精液冷冻保存程序的优化》一文中研究指出研究共4个试验:①按入氮温度分为-5、-30、-60、-90、-120℃5个组;②按鲜精液预处理方式分为未预稀释和预稀释2个组;③按解冻温度设37、50、70℃3个组;④按稀释后精子密度分为1.25×108、2.50×108、5.00×108spz/mL 3个组。结果表明:①不同入氮温度下精子冻后活力差异不显着,但随着入氮温度的降低,精子冻后活力呈升高趋势;②预稀释不能显着提高平衡后精子活力,但可以显着或极显着提高精子稀释后活力、冻后活力、VAP、VSL及VCL等运动指标;③3种解冻温度在精子冻后活力、VAP、VSL、VCL等4个冻后运动指标上没有显着差异,但是,随着解冻温度的上升,冻后活力呈上升趋势;④3种稀释后精子密度在猪精子冻后活力、VAP、VSL上没有显着差异,但随着密度的上升,冻后精子活力及VAP呈下降趋势,而且最高密度组精子的VCL显着慢于其它两组。总之,5种入氮温度中,以-120℃组精子的冻后活力最高;预稀释对于新鲜猪精液的冷冻保存很有必要;3种解冻温度中,70℃组精子冻后活力最高;而高密度不利于猪精子的冷冻保存。(本文来源于《西南农业学报》期刊2011年04期)
罗明久,刘娜,苗德强,兰国成,马所峰[3](2005)在《应用乙二醇冷冻小鼠胚胎:优化和简化程序的探索》一文中研究指出提高解冻胚胎的发育能力和简化冷冻解冻程序是胚胎冷冻研究的两大永恒的主题。尽管乙二醇(EG)广泛用于家畜胚胎冷冻,但很少用于冷冻小鼠和人胚胎。为数很少的以EG慢冻小鼠或人胚胎的研究均采用较为复杂的人胚冷冻程序,未见简化程序和用EG冷冻小鼠桑椹胚的报道。采用简单的牛胚胎冷冻程序研究了发育时期、EG浓度、平衡方法、添加蔗糖以及解冻后脱除EG等对小鼠胚胎冻后发育能力的影响。结果显示:(1)致密晚期桑椹胚冻后体外培养囊胚发育率(81.92%±2.24%)和孵出率(68.56%±2.43%)显着(P<0.05)高于4细胞、8细胞胚胎和致密早期桑椹胚胎;(2)1.8molLEG冷冻小鼠致密晚期桑椹胚的囊胚发育和孵出率显着高于其它浓度;(3)在EG中平衡10min的冻后囊胚发育显着好于平衡5、20或30min;(4)两步平衡冷冻胚胎的囊胚发育率和孵出率显着高于一步平衡;(5)用EG冷冻小鼠胚胎无需添加蔗糖;(6)解冻后可不脱除EG;(7)冻后发育的早期囊胚和囊胚细胞数明显少于体内发育胚胎。因此,用EG冷冻小鼠胚胎的最佳方案为:致密晚期桑椹胚用1.8molLEG不添加蔗糖、两步平衡15min、以简单的牛胚胎冷冻程序冷冻解冻、解冻后不脱除EG直接培养或移植。(本文来源于《生物工程学报》期刊2005年05期)
陈亚明[4](2002)在《绵羊精液超低温冷冻程序及稀释液优化方法的研究》一文中研究指出本研究通过系列试验,对绵羊精液冷冻优化程序、稀释液优化配方、影响冷冻-解冻精子受胎率的因子、冷冻降低冻精受精能力的机理和绵羊精液品质模糊综合评定方法的建立等5个方面进行了深入探索,研究结果表明: 1.以冷冻—解冻精子活力、生存指数、顶体完整率和精浆中GOT释放量等为评价指标建立如下绵羊精液冷冻优化程序:(1)精液与稀释液按1:3稀释→(2)二次稀释法:38℃下用Ⅰ液(不含甘油)稀释精液,4℃下再加入Ⅱ液(含甘油)→(3)200ml体积水浴2.5h水浴平衡法→(4)-110℃~-120℃下滴冻→(5)38℃水浴中每2粒冻精加50μlVB12解冻。 系列试验发现,38℃下200ml体积水浴2.5h平衡到4℃(降温速率为0.23℃/min)的平衡方法比8层纱布包被、50ml、100ml、150m体积水浴平衡方法对绵羊冷冻-解冻精子有较好的保护效果(P<0.05)。38℃下VB12解冻优于55℃或65℃以上高温解冻(P<0.05),是生产条件中简便而有效的解冻方法。绵羊精液颗粒冷冻稀释液适宜的最终甘油浓度为4.5%,二次稀释法比一次稀释法能够显着减少精子GOT、LDH和ALP释放量(P<0.05)。 2.通过逐步优化筛选出9个冷冻稀释液优化配方:(1)稀释液Ⅰ:3.0285g叁基—1.6593g柠檬酸—2.5673g蔗糖—卵黄15%(v/v)—甘油4.0%(v/v)—青霉素和链霉素分别为10万单位;(2)稀释液Ⅱ:稀释液Ⅰ+0.75g果糖;(3)稀释液Ⅲ:稀释液Ⅱ+6mlVB6;(4)稀释液Ⅳ:稀释液Ⅱ+6mlVE;(5)稀释液Ⅴ:稀释液Ⅱ+6mlVm2;(6)稀释液Ⅵ:稀释液Ⅱ+0.3g谷氨酸;(7)稀释液Ⅶ:稀释液Ⅱ+20mg山梨醇;(8)稀释液Ⅷ:稀释液Ⅱ+fmlF;(9)稀释液Ⅸ:稀释液Ⅱ+6mlVB6+6mlVE+fmlF。 冷冻—解冻精子活力、生存指数、顶体完整率由优化开始的0.41、3.69、41.73%分别增加到0.52、6.83、54.59%(分别提高26.84%、86.10%、29.86%);GOT、LDH、ALP释放量由优化开始的369.01、1577.68、626.89分别减少到210.37、932.16、403.47(分别降低42.99%、40.92%、35.64%)。 发现蔗糖稀释液比乳糖、葡萄糖和果糖稀释液对冷冻-解冻精子顶体完整率能提供更强的保护效果(P<0.05),能有效降低GOT的释放量(P<0.05)。叁基-蔗糖-卵黄稀释液中添加0.75g果糖有显着提高顶体完整率的效应(P<0.05)。维生素B6、VE、B12能够显着提高冷冻-解冻精子的活率。VE和B6对解冻精子顶体保护效果较好,并能提高生存指数。VE、B6和B12有降低精浆中GOT、LDH和ALP活性释放量的作用。谷氨酸和山梨醇在保护精子冷冻方面有一定效果。F对冷冻-解冻精子的存活时 间有明显的延长效果,最长可达35h。添加鱼腥草后精子运动速度明显加 快,头部侧摆幅度加大,尾部鞭打样运动频率增加,似有超激活现象。 3.在自然发情子宫颈输精条件下,稀释液1、稀释液皿、稀释液IV。 稀释液伽和稀释液k的30d不返情率(O)分另为30.95O、50.00O、38.75O、 48刀8%和60。61%。不返情率与解冻活率、输入有效精子数、顶体完整率、 输精深度、宫颈颧液存在一定的正相关,与精浆中GOT、LDH和ALP释 放量有一定的负相关关系。 4.通过鲜精和冷冻一解冻精子质膜顶体超微结构变化的对比观察初.步阐明冷冻降低绵羊精子受精力的机理。根据绵羊精子头部形态的超微结 构特征划分为5类:质膜顶体无可见变化、质膜膨大顶体无可见变化、质 膜丢失顶体膨大、外膜皱招核质不均和外膜破裂核质外溢的精子,前两类 是尚具有受精能力的精于,后叁类是丧失受精能力的精子。稀释液议、稀 释液*、稀释液 N、稀释液\M冷冻一解冻精子授精 3 cd不返情率高于稀释 液1的原因是在提高前两类精子比例的同时降低了后叁类精子的比例。稀 释液具有受精能力的前两类精子的排序为:稀释液出>稀释液*I>稀释液 W>稀释液皿>稀释液工分别为5二斗7%、啊刀5%、壮*6%、叩.叩%、 35.88%)。。稀释液具有丧失受精能力的后叁类精子的排序为:稀释液秩< 稀释液H卜稀释液w<稀释液皿<稀释液I(分别为17.刀%、叨*6%、 52.59O、54.74O。55.ZI%、64.12%)。由此阐明稀释液K不返情率高于其 它稀释液的原因是稀释液IX对绵羊精子具有较强的低温保护效果,经冷冻 -解冻过程其质膜顶体完整的精子数高于其它稀释液。同时发现稀释液IX、 稀释液*、稀释液I\’、稀释液皿对冷冻一解冻精子线粒体有较好的低温保 护效果。 5.建立了对实际生产具有指导意义的绵羊精液品质模糊综合评定方 法。应用模糊数学方法,计算每头种公绵羊的综合得分并排序:①151种 公羊,总分0.8984>②1021种公羊,总分0.8908>③597种公羊,总分 0.8850In④235种公羊,总分 0.8804>⑤173种公羊,总分 0.8746to③99(本文来源于《甘肃农业大学》期刊2002-05-01)
冷冻优化程序论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
研究共4个试验:①按入氮温度分为-5、-30、-60、-90、-120℃5个组;②按鲜精液预处理方式分为未预稀释和预稀释2个组;③按解冻温度设37、50、70℃3个组;④按稀释后精子密度分为1.25×108、2.50×108、5.00×108spz/mL 3个组。结果表明:①不同入氮温度下精子冻后活力差异不显着,但随着入氮温度的降低,精子冻后活力呈升高趋势;②预稀释不能显着提高平衡后精子活力,但可以显着或极显着提高精子稀释后活力、冻后活力、VAP、VSL及VCL等运动指标;③3种解冻温度在精子冻后活力、VAP、VSL、VCL等4个冻后运动指标上没有显着差异,但是,随着解冻温度的上升,冻后活力呈上升趋势;④3种稀释后精子密度在猪精子冻后活力、VAP、VSL上没有显着差异,但随着密度的上升,冻后精子活力及VAP呈下降趋势,而且最高密度组精子的VCL显着慢于其它两组。总之,5种入氮温度中,以-120℃组精子的冻后活力最高;预稀释对于新鲜猪精液的冷冻保存很有必要;3种解冻温度中,70℃组精子冻后活力最高;而高密度不利于猪精子的冷冻保存。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
冷冻优化程序论文参考文献
[1].王新奇.绵羊精液稀释液、冷冻程序和离心除精浆的优化研究[D].内蒙古农业大学.2014
[2].胡传活,王献伟,胡传水,凌泽继,卢晟盛.猪精液冷冻保存程序的优化[J].西南农业学报.2011
[3].罗明久,刘娜,苗德强,兰国成,马所峰.应用乙二醇冷冻小鼠胚胎:优化和简化程序的探索[J].生物工程学报.2005
[4].陈亚明.绵羊精液超低温冷冻程序及稀释液优化方法的研究[D].甘肃农业大学.2002