论文摘要
来源于Pyrococcus furiosus COM1菌的Pfu DNA聚合酶具有保真性高、延伸速度快、热稳定性强等特点,能够提高PCR反应过程中的扩增效率,减少错误碱基掺入率.以大肠杆菌Rosetta(DE3)为重组细胞,利用一种快速表达纯化方法,让Pfu DNA聚合酶的表达纯化过程变得更加简便,并维持其高活性.结果表明,Pfu DNA聚合酶在大肠杆菌Rosetta(DE3)中能够进行大量表达,同时60℃高温水浴能有效去除杂蛋白,简化纯化步骤及提高Pfu DNA聚合酶纯度.经过一系列纯化步骤处理后,Pfu DNA聚合酶仍然能够保持较好的酶活,且在100μL PCR反应体系中,加入4μL的1 mg/mL Pfu DNA聚合酶液效果最佳.
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 何华华,胡晓韵,王婷,喻婵
关键词: 聚合酶,亲和层析,检测
来源: 湖北大学学报(自然科学版) 2019年03期
年度: 2019
分类: 基础科学
专业: 生物学
单位: 湖北大学生命科学学院生物资源绿色转化协同创新中心
基金: 油料脂质化学与营养湖北省重点实验室开放基金资助
分类号: Q55
页码: 223-227
总页数: 5
文件大小: 419K
下载量: 218
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