不同培养基中MDCK细胞生长及代谢动力学研究

不同培养基中MDCK细胞生长及代谢动力学研究

论文摘要

[目的]为筛选适应于MDCK细胞大规模培养的最佳培养基并揭示其代谢动力学规律。[方法]选取商业化的培养基DMEM(试验组A)、EMEM(试验组B)、MEM(试验组C)、M199(试验组D)、DMEM/F12(试验组E)及DMEM:EMEM复合培养基(试验组F)用于MDCK细胞传代培养,研究不同培养基对MDCK细胞生长特性的影响,分析MDCK细胞生长过程中葡萄糖(Gluc)、乳酸(Lac)、谷氨酰胺(Gln)和氨(NH4+)的代谢情况,并进一步进行细胞工厂的培养验证。[结果]结果表明MDCK细胞均能在试验组A、B、E、F四种培养基中生长,其最大增殖浓度E> A> F> B,差异显著(P <0. 05);倍增时间B> F> A> E,差异显著(P <0. 05);细胞比生长速率E> A> F> B,差异不显著(P> 0. 05)。不同培养基培养MDCK细胞对数生长期平均葡萄糖比消耗速率、谷氨酰胺比消耗速率及氨比生成速率差异均不显著(P> 0. 05),乳酸比生成速率差异显著(P <0. 05)。在试验组A和E培养基中细胞能实现高密度增殖,再将其进行细胞工厂扩大培养验证,发现两种培养基在培养48 h时均能达到单层致密,且细胞密度均达到8. 0×108/cells以上,差异不显著(P> 0. 05)。[结论]综合研究结果及规模化生产成本因素,采用DMEM培养基(试验组A)培养MDCK细胞,其最大增殖浓度达到6. 4×105/m L,倍增时间为22. 835 h,比生长速率为0. 558,可进行大规模培养,为工业化生产提供依据。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 细胞
  •     1.1.2 培养基
  •     1.1.3 血清
  •     1.1.4 试剂及仪器
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 不同培养基中MDCK细胞传代稳定性观察
  •     1.2.2 不同培养基中MDCK细胞生长动力学分析
  •     1.2.3 代谢动力学分析
  •     1.2.4 细胞工厂扩大培养验证
  •     1.2.5 统计学分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 不同培养基中MDCK细胞传代稳定性观察
  •   2.2 生长曲线及生长动力学分析
  •   2.3 代谢动力学分析
  •   2.4 细胞工厂扩大培养验证
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 赵彩红,王家敏,李自良,王美皓,臧荣鑫,马忠仁,乔自林

    关键词: 细胞,培养基,细胞工厂,生长特性,代谢动力学

    来源: 生物技术 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 基础科学

    专业: 生物学

    单位: 西北民族大学生物医学研究中心甘肃省动物细胞技术创新中心,西北民族大学生命科学与工程学院

    基金: 国家科技重大专项重大新药创制项目(2015ZX09102016),西北民族大学动物细胞培养与代谢工程创新团队(31920190004),西北民族大学中央高校基本科研业务费专项资金资助研究生项目(Yxm2018143),甘肃省重点研发计划项目(18YF1FA121)

    分类号: Q813.11

    DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2019.05.0080

    页码: 485-491

    总页数: 7

    文件大小: 788K

    下载量: 158

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