导读:本文包含了釉丛蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,小鼠,釉质,大肠杆菌,抗体,基因,牙齿。
釉丛蛋白论文文献综述
顾淑萍,刘晗,史俊南,张莹,汪平[1]（2004）在《小鼠釉丛蛋白基因不同mRNA剪接体的克隆》一文中研究指出目的 :克隆小鼠釉丛蛋白基因不同mRNA剪接体 ,分析小鼠釉丛蛋白的多态性。方法 :采用异硫酸氰胍一步法从新生小鼠磨牙牙胚组织中提取总RNA ,反转录成cDNA第一链 ,经PCR扩增出小鼠釉丛蛋白基因特异片段 ,插入pBS质粒 ,筛选阳性克隆 ,并经酶切和核苷酸序列分析鉴定阳性克隆。结果 :克隆T1序列与已发表的完整釉丛蛋白mRNA序列一致。克隆T2序列与完整釉丛蛋白mRNA序列比较 ,缺失序列的 84～15 8的 75个碱基片段。结论 :小鼠釉丛蛋白基因在转录mRNA时 ,可产生不同的剪接体。(本文来源于《牙体牙髓牙周病学杂志》期刊2004年02期）
朱庆林,吴补领,顾淑萍,张莹,相顺利[2]（2002）在《小鼠釉丛蛋白在大肠杆菌中的表达,纯化及抗血清的制备》一文中研究指出目的 :以大肠杆菌为工程菌制备釉丛蛋白 ,纯化并免疫制备抗血清。方法 :用酶切、连接的方法将已克隆至 pBluescriptKS +载体中的TuftelincDNA片段 (编码 36 5个氨基酸 )用T4DNA连接酶连入载体pPRoEXTMHTc中 ,转化大肠杆菌 ,IPTG诱导。收集菌体 ,裂解后SDS -PAGE电泳 ,表达出分子量Mr 4 2×10 3 的融合蛋白。割胶后免疫新西兰大白兔 ,制备抗体。结果 :表达出分子量Mr 4 2× 10 3 的融合蛋白与预期一致。 8周以后 ,Western检测抗原抗体特异性及抗体效价达 1:10 0 0 0 0。结论 :认为成功的表达出釉丛蛋白并制备出了高效价多克隆抗体。(本文来源于《牙体牙髓牙周病学杂志》期刊2002年05期）
朱庆林[3]（2002）在《小鼠釉丛蛋白的基因克隆、表达及在不同组织分布的研究》一文中研究指出釉丛蛋白(tuftelin)是牙釉质基质蛋白的一种，完整的蛋白有390个氨基酸，分子量为44.3kDa，富含谷氨酸和天门冬氨酸。牙釉质的发育是由成釉细胞所分泌的釉质基质蛋白不断地降解并被矿物质取代，最后形成全身硬度最高的组织。因此，对釉基质蛋白的研究也就成为矿化研究领域中的热点。tuftelin在牙釉质基质蛋白中含量虽然不多，但根据它在釉质基质蛋白中出现最早，以及本身酸性的、亲水的、具有很强的结合钙离子的能力的特点，推断它可能启动釉质的矿化。因此，研究tuftelin对探讨牙釉质发育的调控具有十分重要的意义。本实验对tuftelin进行了cDNA克隆，原核表达、制备抗体、和不同组织的检测共四个部分的研究，为进一步的功能研究奠定了基础。 一、tuftelin的基因克隆 克隆tuftelin成熟肽编码区基因片段：以小鼠牙乳头组织中抽提的总RNA为模板，用Oligo(dt)作引物，逆转录合成牙乳头cDNA，然后利用RT-PCR法，从cDNA中扩增出tuftelin基因片段(约1.2kbp)，将所得基因片段插入pBluescript质粒载体，转化到大肠杆菌XL-1-Blue后挑选阳性克隆，提取重组质粒DNA。通过酶切分析和核苷酸序列分析对阳性克隆的鉴定， 第四军医大学硕士学位论文 结果表明克隆到的是一个比Macdongall 1998年所报道的序列少第二外显子 的转录本，证明了tUftelin剪接模式的多样性。 H、tuftelin表达、多抗制备和检测 用酶切、连接的方法将己克隆至 pBluescript KS＋载体中的 tuftelin cDNA 片段（编码 365个氨基酸）用 T4 DNA连接酶连入载体 pPROEX“HTC中， 转化大肠杆菌，WTG诱导。收集菌体，裂解后SDS－PAGE 电泳，表达出分 子量42kD的融合蛋白，与预期一致。割胶后免疫新西兰大白兔，制备抗体。 8周以后，Weste。检测抗原抗体特异性及抗体效价达 1：100000。认为成功 地表达出tuftelin并制备出了高效价多克隆抗体。 叁、tuftelin真核表达载体的构建和真核细胞转染 用原核系统表达的蛋白缺乏翻译后修饰，缺少真核生物体内蛋白的折 迭、糖基化等特点，所以原核系统表达的目的蛋白常常不具备天然蛋白的功 能。Tuflelin是高度糖基化的糖蛋白，因此选择真核表达系统所产生的蛋白 来研究其功能是最理想的方法。本研究将tuftelin全长基因克隆入真核表达 载体PcDNA3中，构建PcDNA3－tuftelin重组质粒。酶切鉴定和测序正确后， 将pcDNA3－tuftelin真核表达质粒转染COSJ细胞，Western七lot证明tuflelin 在COS－7细胞中得到了较高表达，为其功能研究打下了基础。 四、组织表达研究 用Western七＊法检测不同组织的表达情况，结果显示tuftelin在小鼠牙 胚中有表达，分子量约为42kD左右，其它软组织（包括心、肾、脾、肾） 同样有表达。这与前人的实验一致。提示tuftelin可能还具有其它的生物功 gg。 Tuftelin的克隆、蛋白表达、抗体制备以及组织学分布的研究为进一步 深入研究tUftelin的结构和功能、揭示牙釉质矿化机制打下了基础。(本文来源于《第四军医大学》期刊2002-04-01）
顾淑萍[4]（2002）在《釉质基质特异蛋白——釉丛蛋白》一文中研究指出釉基质蛋白是近年来的研究热点。釉丛蛋白是成釉细胞合成分泌的釉基质特异蛋白 ,主要分布于釉牙本质界 ,为磷酸化的酸性蛋白 ,能够螯合钙离子 ,在釉质形成中发挥启动矿化的作用。(本文来源于《牙体牙髓牙周病学杂志》期刊2002年01期）
顾淑萍,郝建军,史俊南,费俭,王丽珍[5]（2000）在《小鼠釉丛蛋白成熟肽编码区cDNA克隆》一文中研究指出目的 :克隆小鼠釉丛蛋白 (tuftelin)成熟肽编码区基因。方法 :设计引物 ,以小鼠牙胚cDNA文库为模板 ,利用PCR方法 ,扩增出小鼠釉丛蛋白成熟区的基因片段 (约 12 0 0bp) ,将所得基因片段插入pBS质粒载体 ,转化到大肠杆菌XL - 1-Blue后挑选阳性克隆 ,提取重组质粒DNA ,通过限制性酶切和部分核苷酸序列分析鉴定阳性克隆。结果 :重组质粒pBS -tuftelin的酶切图谱和序列分析结果与国外文献报道一致。结论 :克隆到小鼠釉丛蛋白成熟肽编码区基因。(本文来源于《牙体牙髓牙周病学杂志》期刊2000年02期）
釉丛蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的 :以大肠杆菌为工程菌制备釉丛蛋白 ,纯化并免疫制备抗血清。方法 :用酶切、连接的方法将已克隆至 pBluescriptKS +载体中的TuftelincDNA片段 (编码 36 5个氨基酸 )用T4DNA连接酶连入载体pPRoEXTMHTc中 ,转化大肠杆菌 ,IPTG诱导。收集菌体 ,裂解后SDS -PAGE电泳 ,表达出分子量Mr 4 2×10 3 的融合蛋白。割胶后免疫新西兰大白兔 ,制备抗体。结果 :表达出分子量Mr 4 2× 10 3 的融合蛋白与预期一致。 8周以后 ,Western检测抗原抗体特异性及抗体效价达 1:10 0 0 0 0。结论 :认为成功的表达出釉丛蛋白并制备出了高效价多克隆抗体。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
釉丛蛋白论文参考文献
[1].顾淑萍,刘晗,史俊南,张莹,汪平.小鼠釉丛蛋白基因不同mRNA剪接体的克隆[J].牙体牙髓牙周病学杂志.2004
[2].朱庆林,吴补领,顾淑萍,张莹,相顺利.小鼠釉丛蛋白在大肠杆菌中的表达,纯化及抗血清的制备[J].牙体牙髓牙周病学杂志.2002
[3].朱庆林.小鼠釉丛蛋白的基因克隆、表达及在不同组织分布的研究[D].第四军医大学.2002
[4].顾淑萍.釉质基质特异蛋白——釉丛蛋白[J].牙体牙髓牙周病学杂志.2002
[5].顾淑萍,郝建军,史俊南,费俭,王丽珍.小鼠釉丛蛋白成熟肽编码区cDNA克隆[J].牙体牙髓牙周病学杂志.2000
论文知识图
