协同凝集论文_黄林华

导读:本文包含了协同凝集论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:脑炎,葡萄球菌,丙烯酰胺,血清,吸虫,弧菌,天冬。

协同凝集论文文献综述

黄林华[1](2014)在《重组L-天冬酰胺酶的性质、抗肿瘤活性及其与膜荚黄芪凝集素的协同作用》一文中研究指出天然植物来源的生物活性蛋白或通过现代生物技术获得的生物酶制剂因其在食品安全或医药领域中具有非常广阔的应用前景,近年来逐渐受到研究者的关注。本文系统研究了米黑根毛霉(R. miehei)CAU432来源的L-天冬酰胺酶的基因克隆表达、纯化、性质及其在焙烤食品和白血病治疗中的应用。L-天冬酰胺酶和植物凝集素都属于肿瘤治疗药物,因此,本文将实验室之前研究的膜荚黄芪凝集素(AML)和米黑根毛霉重组L-天冬酰胺酶分别作用白血病细胞,并研究了两者共同作用的抗肿瘤效果。本文随后进一步研究了膜荚黄芪凝集素的抗肿瘤活性及其作用机理。论文得出的主要结论如下:(1)首次利用保守区序列和快速末端扩增法成功从米黑根毛霉CAU432中克隆得到一个L-天冬酰胺酶基因RmAsnase。该基因cDNA全长2,156bp,完整阅读框(ORF)为2,049bp,编码682个氨基酸。通过同源性比对分析,RmAsnase编码的氨基酸序列和与霍乱弧菌(Vibrio cholerae)的L-天冬酰胺酶的同源性最高且仅为57%。RmAsnase在E. coli中成功诱导表达,通过Ni-IDA亲和层析一步纯化得到电泳级纯酶。该酶为双亚基蛋白,分子量为135kDa,纯化倍数为2.6倍,回收率为48.8%,比酶活为1984.8U mg-1。重组L-天冬酰胺酶RmAsnase最适反应pH值为7.0,在pH4.0-9.0的范围内保持稳定。RmAsnase最适温度为45℃,在低于45℃时比较稳定。RmAsnase对底物专一性较强,以L-谷氨酰胺为底物时的活性仅为L-天冬酰胺酶活力的1.8%。RmAsnase在添加量为10U g-1面粉时能够使面包和饼干中的丙烯酰胺的含量减少90%左右。RmAsnase能够不同程度地抑制K562、U937和Jurkat细胞的体外增殖。RmAsnase和膜荚黄芪凝集素AML作用以上叁株肿瘤细胞具有良好的协同效果,而且这种协同效果呈剂量和时间的依赖性。RmAsnase和AML的协同抗肿瘤效果不仅能够减少两种蛋白药物的加药量,还能加速细胞凋亡的诱导,减少药物作用时间。两种抗肿瘤活性蛋白的协同作用诱导的凋亡为caspase依赖性的凋亡信号途径。(2)AML是从膜荚黄芪的根里分离纯化得到的一种半乳糖特异结合的凝集素。AML能不同程度抑制K562,HeLa及U937叁种人类肿瘤细胞的体外增殖,其中尤其对K562细胞系的增殖抑制效果最为明显(IC50=15.8μg mL-1)。通过DAPI细胞核染色,DNA片段化,线粒体膜电位以及PI和Annexin Ⅴ双染等实验方法证实膜荚黄芪凝集素通过诱导细胞凋亡而抑制肿瘤细胞体外增殖。利用caspase广谱抑制剂z-VAD-fmk的介入和蛋白免疫印迹反应(Western bolt)研究细胞内凋亡的信号传导途径,结果表明AML诱导K562细胞发生caspase依赖的线粒体途径的凋亡。通过荧光标记法可以观察到AML能粘附到K562细胞表面,AML特异性结合的半乳糖和乳糖能够明显抑制其抗肿瘤活性以及诱导细胞发生凋亡的能力,说明AML通过结合K562细胞表面的半乳糖残基从而触发细胞内部的内源性的caspase依赖性途径的凋亡。(本文来源于《中国农业大学》期刊2014-05-01)

程龙飞,傅光华,彭春香,陈螺眉,施少华[2](2010)在《鸭出血症葡萄球菌A蛋白的协同凝集试验的建立》一文中研究指出用富含A蛋白的金黄色葡萄球菌国际标准菌株Cowan Ⅰ致敏兔抗鸭出血症高免血清,建立检测鸭出血症病毒的葡萄球菌A蛋白(SPA)协同凝集试验。试验表明,该方法简单、快速、特异、敏感,2 min内可判定结果,对病毒抗原的最低检出量为0.014 mg/mL,比血凝及血凝抑制试验敏感性高12倍。该方法能检出攻毒鸭,适用于临床诊断。(本文来源于《动物医学进展》期刊2010年10期)

易勇,贾莉萍,肖敏,陈兴明,刘春雷[3](2010)在《鲍曼不动杆菌协同凝集试剂的制备及初步应用》一文中研究指出目的:以富含SPA的金黄色葡萄球菌与鲍曼不动杆菌的多抗血清结合,制备特异的协同凝集试剂,探索其在鲍曼不动杆菌快速检测中的初步应用。方法:鲍曼不动杆菌免疫日本大耳白兔制备多抗血清并经吸收处理。富含SPA的金黄色葡萄球菌(No 1800株)经甲醛灭活后,与该多抗血清结合,制备协同凝集试剂,用各种临床分离菌株尤其是其它种类的不动杆菌与自制的协同凝集试剂反应,对该试剂的特异性和准确性进行评价。对临床新分离菌株,以本法和生物梅里埃公司的API 20E生化鉴定板对比,并结合细菌药敏结果判定自制协同凝集试剂的快速诊断效果。结果:鲍曼不动杆菌免疫日本大耳白兔获得了高质量的多抗血清,特异性好,凝集效价达1:320;抗体致敏的金黄色葡萄球菌,作为协同凝集试剂,能与待测鲍曼不动杆菌产生明显的凝集现象,灵敏度较血清凝集试验高16倍,而对其它种类的不动杆菌以及其它种属的细菌均无凝集现象。与传统的生化鉴定相比,协同凝集试验可提前1~2天得到细菌鉴定结果,结果准确性良好。结论:以鲍曼不动杆菌的多抗血清致敏富含SPA的金黄色葡萄球菌作为协同凝集试剂,对鲍曼不动杆菌具有特异、灵敏、快速的检测效果,可以作为常规诊断方法的有益补充。(本文来源于《中国卫生检验杂志》期刊2010年07期)

马步君,孙云霞,司红霞,马建忠[4](2010)在《鸡新城疫的SPA协同凝集试验快速诊断技术》一文中研究指出过去对鸡新城疫的确诊主要是分离病毒、血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI),虽然有效、准确,但较为费时。近年来确诊方法日益增多,如免疫荧光试验、中和试验、ELSA试验及RT-PCR方法等,但均受仪器或试剂的限制,在基层难以推广应用。因此,很有必要建立一种适合基层的简便快速检测手段,经探索发现应用SPA协同凝集试验可快速检测人工发病组织中的新城疫病毒,并具有较强的特异性和灵敏性,实用方便,易于在基层推广应用。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2010年05期)

孙乾[5](2009)在《猪链球菌SPA协同凝集试验血清分型方法的建立及在流行病学调查中的应用》一文中研究指出本试验用SPA协同凝集的方法对猪链球菌35个参考菌株进行血清学分型的研究,并应用初步建立的SPA协同凝集的方法,结合PCR分型方法和MLST分型方法,对中国部分地区猪链球菌的流行病学进行调查分析,结果如下:猪链球菌35个参考菌株的协同凝集试验:常规方法制备SPA菌悬液,将其依次稀释为100%、80%、50%、40%、30%、10%等几个梯度,血清倍比稀释,血清和SPA菌悬液1:2的比例致敏。凝集试验设立叁组对照:致敏SPA和抗原菌液、未致敏SPA和抗原菌液、SPA阴性菌悬液和抗原菌液。结果表明,致敏SPA的最佳工作浓度为50%,30个血清型的抗血清工作浓度介于25~26之间,受试菌株的液体培养浓度在OD值0.55~1.0之间均可出现肉眼可见的凝集颗粒,浓度为OD值0.7左右时,凝集现象最为明显,比较容易分辨。血清20型、31~34型观察到的凝集反应现象较弱,需要做进一步研究。对照组不发生凝集。1、2、7、9分型PCR显示为阳性的菌株,SPA协同凝集试验结果亦为阳性。与裸血清和抗原菌液的反应相比,SPA协同凝集的敏感性得到较大的提高,凝集现象更加明显,易于分辨,更能满足临床检测的需求。中国部分地区猪链球菌的流行病学调查:对来自中国部分地区的370份猪淋巴结、扁桃体、肝脏、脾等组织样品进行细菌分离鉴定,共检出gdh阳性的猪链球菌16株,表观带菌率为4.32%。1、2、7、9分型PCR检出2型6株,7型3株,9型1株,SPA协同凝集检测亦为对应的血清型。应用初步建立的SPA协同凝集的方法对实验室保存的20株猪链球菌进行分型鉴定,共检出1/2型1株,2型4株,后经PCR鉴定亦为均呈2型阳性.检出血清3型2株,4型2株,15型2株,10型、11型、16型各一株,首次在国内检出28型3株,29型1株。MLST分型结果显示,从同一地区分离的两株2型猪链球菌同属ST1型,同时发现一个新的ST型,被MLST数据库收录,命名为ST164。本试验建立的SPA协同凝集方法,结合PCR分子生物学的方法,可以准确区分有交叉凝集反应的菌株,也可以对PCR方法不能定型的菌株做出明确的血清学分型,从而更好地了解猪链球菌各血清型的分布及流行状况,为猪链球菌病的流行病学调查提供有力的工具,同时,也为预防和控制猪链球菌病提供一定的参考依据。(本文来源于《南京农业大学》期刊2009-11-01)

于庆潭,郑红霞,李伟[6](2009)在《协同凝集实验诊断副溶血性弧菌感染的初步探讨》一文中研究指出目的建立了一种快速简便的副溶血性弧菌的检测方法。方法将抗副溶血性弧菌多克隆抗体包被到金黄色葡萄球菌CowanI株上制成SPA菌体试剂,建立协同凝集试验(COA),检测样品中可能的副溶血性弧菌。结果COA检测的敏感性为2×106cfu/mL,检测过程为5min。112份临床标本的测定结果与培养法相比较,COA的特异性、敏感性、诊断符合率分别是100%、94.2%、97.3%。结论本研究为发展简便、敏感和快速的副溶血性弧菌的协同凝集检测试剂鉴定基础。(本文来源于《中国疗养医学》期刊2009年08期)

谭亚军,陈丽莎[7](2008)在《SPA协同凝集快速检测华支睾吸虫感染方法研究》一文中研究指出目的:研究用更加简便、快速、敏感、经济有效的SPA协同凝集实验替代镜检法检测华支睾吸虫。方法:用待检血清致敏SPA菌株,用华支睾吸虫囊蚴感染动物,获取虫体抗原进行反向协同凝集试验。结果:10份镜检华支睾吸虫虫卵阳性血和5份感染华支睾吸虫囊蚴的鼠血SPA协同凝集试验均为阳性;10份华支睾吸虫便检阴性和5份未感染华支睾吸虫囊蚴的大白鼠血均为阴性;便检华支睾吸虫卵阴性,回虫、蛲虫、鞭虫等虫卵阳性的血液10份血,结果均为阴性;Cowan l菌株无自凝。结论:该试验作为华支睾吸虫临床及流行病学调查的一种检测方法优于传统的镜检法,特别是流行病学调查更为实用。(本文来源于《中国卫生检验杂志》期刊2008年11期)

刘燕,刘军,冯书章,郭学军,孙洋[8](2008)在《猪链球菌2型sao基因的表达与协同凝集试验》一文中研究指出利用PCR的方法,从猪链球菌2型四川资阳分离株449-1扩增出sao基因,克隆到pMD18-T载体中,构建质粒pMD18T-sao。以SalⅠ和BamHⅠ从pMD18T-sao中切下目的sao基因片段并克隆到质粒pMAL-p2X中,构建重组表达质粒pMALp2X-sao,转在宿主菌TB1中进行诱导表达。sao基因经序列分析表明比GenBank报道序列AY864331少了270 bp;SDS-PAGE电泳检测结果表明,重组菌株表达出了136 kD左右的目的蛋白MBP-Sao,目的蛋白为可溶表达,约占菌体蛋白总量的12.3%。表达的蛋白可用Amylose树脂层析柱纯化。将纯化的融合蛋白MBP-Sao免疫家兔,利用所得抗血清建立协同凝集试验,用于检测猪链球菌。(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第叁届猪病防控学术研讨会论文集》期刊2008-09-01)

宋大伟,魏建超,何生虎[9](2006)在《猪乙型脑炎新型协同凝集试验与酶联免疫吸附试验(ELISA)方法的比较》一文中研究指出用新型SPA(Staphylococcal Protein A)协同凝集试验对88份猪血清进行了乙型脑炎病毒(JEV)抗体检测,并与酶联免疫吸附试验(ELISA)进行了对比,两种方法检测结果为:ELISA检测阳性率为62.5%(55/88),SPA阳性率为68.18%(60/88),二者阳性符合率为90.0%(54/60),总符合率为86.3%(76/88).对8份SPF猪血清进行检测,两种方法检测结果均为阴性.结果表明,SPA与ELISA检测乙型脑炎结果符合,前者更为简便和实用.(本文来源于《农业科学研究》期刊2006年04期)

宋大伟,魏建超,郑其升,周斌,曹瑞兵[10](2006)在《新型SPA协同凝集试验与血凝抑制试验检测猪乙型脑炎病毒特异性抗体的比较》一文中研究指出用新型SPA协同凝集(SPA-CoA)试验对144份猪血清进行了乙型脑炎病毒(JEV)抗体检测,并与血凝抑制试验(HI)进行了对比,两种方法检测结果血凝抑制试验,检测阳性率为57.63%(83/144),新型SPA-CoA阳性率为63.89%(92/144);二者阳性符合率87.00%(80/92),总符合率为88.89 %(128/144).对8份SPF猪血清进行检测,两种方法检测结果均为阴性.结果表明,新型SPA协同凝集试验与血凝抑制试验检测乙型脑炎结果符合,前者更为简便和实用.(本文来源于《中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会第六届代表大会论文集》期刊2006-08-01)

协同凝集论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

用富含A蛋白的金黄色葡萄球菌国际标准菌株Cowan Ⅰ致敏兔抗鸭出血症高免血清,建立检测鸭出血症病毒的葡萄球菌A蛋白(SPA)协同凝集试验。试验表明,该方法简单、快速、特异、敏感,2 min内可判定结果,对病毒抗原的最低检出量为0.014 mg/mL,比血凝及血凝抑制试验敏感性高12倍。该方法能检出攻毒鸭,适用于临床诊断。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

协同凝集论文参考文献

[1].黄林华.重组L-天冬酰胺酶的性质、抗肿瘤活性及其与膜荚黄芪凝集素的协同作用[D].中国农业大学.2014

[2].程龙飞,傅光华,彭春香,陈螺眉,施少华.鸭出血症葡萄球菌A蛋白的协同凝集试验的建立[J].动物医学进展.2010

[3].易勇,贾莉萍,肖敏,陈兴明,刘春雷.鲍曼不动杆菌协同凝集试剂的制备及初步应用[J].中国卫生检验杂志.2010

[4].马步君,孙云霞,司红霞,马建忠.鸡新城疫的SPA协同凝集试验快速诊断技术[J].中国畜牧兽医.2010

[5].孙乾.猪链球菌SPA协同凝集试验血清分型方法的建立及在流行病学调查中的应用[D].南京农业大学.2009

[6].于庆潭,郑红霞,李伟.协同凝集实验诊断副溶血性弧菌感染的初步探讨[J].中国疗养医学.2009

[7].谭亚军,陈丽莎.SPA协同凝集快速检测华支睾吸虫感染方法研究[J].中国卫生检验杂志.2008

[8].刘燕,刘军,冯书章,郭学军,孙洋.猪链球菌2型sao基因的表达与协同凝集试验[C].中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第叁届猪病防控学术研讨会论文集.2008

[9].宋大伟,魏建超,何生虎.猪乙型脑炎新型协同凝集试验与酶联免疫吸附试验(ELISA)方法的比较[J].农业科学研究.2006

[10].宋大伟,魏建超,郑其升,周斌,曹瑞兵.新型SPA协同凝集试验与血凝抑制试验检测猪乙型脑炎病毒特异性抗体的比较[C].中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会第六届代表大会论文集.2006

论文知识图

梨火疫病菌纯菌的协同凝集检测...人工接种样品的协同凝集检测单克隆抗体协同凝集试验灵敏度试验一7SPA与抗体结合示意图免疫电泳实验结果

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