培养基添加剂促进重组大肠杆菌胞外分泌β-环糊精葡萄糖基转移酶的工艺优化

论文摘要

随着对β-环糊精的需求的增加,开发提高β-环糊精葡萄糖基转移酶产量成为主要焦点之一。为了克服重组质粒pET28a-DacD-cgt-his胞外产酶量低的缺陷,研究了培养基添加剂对β-环糊精葡萄糖基转移酶胞外分泌的影响,提高胞外表达量。首先通过向培养基中分别添加表面活性剂（Tween-80、Triton X-100）、氨基酸（天冬氨酸、甘氨酸）、渗透调节剂（L-脯氨酸、山梨醇、甜菜碱）和环糊精（α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精）4种类型添加剂以确定对重组大肠杆菌胞外分泌β-环糊精葡萄糖基转移酶的有益添加剂;其次对Tween-80、Triton X-100、甘氨酸和L-脯氨酸进行单因素试验和正交试验以确定培养基添加剂的组合条件。结果表明,各因素对胞外产β-环糊精葡萄糖基转移酶的影响顺序依次是:Tween-80>Triton X-100>甘氨酸>L-脯氨酸;培养基添加剂促进胞外分泌β-环糊精葡萄糖基转移酶的最优组合是:Triton X-100 0.5%、Tween-80 2%、甘氨酸30 mmol/L、L-脯氨酸80 mmol/L,胞外产酶量达50.3 U/mL,是对照组的2.04倍。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 郑金珠,吴华伟,李相前

关键词: 环糊精葡萄糖基转移酶,培养基添加剂,单因素试验,正交试验

来源: 食品科技 2019年11期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 一般化学工业

单位: 长江大学生命科学学院,淮阴工学院生命科学与化学工程学院

基金: 江苏省益生制剂重点建设实验室开放课题(JSYSZJ2017001)

分类号: TQ925

DOI: 10.13684/j.cnki.spkj.2019.11.004

页码: 16-22

总页数: 7

文件大小: 3432K

下载量: 72

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