miR-592靶向Cep135调控小鼠胚胎干细胞自我更新及分化

miR-592靶向Cep135调控小鼠胚胎干细胞自我更新及分化

论文摘要

目的探讨miR-592在小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,m ESCs)自我更新及分化过程中的作用。方法通过转染试剂将miR-592表达质粒转入m ESCs,以过表达miR-592。利用qRT-PCR及Western印迹法分析miR-592对m ESCs分化的影响。利用Target Scan数据库预测miR-592作用的靶基因,并通过双荧光素酶报告实验验证靶基因。利用Western印迹法探究miR-592及其靶基因对m ESCs自我更新的影响。结果 qRT-PCR及Western印迹法实验结果表明miR-592促进mESCs向外胚层方向分化。生物信息学分析及双荧光素酶报告实验的结果表明Cep135是miR-592作用的靶基因,而Western印迹法实验发现Cep135能够促进m ESCs的自我更新。结论 miR-592通过靶向下调Cep135的表达,以抑制m ESCs的自我更新,进而促使m ESCs向外胚层方向分化。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 细胞培养及细胞转染
  •   1.2 免疫细胞化学
  •   1.3 qRT-PCR检测
  •   1.4 Western印迹法分析
  •   1.5 p Super-miR-592及pSuper-miR-592 mut质粒构建
  •   1.6 双荧光素酶报告基因实验
  •   1.7 统计学处理
  • 2 结果
  •   2.1 小鼠胚胎干细胞全能性的鉴定
  •   2.2 qRT-PCR分析miR-592对m ESCs分化的影响
  •   2.3 Western印迹法验证miR-592对m ESCs分化的影响
  •   2.4 生物信息学预测miR-592作用的靶基因
  •   2.5 双荧光素酶报告实验验证miR-592作用的靶基因
  •   2.6 Cep135对m ESCs自我更新的影响
  •   2.7 miR-592靶向Cep135以抑制m ESCs的自我更新
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 白振东,李培昕,张宁彦,程健,张敬,张军

    关键词: 胚胎干细胞,自我更新,分化

    来源: 同济大学学报(医学版) 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 同济大学医学院,同济大学生命科学与技术学院

    基金: 国家自然科学基金(81771417)

    分类号: R329.2

    DOI: 10.16118/j.1008-0392.2019.05.003

    页码: 542-547+562

    总页数: 7

    文件大小: 1226K

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