一、特异性CTL在乙型肝炎病毒感染中作用的研究（论文文献综述）
徐瑛[1]（2021）在《趋化因子CXCL10基因多态性与慢性乙型肝炎病毒感染的关联研究》文中提出背景:乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus,HBV）引起的慢性化感染,是一种由病毒、环境和宿主因素之间相互作用导致的一种高流行率传染病。据统计,全球目前约有2.5亿HBV慢性感染者。HBV感染导致患者的肝脏疾病结局各不相同,有无任何临床症状的HBV携带者或者隐匿型肝炎患者,也有急性肝炎、慢性肝炎,反复纤维化进展成肝硬化甚至是肝癌等不同表型的患者。多项研究表明,宿主遗传因素在慢性感染过程中起着重要的决定作用。因此,寻找并验证疾病相关易感基因的突变位点可能是治疗慢性化感染的潜在靶点。趋化因子配体10（CXCL10）,近年来被证实是参与肝脏炎性疾病的候选基因,可以通过招募效应Th1淋巴细胞介导HBV病毒清除和炎症反应,参与机体的免疫反应过程,因此其单核苷酸多态性可能通过调控CXCL10表达参与慢性乙型肝炎的发病机制及药物治疗应答过程数据。然而,该基因的遗传变异与中国汉族人群,特别是与儿童样本人群中HBV易感性之间的关联尚不清楚,遗传变异参与的疾病发病机制和药物治疗应答的研究甚少。第一部分乙肝易感性基因CXCL10基因启动子区遗传变异与乙型肝炎的关联研究目的:研究趋化因子CXCL10基因启动子区域的遗传变异与成人和儿童慢性HBV易感性的相关性。方法:对CXCL10基因序列变异进行基因分型,并在中国汉族人群中进行包括成人和独立儿童在内的两阶段病例对照研究,评估变异与疾病易感性的关联。结果:1.样本基本特征分析结果显示:第一阶段共纳入1048例成人病例对照样本,其中,病例组518例,对照组530例。样本病例对照组年龄性别相匹配（P>0.05）;第二阶段儿童组样本病例对照组年龄、性别差异具有统计学意义（P<0.001,P=0.004）,并且病例对照组在母亲乙型肝炎表面抗原水平、儿童疫苗接种情况方面差异均具有统计学意义（P<0.05）。SNPs与乙肝发病风险的关联分析结果显示:第一阶段SNP位点与成人持续HBV感染相关联。校正性别年龄后,采用Logistic回归分析结果表明:CXCL10基因遗传变异位点rs4256246 AA基因型的成人较GG基因型HBV感染的风险增加1.58倍（OR=1.58,95%CI:1.04-2.42,P=0.033）。CXCL10基因遗传变异位点rs4508917（A>G）相对风险分析结果发现携带rs4508917 AA基因型的成人较GG基因型HBV感染的风险增加1.51倍（OR=1.51,95%CI:1.03-2.22,P=0.036）。按照年龄和性别分层后,进一步比较了rs4508917和rs4256246两个SNP的基因型频率分布。分层结果表明,与rs4508917 GG基因型相比,AG基因型和AA基因型在较高年龄组（>40岁）HBV感染风险较高（P=0.037,P=0.041）。SNP rs4256246分层分析结果证明,rs4256246AA基因型比GG基因型能显着增加较高年龄组（>40岁）HBV感染风险（OR=1.73,95%CI:1.08-2.78,P=0.024）。遗传变异与HBV病毒载量的相关性分析结果表明,较高年龄组（>40岁）的HBV患者中,rs4508917的AG基因型与HBV病毒载量（病毒复制程度）显着相关（P=0.004）。此外,rs4508917 AA基因型与HBV病毒载量异常的风险增加相关。3.第二阶段共计纳入627例儿童病例对照样本,其中,病例组274例,对照组353例。采用单因素Logistic回归分析SNP位点与儿童HBV感染相关性:CXCL10基因遗传变异位点rs4508917（A>G）相对风险分析结果表明携带rs4508917 AA基因型的儿童较GG基因型能增加HBV感染风险1.81倍（OR=1.81,95%CI:1.13-2.92,P=0.014）。此外,HBV高危儿童携带rs4508917 AA基因型能增加免疫接种后病毒突破感染的风险（0R=4.95,95%CI-1.45-16.90,P=0.011）。考虑混杂因素的影响,采用logistic回归模型调整性别和年龄后,未见显着性差异（P>0.05）。结论:CXCL10基因多态性位点rs4508917可能与成人和儿童持续HBV感染相关,AA基因型是导致HBV感染增加的易感基因型。第二部分乙肝易感性基因CXCL10基因启动子区遗传变异的功能验证目的:针对第一部分关联分析中阳性遗传变异位点初步探索其参与HBV感染发病的分子机制。方法:采用ELISA法检测CXCL10在成人病例对照组血清中的表达水平,并使用双荧光素酶报告基因实验验证阳性遗传变异对CXCL10基因转录活性的影响。结果:1.ELISA分析结果显示慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）成人患者血清CXCL10表达水平高于对照组（P=0.014）,且随着A等位基因剂量的增加,CXCL10血清表达水平呈递增趋势,且差异具有统计学意义（P=0.013）.2.双荧光素酶报告基因实验结果表明,rs4508917 A等位基因可能直接影响CXCL10的启动子活性。结论:本研究中,荧光素酶报告基因rs4508917位点的转录活性表明该位点可能调控CXCL10基因的表达。此外,我们还发现CHB患者血清中CXCL10蛋白水平升高,而rs4508917 AA基因型与CXCL10转录水平较高相关,从而提供了该风险变异的体内功能证据。第三部分乙肝易感性基因CXCL10基因单核苷酸多态性rs4508917与核苷类似物治疗应答的关联目的:探讨乙肝易感性基因CXCL10单核苷酸多态性是否影响机体对核苷类似物（Nucleotide analogs,NAs）的应答反应。方法:本研究对62例CHB成人患者在抗病毒治疗的第3、6和9周进行了HBV病毒载量的动态变化分析。结果:携带rs4508917 AA或AG基因型患者与rs4508917 GG基因型患者相比,对NAs治疗的反应中HBV病毒载量的清除速率有一定程度的抑制作用。rs4256246 AA或GA基因型对NAs处理的反应也有类似的趋势。结论:CXCL10基因多态性位点rs4508917能影响成人乙肝患者对NAs恩替卡韦药物治疗的应答效果。
张莉[2]（2020）在《不同PD-1及CXCR5表达的T淋巴细胞在乙型肝炎病毒感染中的功能研究》文中进行了进一步梳理背景:乙型肝炎病毒（HBV）感染后病毒清除需要一个复杂的免疫网络的参与,免疫应答介导的宿主与病毒之间的相互作用影响着HBV感染后肝脏疾病的复杂性及转归。体液免疫应答在抑制和清除HBV中起着至关重要的作用。B细胞活化状态对控制HBV的复制具有重要的作用,自发或经治疗获得乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）/乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）血清学转换后,可以持久控制病毒复制或者彻底清除病毒,阻止或延缓肝硬化和肝细胞肝癌的发生,有效控制疾病的进展。然而慢性乙型病毒性肝炎（CHB）患者外周B细胞数量及分泌特异性抗体IgG的能力均有一定程度的下降,经自发或治疗获得的HBeAg/HBsAg血清转换率仍较低。因此,探索CHB患者HBeAg/HBsAg清除的体液免疫机制非常重要。滤泡辅助性T细胞（Tfh细胞）作为CD4+辅助性T淋巴细胞的一个亚群,在辅助体液免疫应答中起重要作用。已有研究证实循环中的PD-1hiCXCR5+CD4+Tfh细胞可介导慢性血吸虫病和自身免疫性甲状腺疾病患者的体液免疫反应,但PD-1hiCXCR5+CD4+Tfh细胞在慢性HBV感染患者中的作用仍然未知。有趣的是,近期有研究发现一种新的CD4+T细胞亚群,这群细胞缺乏CXCR5的表达但高表达PD-1,被称为外周辅助性T细胞（Tph细胞）。有研究证实PD-1hiCXCR5-CD4+Tph细胞显示出类似Tfh细胞的辅助体液免疫应答的功能。然而,目前同样缺乏PD-1hiCXCR5-CD4+Tph细胞在CHB患者中的研究。因此,PD-1hiCXCR5+CD4+Tfh细胞和PD-1hiCXCR5-CD4+Tph细胞是否可以通过调节体液免疫反应来降低CHB患者的HBsAg水平或清除HBV DNA?细胞毒性T淋巴细胞（CTL）介导的免疫反应在乙型肝炎免疫应答中同样占有举足轻重的地位。循环中HBV特异性CD8+T淋巴细胞能够直接识别病毒抗原并杀灭被HBV感染的肝细胞。同时,HBV特异性CD8+T细胞还能够分泌干扰素-γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,以非细胞溶解机制抑制其他肝细胞内HBV基因表达和复制。然而,在CHB患者中,HBV并不能被完全有效的清除,导致HBV病毒持续感染的主要原因是HBV特异性CD8+T细胞数量及功能的缺陷。耗竭的HBV特异性CD8+T细胞高表达负性抑制分子,使CD8+T细胞呈现较低的效应功能并丧失记忆能力。近期有研究发现,在慢性病毒感染和炎症性疾病中存在一群独特的表达CXCR5的CD8+T细胞,即滤泡细胞毒性T细胞（Tfc细胞）,其功能耗竭的程度明显低于CXCR5-的CD8+T细胞,呈现出较高的病毒抑制功能,同时这群细胞与Tfh细胞的部分特征相同并能够促进B细胞分泌IgG抗体。目前尚缺乏HBV特异性CXCR5+CD8+Tfc细胞在HBV感染方面的研究报道,HBV感染时,CXCR5+CD8+Tfc细胞是否也能发挥抑制病毒复制并促进体液免疫应答的作用?第一部分PD-1hiCXCR5+CD4+Tfh细胞和PD-1hiCXCR5-CD4+Tph细胞对经PEG-IFN-α治疗的CHB患者HBsAg下降和HBV DNA清除的影响目的:通过检测经聚乙二醇干扰素-α（PEG-IFN-α）治疗的CHB患者外周血中的PD-1hiCXCR5+CD4+Tfh细胞和PD-1hiCXCR5-CD4+Tph细胞的频数和绝对数及其变化,探讨这两种细胞对HBsAg下降和HBV DNA清除的影响。方法:用流式细胞术检测20例健康对照者（HCs）及18例接受了48周PEG-IFN-α治疗的CHB患者治疗前和治疗48周结束时的外周血中PD-1hiCXCR5+CD4+Tfh细胞和PD-1hiCXCR5-CD4+Tph细胞的频数。并结合血图分析结果计算CHB患者接受PEG-IFN-α治疗前后外周血中两种细胞的绝对数。用重复测量方差分析方法分析经PEG-IFN-α治疗48周后外周血中PD-1hiCXCR5+CD4+Tfh细胞和PD-1hiCXCR5-CD4+Tph细胞的频数和绝对数的变化对HBsAg下降及HBV DNA清除的影响。结果:1)与HCs相比,CHB患者循环中PD-1hiCXCR5+CD4+Tfh细胞和PD-1hiCXCR5-CD4+Tph细胞的频数均显着增高。2)经PEG-IFN-α治疗48周后,CHB患者循环中两种细胞的频数和绝对数整体上较治疗前没有明显变化。3)治疗后循环中PD-1hiCXCR5+CD4+Tfh细胞频数升高的CHB患者较下降者在治疗过程中的HBsAg水平随着时间变化下降更显着,而HBV DNA水平未发现明显差异。4)治疗后PD-1hiCXCR5+CD4+Tfh细胞频数的升高对CHB患者的HBsAg水平下降到≤2 Log10 IU/mL和≤3 Log10 IU/mL两个层次具有明显的促进作用。5)无论治疗后CHB患者循环中PD-1hiCXCR5-CD4+Tph细胞的频数和两种细胞的绝对数升高与否,其HBsAg和HBV DNA水平在治疗过程中随时间变化没有显着差异。结论:循环中的PD-1hiCXCR5+CD4+Tfh细胞和PD-1hiCXCR5-CD4+Tph细胞可能参与了慢性HBV感染患者的免疫应答,且接受PEG-IFN-α治疗的CHB患者循环中PD-1hiCXCR5+CD4+Tfh细胞的频数增加与HBsAg水平降低有关。第二部分HBV特异性CXCR5+CD8+Tfc细胞在HBV感染中的作用研究目的:通过检测急、慢性HBV转染小鼠脾脏及CHB患者外周血中HBV特异性CXCR5+CD8+Tfc细胞的频数和表型及经HBV相关抗原肽段刺激后细胞因子的分泌,探讨HBV特异性CXCR5+CD8+Tfc细胞在HBV感染中的免疫功能。方法:运用高压水动力法分别将pCDNA3.1-HBV1.3质粒和pAAV-HBV1.2质粒通过尾静脉注射到C57BL/6J（B6）小鼠中以建立急、慢性HBV转染小鼠模型,并纳入38例不同HBeAg状态、不同丙氨酸转氨酶（ALT）水平的CHB患者,用流式细胞术检测急、慢性HBV转染小鼠脾脏及CHB患者外周血中HBV特异性CXCR5+CD8+Tfc细胞的频数及表面分子（PD-1、Tim-3、ICOS和CD40L）的表达,同时用流式细胞术检测急、慢性HBV转染小鼠脾脏CXCR5+CD8+Tfc细胞经HBc 93-100抗原肽刺激后IFN-γ、TNF-α和白介素-21（IL-21）的分泌水平。结果:1)急、慢性HBV转染小鼠脾脏及CHB患者外周血中均检测到HBV特异性CXCR5+CD8+Tfc细胞表达。2)与HBV特异性CXCR5-CD8+T细胞相比,急、慢性HBV转染小鼠脾脏中HBV特异性CXCR5+CD8+Tfc细胞表达的PD-1和Tim-3更高,但经HBc 93-100抗原肽刺激后分泌IFN-γ和TNF-α的能力更强。3)急、慢性HBV转染小鼠脾脏中HBV特异性CXCR5+CD8+Tfc细胞表面表达ICOS和CD40L,且经HBc 93-100抗原肽刺激后分泌IL-21。4)与CXCR5-CD8+T细胞相比,CHB患者外周血中CXCR5+CD8+Tfc细胞表达PD-1和Tim-3更高,同时,CHB患者外周血中CXCR5+CD8+Tfc细胞表面表达ICOS和CD40L,这一特征在HBeAg阳性、ALT水平较高的CHB患者中表现更为明显。结论:HBV特异性CXCR5+CD8+Tfc细胞虽然呈部分耗竭状态,但其具有更强的细胞毒性作用,且HBV特异性CXCR5+CD8+Tfc细胞可能参与了抗HBV的体液免疫应答。
江诗怡[3]（2020）在《温阳法对HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者细胞免疫功能的影响》文中进行了进一步梳理目的观察温阳法治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者,对患者外周血中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞和Treg细胞、Th17细胞水平以及e抗原血清转换情况的影响。并与单用核苷（酸）类似物抗病毒药比较,探讨温阳法对治疗慢性乙型肝炎患者细胞免疫的功能影响及作用机制,为中药抗乙肝病毒治疗的有效性提供循证医学依据。方法将符合入选标准的70例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者随机分为温阳组与对照组,对照组使用恩替卡韦0.5mg/次,1次/天,温阳组在对照组治疗基础上加用温阳方,两组疗程均为24周。两组患者分别在治疗前后检测肝功能（ALT、AST、TBIL、ALB）、乙肝两对半、HBV DNA、T淋巴细胞亚群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）、肝脏硬度（LSM）,以及使用流式细胞仪检测Treg细胞及Th17细胞,并在治疗第12周时加查一次乙肝两对半。同时分别在治疗前后对两组患者进行生命体征、血常规、尿常规、肾功能及心电图检测,评估安全性。使用SPSS 26.0软件对实验数据进行统计分析。结果1.肝功能:治疗后温阳组与对照组组内比较,除TBIL外,指标均明显改善（P<0.05）;两组间对比,温阳组ALB升高更明显（P<0.05）,而ALT、AST、TBIL指标差距均无统计学意义（P>0.05）。肝硬度值:治疗后温阳组与对照组组内比较,肝硬度值下降,前后差距有统计学意义（P<0.05）;两组间肝硬度值对比,差距无统计学意义（P>0.05）。e抗原水平:治疗第12周温阳组与对照组组内对比,HBeAg水平下降明显（P<0.05）,但两组间对比差距无统计学意义（P>0.05）;治疗24周后与治疗第12周后两组内比较,HBeAg水平下降显着（P<0.05）,且两组间对比差距有统计学意义（P<0.05）。治疗结束后两组间HBeAg阴转率对比,温阳组（14.29%）与对照组（8.6%）相比差异不明显（P>0.05）,但温阳组上升趋势更明显。病毒学:治疗后温阳组与对照组组内比较,HBV DNA水平均明显下降（P<0.05）,但两组间差距无统计学意义（P>0.05）。两组间HBV DNA阴转率对比,温阳组（69.23%）与对照组（58.33%）相比也无明显统计学意义（P>0.05）,但温阳组有更明显的上升趋势。T淋巴细胞亚群:治疗后温阳组与对照组组内比较,温阳组CD3+T细胞、CD4+T细胞水平上升明显（P<0.05）,对照组上升不明显（P>0.05）;两组CD8+T细胞水平均较治疗前下降明显（P<0.05）,但两组间对比差距无统计学意义（P>0.05）;两组CD4+/CD8+比值均较治疗前明显上升（P<0.05）,且温阳组上升更明显（P<0.05）。Treg/Th17细胞:治疗后温阳组与对照组组内比较,Treg细胞数量明显下降（P<0.05）,但两组间差距不明显（P>0.05）。治疗后两组Th17细胞与治疗前相比,对照组Th17细胞下降不明显（P>0.05）,温阳组Th17细胞下降明显（P<0.05）。两组Treg/Th17比值组内比较,温阳组Treg/Th17比值上升,对照组比值下降,但两组前后对比变化不明显（P>0.05）,且两组间差距无统计学意义（P>0.05）。结论1.温阳法联合核苷（酸）类药物治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者,与单独使用核苷（酸）类药物相比,可以更好的减轻肝细胞炎症,改善肝细胞功能,减少病毒复制,促进e抗原阴转。2.温阳法可能是通过调节机体外周血内CD4+/CD8+平衡与Treg/Th17平衡,调节细胞免疫状态,影响HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者细胞免疫功能,改善机体免疫抑制情况,从而增强机体对HBV病毒的清除能力。
魏艳艳[4]（2019）在《TIGIT在慢性HBV感染者T细胞中的表达和功能研究》文中进行了进一步梳理乙型肝炎是由乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus,HBV）引起,危及全球人类健康的传染病。在HBV感染过程中,适应性免疫应答在肝脏损害及病毒清除中发挥重要作用。研究表明,急性HBV感染时,激活外周血CD4+辅助性T细胞及CD8+细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic T-lymphocyte response,CTL）反应能够有效清除病毒。慢性HBV感染时,抑制性受体在病毒特异性CD8+T细胞表达逐渐增多,参与了CD8+T细胞耗竭,使其无法发挥有效清除病毒作用,导致病毒持续存在和肝损伤。阻断抑制性受体通路可逆转T细胞耗竭,增强T细胞免疫,从而增强病毒清除能力。T细胞免疫球蛋白域和免疫受体酪氨酸抑制基序（T cell immunoglobulin and immune receptor tyrosine-based inhibitory motif domain,TIGIT）是在基因组研究中发现的共抑制受体,主要表达于T细胞、自然杀伤性细胞（Natural killer,NK）和调节性T细胞（Regulated T cell,Treg）等细胞表面。在病毒感染免疫方面,TIGIT在淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（Lymphocytic choriomeningitis virus,LCMV）、丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）和人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV）等感染的T细胞免疫中作为共抑制受体起关键作用。TIGIT作为抑制性受体在乙肝病毒感染中作用的相关研究少。近期有研究报道,在HBs Ag阳性小鼠中,TIGIT作用于肝脏HBV特异性CTL导致细胞免疫耐受,HBV难以清除,阻断TIGIT通路或抑制TIGIT表达可使HBV特异性CTL功能恢复,导致肝脏炎症激活和乙肝病毒清除。程序性死亡受体-1（programmed cell death protein 1,PD-1）也是参与T细胞耗竭的一个关键负调控分子。TIGIT作为抑制性受体在慢性HBV感染者T细胞中的表达和功能及其与PD-1是否有协同作用尚无相关报道。本研究主要探讨TIGIT在慢性HBV感染者T细胞中的表达和功能,并揭示TIGIT与PD-1在慢性HBV感染者T细胞功能耗竭中的协同作用。本研究分为以下三个部分:第一部分TIGIT在慢性HBV感染者外周血T细胞表达的研究目的:研究TIGIT在慢性HBV感染者外周血T细胞、T细胞分化亚群和HBV特异性CTL上的表达及其与PD-1表达的关系。方法:收集和分离73例慢性HBV感染者和28例健康志愿者（healthy donors,HD）血浆和外周血单个核细胞（PBMC）并冻存。采用流式细胞术检测:（1）TIGIT和PD-1在慢性HBV感染者组和HD组CD4+和CD8+T细胞表达;（2）TIGIT和PD-1在慢性HBV感染者组和HD组CD4+和CD8+T细胞不同分化阶段的表达;（3）采用人白细胞抗原（human leukocyte antigen,HLA）-A*0201/FLPSDFFPSV（HBVcore18-27）和HLA-A*0201/NLVPMVATV（cytomegalovirus 65 k Da Phosphoprotein,CMVpp65）五聚体（pentamer,PENTA）检测HBV和CMV特异性CTL,随后检测TIGIT和PD-1在HBV及对照CMVpp65特异性CTL表达。结果:（1）与HD组相比,TIGIT在慢性HBV感染者PBMC中的CD4+和CD8+T细胞表达明显升高（12.28±0.93%vs.7.98±0.86%,P=0.0083;30.77±2.00%vs.16.61±2.17%,P=0.0001）;（2）与乙肝病毒e抗原（Hepatitis B e Antigen,HBe Ag）阴性组相比,TIGIT在HBe Ag阳性慢性HBV感染者组CD4+和CD8+T细胞表达明显升高（13.79±1.31%vs.10.19±1.17%,P=0.0130;32.94±2.84%vs.27.75±2.64%,P=0.0043）;（3）与HD组相比,TIGIT在慢性HBV感染者各T细胞分化亚群表达均上调（P值均<0.05）;且TIGIT在慢性HBV感染者CD28-CD45RA+CD4+和CD28-CD45RA+CD8+T细胞表达最高（P<0.01,P<0.001）;（4）TIGIT在慢性HBV感染者CD4+和CD8+T细胞上的表达和PD-1的表达呈正相关。TIGIT和PD-1在CD4+T细胞及CD8+T细胞表面均存在双阳性表达;（5）与CMVpp65特异性CTL相比,TIGIT和PD-1在慢性HBV感染者HBVcore18-27特异性CTL表达明显升高（P<0.0001,P=0.0003）;（6）与PENTA-CD8+T细胞相比,TIGIT和PD-1在慢性HBV感染者HBVcore18-27特异性CTL表达明显升高（P<0.0001,P<0.0001）;（7）TIGIT和PD-1在HBVcore18-27特异性CTL上双阳性表达所占百分比与TIGIT单阳性及PD-1单阳性表达所占百分比相比有差异（P<0.001）,以双阳性表达所占百分比最高。结论:（1）TIGIT在慢性HBV感染者PBMC中的CD4+和CD8+T细胞表达均上调,在效应性T细胞亚群的表达最高;TIGIT在HBe Ag阳性慢性HBV感染者PBMC中的T细胞表达高于HBe Ag阴性者;（2）TIGIT和PD-1在慢性HBV感染者CD4+和CD8+T细胞上存在共表达状态;（3）TIGIT和PD-1在慢性HBV感染者HBV特异性CTL高表达,且以TIGIT和PD-1共表达状态为主。第二部分TIGIT在慢性HBV感染者外周血T细胞中的功能研究目的:研究TIGIT对慢性HBV感染者CD8+T细胞细胞因子分泌、细胞增殖及凋亡敏感性的影响及TIGIT和PD-1的协同作用。方法:收集和分离85例慢性HBV感染者血浆和PBMC并冻存。采用流式细胞仪检测:（1）用佛波酯/离子霉素（phorbol 12-myristate-13-acetate/ionomycin,PMA/ionomycin）刺激,表面染色法检测TIGIT+和TIGIT-CD8+T细胞群表达CD69;采用胞内染色法检测TIGIT+和TIGIT-CD8+T细胞群分泌颗粒酶B（Granzyme B,Gr B）和穿孔素（Perforin）;（2）用HBVcore18-27肽段刺激,检测:（1）TIGIT阳性和TIGIT阴性HBV特异性CTL群表达CD69,TIGIT阳性和TIGIT阴性HBV特异性CTL群分泌Gr B、Perforin、干扰素-γ（interferon-gamma,IFN-γ）、白介素-2（Interleukin-2,IL-2）和肿瘤坏死因子-α（Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α）;（2）采用羟基荧光素二酯酸盐琥珀酰亚胺脂（carboxy-fluorescein diacetate succinimidyl ester,CFSE）实验检测细胞增殖;（3）TIGIT+和TIGIT-CD8+T细胞在未处理组、活化诱导凋亡（activation induced cell death,AICD）组和阻断TIGIT通路组凋亡比例;（4）用PMA/Ionomycin刺激,检测TIGIT+PD-1+和TIGIT-PD-1-CD8+T细胞分泌IFN-γ、IL-2和TNF-α;（5）阻断TIGIT和/或PD-1通路,用HBVcore18-27肽段刺激,检测HBV特异性CTL分泌IFN-γ和IL-2。结果:（1）与TIGIT-CD8+T细胞群相比,TIGIT+CD8+T细胞群表面活化标记CD69表达明显升高（P=0.0095）,TIGIT+CD8+T细胞群中分泌Gr B和Perforin的细胞所占百分比明显下降（P=0.0205,P=0.0377）;（2）与TIGIT阴性HBV特异性CTL群相比,慢性HBV感染者TIGIT阳性HBV特异性CTL群表达CD69明显升高（P=0.0014）,TIGIT阳性HBV特异性CTL群中能够分泌Perforin和Gr B的细胞所占百分比明显下降（P=0.0360,P=0.0205）;（3）与TIGIT阴性CTL群相比,慢性HBV感染者TIGIT阳性HBV特异性CTL群中能够分泌IFN-γ、IL-2和TNF-α的细胞所占百分比均下调（P=0.0407,P=0.0446,P=0.0087）,细胞增殖降低（P=0.0029）;阻断TIGIT通路并用HBVcore18-27肽段刺激,HBV特异性CTL增殖增加（P=0.0023）;（4）与未活化诱导组相比,活化诱导后CD8+T细胞群凋亡敏感性增强（P=0.0004）;与活化诱导后TIGIT-CD8+T细胞组相比,活化诱导后TIGIT+CD8+T细胞群凋亡敏感性增强（P=0.0070）;阻断TIGIT通路,CD8+T细胞凋亡敏感性下降（P=0.0003）;（5）与TIGIT-PD-1-CD8+T细胞相比,慢性HBV感染者TIGIT+PD-1+CD8+T细胞分泌IFN-γ（P<0.001）、IL-2（P<0.001）、TNF-α（P<0.001）所占百分比明显下调;与对照组相比,阻断TIGIT和/或PD-1通路慢性HBV感染者HBV特异性CTL中分泌IFN-γ和IL-2的细胞所占百分比明显增多（P<0.001,P<0.001）;与单独阻断TIGIT通路相比,联合阻断TIGIT和PD-1通路组慢性HBV感染者HBV特异性CTL中分泌IFN-γ和IL-2的细胞所占百分比明显增多（P<0.001,P<0.001）。结论:（1）表达TIGIT的慢性HBV感染者PBMC中CD8+T细胞和HBV特异性CTL活性增加,其释放效应分子功能受到抑制;（2）TIGIT参与抑制慢性HBV感染者CD8+T细胞细胞因子分泌和细胞增殖,使其细胞凋亡敏感性增加;（3）阻断TIGIT通路,慢性HBV感染者HBV特异性CTL分泌细胞因子上调,细胞增殖功能增强,CD8+T细胞凋亡敏感性降低;（4）阻断TIGIT和PD-1通路可逆转耗竭的HBV特异性CTL细胞因子分泌功能。第三部分TIGIT在慢性HBV感染者外周血T细胞表达与临床指标相关性研究目的:研究TIGIT在慢性HBV感染者外周血T细胞和HBVcore18-27特异性CTL表达与临床指标的相关性。方法:收集和分离141例慢性HBV感染者和20例HD外周血血浆和PBMC并冻存。用如下方法检测:（1）全自动生化仪检测谷丙转氨酶（Alanine aminotransferase,ALT）和转肽酶（gamma-glutamyl transpeptidase,GGT）等指标;（2）化学发光法检测乙肝病毒表面抗原（hepatitis B surface antigen,HBs Ag）、HBe Ag滴度等;（3）实时荧光定量聚合酶链反应（Polymerase chain reaction,PCR）检测HBVDNA载量;（4）采用流式细胞术检测:（1）TIGIT和PD-1在慢性HBV感染者CD4+和CD8+T细胞表达;（2）TIGIT和PD-1在慢性HBV感染者HBVcore18-27特异性CTL表达;（3）TIGIT在慢性乙型肝炎组、乙肝相关肝硬化组和乙肝肝硬化合并原发性肝癌组和健康者组外周血CD4+和CD8+T细胞表达;（4）TIGIT在接受拉米夫定（lamivudine,LAM）、阿德福韦酯（adefovir dipivoxil,ADV）、替比夫定（Telbivudine,LDT）和恩替卡韦（entecavir,ETV）抗病毒治疗和未接受抗病毒治疗慢性HBV感染者外周血CD4+和CD8+T细胞表达。结果:（1）TIGIT在CD4+和CD8+T细胞表达分别与ALT水平和HBVDNA载量对数值呈正相关;（2）TIGIT在HBVcore18-27特异性CTL表达分别与ALT水平和HBVDNA载量对数值呈正相关;PD-1在HBVcore18-27特异性CTL表达分别与ALT水平和HBVDNA载量对数值呈正相关;（3）TIGIT和PD-1在CD4+和CD8+T细胞共表达分别与ALT水平和HBVDNA载量对数值呈正相关;（4）与未接受抗病毒治疗组相比,TIGIT在接受四种核苷（酸）类似物治疗的慢性HBV感染者CD4+和CD8+T细胞表达均下调,有明显统计学差异（P<0.001,P<0.001）,且在ETV组表达最低;（5）随着慢性HBV感染病程进展,TIGIT在慢性HBV感染者CD4+和CD8+T细胞表达呈上升趋势（P<0.001,P<0.001）,且TIGIT和PD-1在慢性HBV感染者CD4+和CD8+T细胞共表达亦呈上升趋势（P<0.001,P<0.001）。结论:（1）在慢性HBV感染者中,乙肝病毒复制和肝脏炎症环境可能诱导TIGIT和PD-1在T细胞和HBVcore18-27特异性CTL表达上调,并随着病情进展TIGIT和PD-1在T细胞的共表达呈上升趋势;（2）四种核苷（酸）类似物抗病毒药物均可抑制TIGIT在慢性HBV感染者CD4+和CD8+T细胞表达。
杨晓萌[5]（2019）在《慢性乙肝感染者表面抗原滴度、Treg细胞与疾病活动的相关性研究》文中研究表明目的:研究不同类型慢性乙肝感染者HBsAg滴度、Treg细胞频数的差异,分析HBsAg滴度、Treg细胞与疾病活动的相关性。方法:选取2017年12月至2018年12月在怀化市第一人民医院就诊的符合本研究纳入标准的慢性乙肝感染者128例,将其分为携带者组和活动者组,分析两组在HBsAg滴度、CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞频数上的差异,并进行亚组分析,运用二元Logistic回归分析寻找影响疾病活动的因素,并做ROC曲线评估其预测疾病活动的准确性。同时将肝炎活动者按肝功能损害程度分为轻度肝炎组、中度肝炎组、重度肝炎组、肝衰竭组,比较上述指标的差异,分析其与疾病活动的相关性。结果:1.慢性HBV感染者疾病活动患者的HBsAg滴度与携带者相比显着升高（P<0.05）,进行亚组分析显示,HBeAg阳性CHB患者HBsAg滴度最高,与携带者和乙肝肝硬化患者相比差异有统计学意义（P<0.05）,根据肝功能损害严重程度分组,中度肝炎患者HBsAg滴度最高,与携带者相比差异有统计学意义（P<0.05）。2.慢性HBV感染者疾病活动患者的CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞频数与携带者相比显着增高（P<0.05）,进行亚组分析显示,HBeAg阳性CHB患者和乙肝肝硬化患者均明显升高,与携带者相比差异有统计学意义（P<0.05）,根据肝功能损害严重程度分组,轻度肝炎患者CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞频数最高,与携带者相比差异有统计学意义（P<0.05）。3.二元Logistic回归分析显示乙肝表面抗原滴度及CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞是疾病活动的预测因子（P<0.05）,HBsAg滴度每升高1 Log10 IU/ml,则疾病活动风险增高1.949倍,CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞频数每升高1%,则疾病活动风险增高1.361倍,其预测准确率为78.9%。4.CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞预测疾病活动的AUC为66%,乙肝表面抗原滴度预测疾病活动的AUC为65.3%,联合预测的AUC为69.4%,P=0.002,约登指数为0.387,敏感度68.3%,特异性70.4%。5.CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞频数与HBsAg滴度、HBV-DNA呈正相关（P<0.05）,CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞频数与HBsAg滴度在肝衰竭组中表现出了显着正相关性（P<0.05）。结论:1.CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞频数与HBsAg滴度在慢性乙型肝炎活动患者中有不同程度升高,提示CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞、HBsAg滴度与疾病活动相关,两者联合检测预测疾病活动的价值更高,能帮助我们判断疾病活动状态。2.CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞频数在HBeAg阳性CHB患者和肝硬化患者中有明显升高,机体可能通过提升CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞频数对机体进行免疫负调控来减轻肝脏损害,由于其免疫抑制作用导致持续的病毒感染,病情迁延发展为肝硬化。3.CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞、HBsAg滴度、HBV-DNA两两之间呈正相关,HBsAg滴度与机体的免疫状态有关,CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞与慢性乙型肝炎病毒感染者的发病及转归有重要关系。
郑燕凤[6]（2019）在《慢性乙肝肝郁脾虚与脾胃湿热证Th细胞相关因子表达差异及与H2BE基因相关性研究》文中认为目的:基于Th细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、INF-γ表达差异,分析慢性乙肝肝郁脾虚证和脾胃湿热证细胞免疫学差异,在此基础上,结合前期高通量筛选两证型差异表达mRNA H2BE,对该基因表达差异进行临床样本验证,并对两证型Th细胞因子差异与该基因表达差异相关性进行初步探究,为进一步证候分化与本质的分子机制研究奠定基础。方法:依据中、西医纳入标准,纳入慢性乙肝肝郁脾虚和脾胃湿热证患者共22例,同时纳入健康志愿者9例,分别采集其外周血作为研究标本,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组IL-2、IL-4、IL-10、INF-γ水平,RT-qPCR法检测各组中H2BE表达水平,采用SPSS24.0进行数据分析,基于GeneMANIA数据库构建蛋白作用网络关联图。结果:1.与健康组比较,IL-2、IL-4、INF-γ表达水平在慢性乙肝肝郁脾虚证与脾胃湿热证中均升高（P<0.05）;IL-4、IL-10、INF-γ表达水平在两证型间有显着差异（P<0.01）,IL-2表达水平在两证型间无差异（P>0.05）。2.与健康组比较,H2BE表达水平在慢性乙肝肝郁脾虚证与脾胃湿热证中均升高（P<0.05）,且两证型间存在显着差异（P<0.01）。3.H2BE、IL-2、IL-4、IL-10及相关分子间主要通过物理相互作用、共表达、共定位、信号通路相关联。结论:1.慢性乙肝肝郁脾虚证和脾胃湿热证Th细胞免疫功能有差异,两证型均存在细胞免疫抑制,肝郁脾虚证细胞免疫抑制更显着,这可能与慢性乙肝肝郁脾虚证免疫耐受状态的形成有关;IL-4、IL-10、INF-γ可能是两证型差异的免疫学依据。2.H2BE基因可能是慢性乙肝肝郁脾虚证与脾胃湿热证证型差异的生物学依据,该基因的水平变化可能与Th细胞分化有关;H2BE基因与IL-4、IL-10相关联,其中可能是以GATA3为中间节点,共同参与了相关作用途径,这一结果为后续信号通路研究提供了潜在的研究靶点。
孙凯凯[7]（2019）在《HBV感染者外周血T淋巴细胞表面共刺激分子和T淋巴细胞亚群的检测及临床意义》文中研究指明研究目的通过检测HBV感染者外周血T淋巴细胞表面共刺激分子和T淋巴细胞亚群,探讨其在HBV感染发展中的作用及与HBV-DNA的关系。研究方法采用病例对照研究的方法,根据本研究的纳入排除标准,将2016年10月至2018年1月两家医院（浙江大学医学院附属第一医院及浙江省青春医院）感染科收治的初诊HBV感染者（未经抗病毒治疗）120例作为研究对象纳入研究,其中慢性乙型病毒性肝炎（CHB）患者60例,乙肝肝硬化（LC）患者30例,慢加急性肝功能衰竭（ACLF）患者30例。CHB组又分为HBeAg阳性组30例,HBeAg阴性组30例。以同期30例健康志愿者为对照组,进行一般生化指标检测,并采用酶联免疫吸附法进行乙型肝炎血清学标志物检测,采用流式细胞术检测各组外周血CD4+和CD8+T细胞表面程序性死亡因子（PD-1）,细胞毒T淋巴细胞相关抗原-4（CTLA-4）,T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3（Tim3）,T淋巴细胞（CD3+）,辅助T细胞（CD4+）和抑制T细胞（CD8+）百分比,PCR法检测各组HBV-DNA载量。采用SPSS20.0统计学处理软件对研究所得原始数据进行统计分析。对于计量资料,如果其经正态检验发现为正态分布,则结果按照均数±标准差（x±s）的形式表示,组间比较采用HSD法;如果其经正态检验发现不满足正态分布,则结果以（中位数,下四分位数～上四分位数）（M,P25～P75）的形式表示,两组计量资料进行比较时采用秩和检验;分类变量以例数（百分比）（N;%）表示,根据情况分别采用卡方检验（χ2检验）、卡方检验的矫正公式、Hsher确切概率法等进行比较。两个因素之间的相关性分析采用Pearson直线相关分析。显着性检验水准均取双侧α=0.05,P值<0.05时有统计学意义。结果1.HBV感染者CD4+CTLA-4和CD8+CTLA-4的表达均低于对照组,CHB组CD4+CTLA-4、CD8+CTLA-4、CD8+PD1、CD4+Tim3 和 CD8+Tim3 的表达均高于LC组和ACLF组,差异均具有统计学意义（F分别=56.359,28.364,50.323,56.714,82.774,P<0.05。两两比较 HSD-q 检验,均为 P<0.05）,其中 ACLF组 CD4+CTLA-4、CD8+CTLA-4、CD4+Tim3 均为最低,CD4+PD1 为最高。CHB组中HBeAg阳性组CD4+CTLA-4、CD8+CTLA-4的表达均低于HBeAg阴性组,CD4+PD1、CD8+PD1、CD4+Tim3 和 CD8+Tim3 的表达均高于 HBeAg 阴性组（t分别=18.536,15.759,20.009,11.228,31.529,23.659,均P<0.05）。2.HBV感染者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+的表达均低于对照组,CD8+的表达高于对照组,其中CHB组CD3+、CD4+和CD4+/CD8+均高于LC组和ACLF组,CD8+的表达均低于 LC 组和 ACLF 组（F分别=22.591,13.665,44.664,32.113,均P<0.05）,ACLF组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+的表达均为最低,CD8+的表达为最高。CHB组中HBeAg阳性组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+的表达均低于HBeAg阴性组,CD8+的表达均高于HBeAg阴性组,差异具有统计学意义（t分别=25.227,20.674,19.842,24.516,均P<0.05）。3.CHB 组 HBV-DNA 水平（4.58±0.09）（lg 拷贝/mL）高于 LC 组（3.64±0.41）（lg拷贝/mL）和ACLF组（3.48±0.35）（lg拷贝/mL）,差异均具有统计学意义（F=5.147,P<0.05。两两比较HSD-q检验,均为P<0.05）,以ACLF水平最低。CHB组中HBeAg 日性组HBV-DNA水平（4.99±0.09）（lg拷贝/mL）高于CHB组中HBeAg阴性组（4.12±0.08）（lg拷贝/mL）,差异均具有统计学意义（F=39.573,P<0.05）。4.HBV 感染者 HBV-DNA 与 CD8+PDl,CD8+Tim3 存在显着正相关性（r分别=0.62,0.77,P<0.05）,与 CD4+CTLA-4,CD8+CTLA-4,CD4+Tim3,CD4+PD1,CD3+,CD4+和 CD8+不具有相关性（r分别=0.12,0.07,0.09,0.16,0.19,0.11,0.13,P>0.05）。结论外周血T淋巴细胞表面共刺激分子和T淋巴细胞亚群比例与疾病发展相关联,部分与HBV-DNA正相关,CTLA-4、PD-1、Tim-3的表达量、T淋巴细胞亚群比例均可作为免疫功能的评价指标,且与疾病的进展密切相关。
夏先艳,张国梁,侯勇,韩啥,季青青,刘雨香[8]（2017）在《中医药对慢性乙型肝炎患者T细胞亚群的影响》文中研究指明慢性乙型肝炎（ChronichepatitisB,CHB）是由乙型肝炎病毒（Hepatitisbvirus,HBV）介导的以肝脏局部多种炎性细胞浸润的慢性感染性疾病。HBV发病与宿主免疫应答功能强弱密切相关,其宿主免疫功能状态影响着此病的病程及预后转归。HBV的发病与T细胞亚群有着密切的关系,近年中医药治疗慢性乙型病毒性肝炎作用机制多从对免疫调节的影响角度探索抗病毒机制,中医药对调节CHB患者免疫功能具有独特优势,论文从单味中药、中药复方等对CHB患者T细胞亚群的影响等方面取得的研究进展进行综述,以期对临床医务人员有一定的启迪。
章瑾[9]（2017）在《不同中医体质类型的慢性HBV感染者与HLA-A2、特异性CTL、PD-1相关性研究》文中研究说明目的:探讨不同中医体质类型的慢性HBV感染者HLA-A2等位型、特异性CTL及PD-1的变化;阐明HLA-A2等位型、特异性CTL及PD-1在慢性HBV感染中的状态;明确慢性HBV感染者不同中医体质分型与特异性CTL、HLA-A2等位型、PD-1、HBeAg、HBV-DNA载量等指标的相关性。方法:应用王琦教授设计的的《中医体质分类与判定表》,对本院收治的152例慢性HBV感染者进行一般资料调查（包括性别、年龄及发病时间、病史等）和中医体质类型判定。检测受试者肝功能、HBeAg、HBV-DNA、HLA-A2等位型、特异性CTL及PD-1等指标。应用统计数据进行分析,探讨慢性HBV感染者的中医体质类型分布的规律,以及不同中医体质类型与肝功能、HBeAg、HBV-DNA、HLA-A2等位型、特异性CTL及PD-1等指标的关系。结果:符合纳入标准的慢性HBV感染者共152例,其中湿热质有60例（25.4%）,其次为气虚质54例（22.9%）,气郁质52例（22.1%）,痰湿质40例（17.0%）,瘀血质18例（7.6%）,阴虚质10例（4.2%）,阳虚质2例（0.8%）,无平和质及特禀质患者。不同中医体质类型的分布与患者的性别及年龄有关,且差异有统计学意义（P<0.05）。不同中医体质类型的慢性HBV感染者,其HBeAg阳性阴性分布及HBV-DNA载量分布也不相同,且差异有统计学意义。但不同中医体质类型的肝功能指标之间差义无明显意义（P>0.05）。本研究中,95%的患者HLA-A2等位型阳性,故未将其与中医体质类型、PD-1等指标进行详细分析。特异性CTL与肝功能之间未显示显着相关性,PD-1与HBV-DNA载量呈正相关,四种主要体质类型中特异性CTL与PD-1分布不同,且差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:慢性HBV感染者的中医体质类型主要为湿热质、气虚质、气郁质、痰湿质,其次是瘀血质、阴虚质、阳虚质,本研究中未见平和质和特禀质,且男性多于女性。青壮年慢性HBV感染者的中医体质主要以湿热质、痰湿质为主,而中老年慢性HBV感染者的中医体质主要以气虚质、气郁质为主。本研究中慢性HBV感染者中医体质类型的分布与HLA-A2等位型未见明显相关性,慢性HBV感染者中医体质类型的分布与HBeAg、HBV-DNA、特异性CTL及PD-1具有相关性。总之,通过对慢性HBV感染者进行中医体质分型,了解该患者的中医体质特征,深入了解不同中医体质慢性HBV感染者的免疫应答状况,对于丰富、拓展中西医结合治疗肝病的研究内涵有着重要理论和应用价值。
姜永亮,彭雁忠[10]（2015）在《特异性细胞毒性T细胞在乙型肝炎病毒感染中的作用机制及其影响因素》文中研究表明乙型肝炎病毒（HBV）是一种嗜肝非细胞毒性病毒,感染机体后,诱导体内产生一系列免疫应答。此免疫应答既清除HBV病毒,同时引起肝细胞的炎症反应和损伤。研究表明,在机体免疫反应中,HBV特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）对病毒的清除发挥重要作用,其与肝细胞直接接触或分泌细胞因子IFN-γ来清除病毒。近年来,国内外对特异性CTL在HBV感染过程中的作用机制进行了深入研究并取得了较大进展,为临床治疗提供了新策略。
二、特异性CTL在乙型肝炎病毒感染中作用的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、特异性CTL在乙型肝炎病毒感染中作用的研究（论文提纲范文）
（1）趋化因子CXCL10基因多态性与慢性乙型肝炎病毒感染的关联研究（论文提纲范文）
| 英汉缩略语名词对照 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 乙肝易感性基因CXCL10 基因启动子区遗传变异与乙型肝炎的关联研究 |
| 前言 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 研究人群 |
| 1.2 流行病学资料收集 |
| 1.3 SNP的选择 |
| 1.4 DNA提取和基因分型 |
| 1.4.1 Sequenom Mass Array系统基因分析步骤 |
| 1.5 血清学检测 |
| 1.6 统计分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 研究对象的基本情况 |
| 2.2 SNP多态性与成人持续HBV感染风险的关联分析 |
| 2.3 SNP多态性与成人持续HBV感染风险的分层分析 |
| 2.4 SNP多态性与成人持续HBV感染风险的单倍型分析 |
| 2.5 CXCL10 基因与慢性乙型肝炎患者临床特征的关联分析 |
| 2.6 CXCL10 rs4508917 基因型与儿童 HBV感染风险和乙肝高危儿童 HBV突破感染的关联分析 |
| 2.7 CXCL10 基因SNP与儿童HBV感染风险的分层分析 |
| 3 讨论 |
| 第二部分 乙肝易感性基因CXCL10 基因启动子区遗传变异的功能验证实验 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 血清CXCL10 浓度检测 |
| 1.2 质粒构建与双荧光素酶检测 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 慢性乙型肝炎患者和对照组血清CXCL10 水平 |
| 2.2 CXCL10 基因启动子区变异的功能分析 |
| 3 讨论 |
| 第三部分 乙肝易感性基因CXCL10 基因单核苷酸多态性rs4508917 与核苷类药物治疗应答的关联 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 CXC趋化因子配体10在慢性乙型肝炎中作用的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
（2）不同PD-1及CXCR5表达的T淋巴细胞在乙型肝炎病毒感染中的功能研究（论文提纲范文）
| 英汉缩略语名词对照 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 PD-1~(hi) CXCR5~+CD4~+Tfh细胞和PD-1~(hi) CXCR5-CD4~+Tph细胞对经PEG-IFN-α治疗的CHB患者HBsAg下降和HBV DNA清除的影响 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 HBV特异性CXCR5~+CD8~+Tfc细胞在HBV感染中的作用研究 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 文献综述:慢性乙型病毒性肝炎治愈中的免疫重建 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读博士期间发表的学术论文 |
（3）温阳法对HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者细胞免疫功能的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 1.临床资料 |
| 2.实验方法 |
| 3.结果 |
| 4.讨论 |
| 结语 |
| 1.结论 |
| 2.不足与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（4）TIGIT在慢性HBV感染者T细胞中的表达和功能研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 本论文专用缩略词表(ABBREVIATIONS) |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1.引言 |
| 2.T细胞介导的抗病毒反应 |
| 3.慢性病毒感染过程中抑制性受体在耗竭的CD8+T 细胞表达上调 |
| 4.TIGIT和 PD-1 的分子结构特点、表达、参与免疫调节及在慢性病毒感染中的作用 |
| 4.1 TIGIT |
| 4.2 PD-1 |
| 5.共抑制性受体的协同作用 |
| 6.慢性病毒感染中抑制性受体表达的转录调控 |
| 6.1 NFAT |
| 6.2 Blimp-1 |
| 6.3 T-bet |
| 6.4 T-box |
| 6.5 FoxO1 |
| 7.小结和展望 |
| 第一部分TIGIT在慢性HBV感染者外周血T细胞表达的研究 |
| 材料与方法 |
| 1.材料 |
| 2.方法 |
| 3.统计学处理 |
| 结果 |
| 1. TIGIT在慢性HBV感染者和健康者外周血T细胞表达 |
| 2.TIGIT在慢性HBV感染者外周血T细胞分化亚群各阶段表达 |
| 3. TIGIT和PD-1 在慢性HBV感染者外周血T细胞表达 |
| 4. HLA-A*0201 限制性表位肽/五聚体复合物流式细胞术检测HBV特异性CTL |
| 5. TIGIT和PD-1 在慢性HBV感染者外周血HBVcore特异性CTL表达 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分TIGIT在慢性HBV感染者外周血T细胞中的功能研究 |
| 材料与方法 |
| 1.材料 |
| 2.方法 |
| 3.统计学处理 |
| 结果 |
| 1.慢性HBV感染者CD8+T细胞及HBV特异性CTL上CD69 的表达和Granzyme B、Perforin的分泌 |
| 2.慢性HBV感染者HBV特异性CTL细胞因子的分泌 |
| 3.慢性HBV感染者外周血特异性CTL增殖的检测 |
| 4.慢性HBV感染者CD8+T细胞凋亡敏感性 |
| 5.TIGIT和PD-1 共表达对慢性HBV感染者T细胞分泌细胞因子影响 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三部分TIGIT在慢性HBV感染者外周血T细胞表达与临床指标相关性研究 |
| 材料与方法 |
| 1.材料 |
| 2.方法 |
| 3.统计学处理 |
| 结果 |
| 1. TIGIT在慢性HBV感染者T细胞的表达与临床指标的相关性 |
| 2. TIGIT在四种核苷(酸)类似物治疗的慢性HBV感染者T细胞表达情况 |
| 3. TIGIT在慢性HBV感染者不同疾病进展阶段外周血T细胞表达 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 博士期间以第一作者发表文章目录 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
（5）慢性乙肝感染者表面抗原滴度、Treg细胞与疾病活动的相关性研究（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 病例来源 |
| 1.1.2 主要仪器与试剂 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 病史采集 |
| 1.2.2 指标检测 |
| 1.2.3 实验分组 |
| 1.2.4 观察指标 |
| 1.2.5 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 携带者与疾病活动者一般情况的比较 |
| 2.2 乙肝表面抗原滴度、Treg细胞与疾病活动的关系 |
| 2.2.1 携带者组与活动者组乙肝表面抗原滴度、Treg细胞的比较 |
| 2.2.2 携带者组与肝炎活动者组的亚组分析 |
| 2.2.3 慢性乙型肝炎活动影响因素的二元Logistic回归分析 |
| 2.2.4 乙肝表面抗原滴度、Treg细胞预测疾病活动的ROC曲线 |
| 2.3 乙肝表面抗原滴度、Treg细胞与疾病严重程度的关系 |
| 2.4 Treg细胞及乙肝表面抗原滴度与其他指标的相关性分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 乙肝表面抗原滴度的产生及检测 |
| 3.2 血清乙肝表面抗原在疾病活动患者中水平升高 |
| 3.3 血清乙肝表面抗原与机体免疫状况的关系 |
| 3.4 Treg细胞在慢性HBV感染者疾病活动患者中表达升高 |
| 3.5 Treg细胞、血清乙肝表面抗原在慢性HBV感染者抗病毒治疗中的应用 |
| 4 结论 |
| 5 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 作者在学期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
（6）慢性乙肝肝郁脾虚与脾胃湿热证Th细胞相关因子表达差异及与H2BE基因相关性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 1.慢性乙肝中医证候研究 |
| 2.乙肝病毒免疫逃逸及持续感染机制研究 |
| 3.慢性乙肝细胞免疫相关研究 |
| 第二部分 实验研究 |
| 1.病例收集 |
| 1.1 西医诊断标准 |
| 1.2 中医诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 2.ELISA检测IL-2、IL-10、IL-4、INF-γ水平 |
| 2.1 标本收集 |
| 2.2 主要试剂 |
| 2.3 主要仪器 |
| 2.4 实验原理 |
| 2.5 试剂准备 |
| 2.6 实验步骤 |
| 3.实时荧光定量检测 |
| 3.1 主要试剂 |
| 3.2 主要仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 4.数据分析 |
| 4.1 分析方法 |
| 4.2 基线情况分析 |
| 4.3 细胞因子差异分析 |
| 4.4 H2BE组间水平差异分析 |
| 4.5 H2BE基因与各细胞因子间关联性分析 |
| 5.讨论 |
| 5.1 Th细 胞相关因子水平差异讨论 |
| 5.2 H2BE水平差异讨论 |
| 5.3 H2BE与IL-4、IL-10关联性讨论 |
| 结论 |
| 问题与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附件1:在读期间公开发表的学术论文、专着及科研成果 |
（7）HBV感染者外周血T淋巴细胞表面共刺激分子和T淋巴细胞亚群的检测及临床意义（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 缩略词表 |
| 引言 |
| 对象与方法 |
| 1 研究对象 |
| 2 研究方法 |
| 3 调查方法 |
| 4 资料的录入 |
| 5 资料的统计分析 |
| 6 质量控制措施 |
| 结果 |
| 1 研究对象的一般情况 |
| 2 HBV感染者和健康体检者外周血T淋巴细胞表面共刺激分子的比较 |
| 3 HBV感染者和健康体检者T淋巴细胞亚群的比较 |
| 4 HBV感染者各组间HBV-DNA的比较 |
| 5 HBV-DNA载量与共刺激分子、T淋巴细胞亚群的相关性分析 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 |
（8）中医药对慢性乙型肝炎患者T细胞亚群的影响（论文提纲范文）
| CHB的免疫学机制 |
| CHB与T细胞亚群比例及功能变化关系 |
| 1 CHB与Th1/Th2细胞比例关系 |
| 2CHB与CD4+T细胞和CD8+T的数量、功能及CD4+/CD8+T比值关系 |
| 3 CTL数量及功能关系 |
| 中医药治疗CHB免疫学机制 |
| 1调节辅助性T细胞功能及调节Th1/Th2比例 |
| 2调节CD4+、CD8+数目及功能, 调节CD4+/CD8+比值 |
| 3调节CTL细胞数目及功能 |
| 小结 |
（9）不同中医体质类型的慢性HBV感染者与HLA-A2、特异性CTL、PD-1相关性研究（论文提纲范文）
| 摘要 Abstract 前言 第一部分 |
| 研究内容与研究方法 1. |
| 研究目的 2. |
| 研究对象 3. |
| 纳入标准 4. |
| 排除标准 5. |
| 中医体质类型判定标准 6. |
| 实验方法 第二部分 |
| 研究结果 1. |
| 慢性HBV感染者的性别比 2. |
| 慢性HBV感染者的年龄分布 3. |
| 慢性HBV感染者的中医体质类型分布 4. |
| 入选病例的一般资料、肝功能,HBeAg(阳性、阴性),HBV-DNA定量等指标在四种中医体质中的情况 5. |
| 慢性HBV感染者的四种中医体质类型与性别的相关性分析 6. |
| 慢性HBV感染者中医体质类型的年龄分布 7. |
| 慢性HBV感染者的中医体质与肝功能指标的相关分析 8. |
| 慢性HBV感染者中的乙肝标志物HBeAg阳性患者所占比例 9. |
| 慢性HBV感染者四种中医体质类型与HBeAg阳性比的相关性 10.慢性HBV感染者在四种中医体质类型中HBV-DNA载量的分布 11. |
| 慢性HBV感染者HLA-A2等位型的流式表达 12. |
| 慢性HBV感染者特异性CTL、PD-1的流式表达 13. |
| 慢性HBV感染者的特异性CTL、PD-1与肝功能、HBV-DNA载量等指标的评分相关性 14. |
| 慢性HBV感染者特异性CTL、PD-1在四种中医体质中的表达 第三部分 |
| 讨论 1. |
| 慢性HBV感染者的中医体质类型分布情况 2. |
| 慢性HBV感染者中医体质类型的年龄及性别分布情况 3. |
| HBV-DNA载量及HBeAg阳性率在四种中医体质类型慢性HBV感染者中的分布情况 4. |
| 慢性HBV感染者特异性CTL及PD-1与肝功能的关系 5. |
| 慢性HBV感染者特异性CTL及PD-1在四种中医体质中的分布 结语 参考文献 附录 攻读硕士学位期间取得的学术成果及参与项目 致谢 |
四、特异性CTL在乙型肝炎病毒感染中作用的研究（论文参考文献）
- [1]趋化因子CXCL10基因多态性与慢性乙型肝炎病毒感染的关联研究[D]. 徐瑛. 重庆医科大学, 2021(01)
- [2]不同PD-1及CXCR5表达的T淋巴细胞在乙型肝炎病毒感染中的功能研究[D]. 张莉. 重庆医科大学, 2020(01)
- [3]温阳法对HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者细胞免疫功能的影响[D]. 江诗怡. 湖北中医药大学, 2020(09)
- [4]TIGIT在慢性HBV感染者T细胞中的表达和功能研究[D]. 魏艳艳. 东南大学, 2019(05)
- [5]慢性乙肝感染者表面抗原滴度、Treg细胞与疾病活动的相关性研究[D]. 杨晓萌. 吉首大学, 2019(02)
- [6]慢性乙肝肝郁脾虚与脾胃湿热证Th细胞相关因子表达差异及与H2BE基因相关性研究[D]. 郑燕凤. 成都中医药大学, 2019(04)
- [7]HBV感染者外周血T淋巴细胞表面共刺激分子和T淋巴细胞亚群的检测及临床意义[D]. 孙凯凯. 浙江大学, 2019(03)
- [8]中医药对慢性乙型肝炎患者T细胞亚群的影响[J]. 夏先艳,张国梁,侯勇,韩啥,季青青,刘雨香. 中医药临床杂志, 2017(10)
- [9]不同中医体质类型的慢性HBV感染者与HLA-A2、特异性CTL、PD-1相关性研究[D]. 章瑾. 南京中医药大学, 2017(07)
- [10]特异性细胞毒性T细胞在乙型肝炎病毒感染中的作用机制及其影响因素[J]. 姜永亮,彭雁忠. 国际免疫学杂志, 2015(06)