有丝分裂染色体集缩论文_王洪振,程军,刘春明

导读:本文包含了有丝分裂染色体集缩论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:染色体,有丝分裂,蛋白,论文,染色质,SMC,集缩索。

有丝分裂染色体集缩论文文献综述

王洪振,程军,刘春明[1](2007)在《SMC蛋白在有丝分裂染色体集缩中的作用研究进展》一文中研究指出SMC蛋白是新近发现的一种重要的染色体非组蛋白,研究发现SMC蛋白在大多数生物中普遍存在,而且SMC蛋白在有丝分裂染色体集缩中起着非常重要的作用。本文介绍了SMC蛋白的结构特点。并简要综述了SMC蛋白在有丝分裂染色体集缩中的作用的研究进展.(本文来源于《吉林师范大学学报(自然科学版)》期刊2007年01期)

王洪振[2](2003)在《人集缩素SMC蛋白在有丝分裂染色体集缩和分离中的作用研究》一文中研究指出SMC蛋白是20世纪90年代初新发现的一类蛋白,参与染色体高级结构动态变化的多个方面,如有丝分裂染色体集缩和分离、性染色体剂量补偿效应、姊妹染色单体的粘着作用、遗传重组与DNA的修复等过程。因此,SMC蛋白的发现是当前研究染色体高级结构变化的分子机制的重要突破。目前在真核生物中SMC蛋白分为六个亚族,SMC1亚族、SMC2亚族、SMC3亚族、SMC4亚族、SMC5亚族、SMC6亚族。两个不同的SMC蛋白组成异二聚体,形成叁种异二聚体:SMC2—SMC4、SMC1—SMC3和SMC5—SMC6。这些异二聚体又作为大的功能复合物的核心组分。 以SMC2—SMC4二聚体为基础,结合叁种不同的非SMC蛋白构成集缩素,参与有丝分裂染色体的集缩和分离过程。人集缩素由两个SMC亚基hCAP-E和hCAP-C和叁个非SMC亚基hCAP-G、hCAP-D2和hCAP-H组成。hCAP-E和hCAP-C组成异二聚体,是人集缩素的核心成分。目前关于集缩素中各个亚基所起的作用还没有被阐明,是当前研究的热点。 为了更好的认识人集缩素中两个SMC亚基hCAP-E和hCAP-C的功能,本研究利用RNAi技术和转染hCAP-E和hCAP-C的C-末端真核表达质粒分别研究了人集缩素中两个SMC蛋白亚基的功能。为此我们构建了对人集缩素中两个SMC亚基hCAP-E和hCAP-C特异的RNAi质粒RHE和RHC。同时也构建了附加Kozac序列和核定位信号的hCAP-E和hCAP-C的C-末端真核表达质粒。利用脂质体Superfect介导的转染方法将外源质粒导入体外培养的Hela细胞。为了区分被转染的细胞,以附加Kozac序列和核定位信号的GFP(pcDNA3.1+KG)作为被转染的细胞的标记。在实验中首先证明所选择的核定位信号是有效的。在此基础上,本实验以GFP为标记建立起共转染体系。 当分别共转染附加Kozac序列和核定位信号的GFP与人集缩素SMC亚基hCAP一E特异的RNAi质粒RHE和人集缩素SMC亚基hCA尸一C的F{NAi质粒RHC时,都观察到GFP和Hochest33342标记的转染后Hela细胞表现多核和染色质桥现象。进行RT一pCR检测表明转染后细胞内hCAP一E和hCAP一C在袱NA水平被下调。在实验中同时共转染人集缩素SMC亚基hCAP一E和hCAP一C特异的RNAi质粒RHE和RHC和pcDNA3.1+KG到Hela细胞。这时,存在叁种可能的情况,即共转染RHE和peDNA3.1*KC、共转染RHC和peDNA3.1+KG、共转染RHE和RHC和pc洲A3.1+KG,但都观察到明显的染色质桥现象,进一步证明这种表型是人集缩素中SMC亚基的缺陷的特征表型。 当共转染附加Koz、序列和核定位信号的GFP与人集缩素SMC亚基hCA尸一E和hCAP一C的C一末端真核表达质粒时,观察到转染后Hela细胞也表现多核和染色质桥现象。进行RT一PCR检测表明人集缩素SMC亚基hCAP一E和hCAP一C的C一末端真核表达质粒在Hela细胞内得到过表达。对共转染peDNA3.1+KG和peDNA3.1+KNE后的Hela细胞相对于对照共转染pcDNA3.1十KG和pREP4的Hela细胞表达内源基因片段HEC的水平进行了比较,表明转染pcl)NA3.1+KNE的Hel。细胞内源hCAP一E在转录水平上受到下调。因此转染pcDNA3.1+KNE所引起的Hela细胞表现染色质桥和多核现象是可能是通过影响内源hCAP一E表达和干扰正常hCAP一E的相关的功能的结果。 本实验首次通过RNAi技术研究了hCAP一E和hCAP一C的功能,观察到转染RNAi质粒后的Hela细胞表现出染色质桥和多核现象。这是在哺乳动物细胞中首次报道这一现象。首次通过构建hCAP一E和hCAP一C的C一木端真核表达质粒,转染Hela细胞后表现出染色质桥和多核现象,表明C一末端结构域能够干扰hCAP一E和hCAP一C的正常功能。通过RNAi技术和转染hCAP一E和hCAP一C的C一末端真核表达质粒都产生了相同或相似的表型缺陷。说明二者都通过影响集缩素的功能产生突变表型,是集缩素整体功能受到阻碍的反映。本研究证明SMC蛋白在集缩索中起重要作用,为进一步探索SMC蛋白的功能奠定了基础。(本文来源于《东北师范大学》期刊2003-12-01)

有丝分裂染色体集缩论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

SMC蛋白是20世纪90年代初新发现的一类蛋白,参与染色体高级结构动态变化的多个方面,如有丝分裂染色体集缩和分离、性染色体剂量补偿效应、姊妹染色单体的粘着作用、遗传重组与DNA的修复等过程。因此,SMC蛋白的发现是当前研究染色体高级结构变化的分子机制的重要突破。目前在真核生物中SMC蛋白分为六个亚族,SMC1亚族、SMC2亚族、SMC3亚族、SMC4亚族、SMC5亚族、SMC6亚族。两个不同的SMC蛋白组成异二聚体,形成叁种异二聚体:SMC2—SMC4、SMC1—SMC3和SMC5—SMC6。这些异二聚体又作为大的功能复合物的核心组分。 以SMC2—SMC4二聚体为基础,结合叁种不同的非SMC蛋白构成集缩素,参与有丝分裂染色体的集缩和分离过程。人集缩素由两个SMC亚基hCAP-E和hCAP-C和叁个非SMC亚基hCAP-G、hCAP-D2和hCAP-H组成。hCAP-E和hCAP-C组成异二聚体,是人集缩素的核心成分。目前关于集缩素中各个亚基所起的作用还没有被阐明,是当前研究的热点。 为了更好的认识人集缩素中两个SMC亚基hCAP-E和hCAP-C的功能,本研究利用RNAi技术和转染hCAP-E和hCAP-C的C-末端真核表达质粒分别研究了人集缩素中两个SMC蛋白亚基的功能。为此我们构建了对人集缩素中两个SMC亚基hCAP-E和hCAP-C特异的RNAi质粒RHE和RHC。同时也构建了附加Kozac序列和核定位信号的hCAP-E和hCAP-C的C-末端真核表达质粒。利用脂质体Superfect介导的转染方法将外源质粒导入体外培养的Hela细胞。为了区分被转染的细胞,以附加Kozac序列和核定位信号的GFP(pcDNA3.1+KG)作为被转染的细胞的标记。在实验中首先证明所选择的核定位信号是有效的。在此基础上,本实验以GFP为标记建立起共转染体系。 当分别共转染附加Kozac序列和核定位信号的GFP与人集缩素SMC亚基hCAP一E特异的RNAi质粒RHE和人集缩素SMC亚基hCA尸一C的F{NAi质粒RHC时,都观察到GFP和Hochest33342标记的转染后Hela细胞表现多核和染色质桥现象。进行RT一pCR检测表明转染后细胞内hCAP一E和hCAP一C在袱NA水平被下调。在实验中同时共转染人集缩素SMC亚基hCAP一E和hCAP一C特异的RNAi质粒RHE和RHC和pcDNA3.1+KG到Hela细胞。这时,存在叁种可能的情况,即共转染RHE和peDNA3.1*KC、共转染RHC和peDNA3.1+KG、共转染RHE和RHC和pc洲A3.1+KG,但都观察到明显的染色质桥现象,进一步证明这种表型是人集缩素中SMC亚基的缺陷的特征表型。 当共转染附加Koz、序列和核定位信号的GFP与人集缩素SMC亚基hCA尸一E和hCAP一C的C一末端真核表达质粒时,观察到转染后Hela细胞也表现多核和染色质桥现象。进行RT一PCR检测表明人集缩素SMC亚基hCAP一E和hCAP一C的C一末端真核表达质粒在Hela细胞内得到过表达。对共转染peDNA3.1+KG和peDNA3.1+KNE后的Hela细胞相对于对照共转染pcDNA3.1十KG和pREP4的Hela细胞表达内源基因片段HEC的水平进行了比较,表明转染pcl)NA3.1+KNE的Hel。细胞内源hCAP一E在转录水平上受到下调。因此转染pcDNA3.1+KNE所引起的Hela细胞表现染色质桥和多核现象是可能是通过影响内源hCAP一E表达和干扰正常hCAP一E的相关的功能的结果。 本实验首次通过RNAi技术研究了hCAP一E和hCAP一C的功能,观察到转染RNAi质粒后的Hela细胞表现出染色质桥和多核现象。这是在哺乳动物细胞中首次报道这一现象。首次通过构建hCAP一E和hCAP一C的C一木端真核表达质粒,转染Hela细胞后表现出染色质桥和多核现象,表明C一末端结构域能够干扰hCAP一E和hCAP一C的正常功能。通过RNAi技术和转染hCAP一E和hCAP一C的C一末端真核表达质粒都产生了相同或相似的表型缺陷。说明二者都通过影响集缩素的功能产生突变表型,是集缩素整体功能受到阻碍的反映。本研究证明SMC蛋白在集缩索中起重要作用,为进一步探索SMC蛋白的功能奠定了基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

有丝分裂染色体集缩论文参考文献

[1].王洪振,程军,刘春明.SMC蛋白在有丝分裂染色体集缩中的作用研究进展[J].吉林师范大学学报(自然科学版).2007

[2].王洪振.人集缩素SMC蛋白在有丝分裂染色体集缩和分离中的作用研究[D].东北师范大学.2003

论文知识图

月共转染RN质粒E和RHC后导致He细表现染...蛋白的结构鸡集缩素亚基SCⅡ突变表型在线虫、果蝇...3 染色体正在解集缩(末期后 G1 期) 图...转染真核表达质粒PcDNA3.卜KG的Hela细...推测的RoseovariussP.

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