导读:本文包含了囊胚细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:囊胚,细胞,甲酸,荧光,地中海,单细胞,电泳。
囊胚细胞论文文献综述
屈平平,李涛,田文儒[1]（2019）在《热应激对小鼠早期囊胚细胞骨架的影响》一文中研究指出为了探索热应激降低小鼠早期囊胚后续发育能力的作用机理,试验采用形态学分析的方法,将试验动物昆明种小鼠分为39℃热应激组、41℃热应激组和对照组(37℃),从亚细胞水平观察体外热应激处理后小鼠早期囊胚细胞骨架的变化。结果表明:对照组和39℃热应激组小鼠早期囊胚紧密连接,桥粒未发生明显变化;而41℃热应激组小鼠早期囊胚桥粒连接结构不完整,两侧附着微丝减少,可见到明显的缝隙,卵周隙明显增大,微绒毛减少、弯曲,且细胞器的修复能力变差。说明细胞骨架的破坏是热应激降低小鼠早期囊胚后续发育能力的作用机理之一。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2019年05期）
徐惠玲,刘彦慧,晏平,何怡,秦佳纯[2]（2018）在《囊胚细胞WGA结合短片段Gap-PCR的α-地贫SEA突变快速植入前遗传学诊断》一文中研究指出目的建立一种基于囊胚细胞全基因组扩增(WGA)结合目的序列短片段Gap-PCR基因分型技术的α-地中海贫血东南亚型(SEA)缺失突变快速植入前遗传学诊断新方法。方法以多重置换扩增(MDA)WGA技术为基础,建立以管家基因GAPDH和β-actin为目的序列的WGA产物双重荧光PCR质检体系,以及突变和正常序列短片段Gap-PCR的α-地中海贫血SEA缺失基因分型体系,通过对不同细胞数SEA携带者淋巴细胞样本的检测进行灵敏度与准确性评价,对12例囊胚活检样本的检测进行应用评价。结果应用本研究建立的方法,不同淋巴细胞数样本的结果显示3细胞时即未出现等位基因脱扣,4细胞时目标模板的WGA产物量趋于稳定;10例WGA成功的囊胚活检样本的基因分型结果分别为--SEA/αα(5例)和αα/αα(5例),与验证基因型相符。结论本研究建立的方法为一个完整检测流程,即以4～6个囊胚活检细胞为检材,对MDA产物进行WGA质检及相对浓度评估后,以短片段Gap-PCR体系而实现α-地贫SEA缺失的PGD快速基因分型;此方法简单快速、结果准确、检测成本低而适合临床常规应用。(本文来源于《南方医科大学学报》期刊2018年10期）
韩倩倩,赵军招,杨昭鹏,史建峰,王迎[3]（2018）在《囊胚细胞计数法评价辅助生殖用医疗器械临床前安全性》一文中研究指出辅助生殖技术(Assisted Reproductive Technologies,ART)用种类繁多的医疗器械应该通过严格的生物试验来检测其安全性。小鼠胚胎试验(Mouse Embryo Assay,MEA)已被认为是最重要和标准化的方法之一,其阈率是1-细胞鼠胚96 h培养后囊胚形成超过80%。囊胚形成率用于胚胎质量控制的不利之处一直受到关注,原因在于其完全依赖于胚胎形态学,而包括分子和遗传信息在内的详细数据明显缺失和不完整。这迫切要求对ART质量控制的更敏感有效的评估方法。该研究通过计算囊胚内细胞总数、内细胞团(ICM)和滋养层(TE)差异细胞数来评估荧光法MEA的可靠性。该方法改进了传统的MEA,为评估胚胎发育能力提供了一个敏感而有力的平台,应建议作为一种标准化的方法,用于ART医疗器械和临床前程序的质量控制予以推广。(本文来源于《中国医疗器械杂志》期刊2018年04期）
熊彦娥,刘晓柳,胡琪[4]（2017）在《Caspase-8在维甲酸致小鼠囊胚细胞凋亡中的作用》一文中研究指出目的探讨半胱氨酸一天冬氨酸蛋白酶(Caspase)家族中的Caspase-8对维甲酸致小鼠囊胚细胞凋亡的影响。方法小鼠囊胚随机分为空白组、低浓度组(1μmol/l RA)和高浓度组(10μmol/l RA),分别于M199培养基中培养24h。用免疫组化S-P法观察囊胚细胞中Caspase-8蛋白表达。结果高浓度维甲酸可显着诱导囊胚细胞凋亡,上调囊胚细胞中Caspase-8蛋白表达水平。结论维甲酸对胚胎的致畸效应可能与其诱导细胞过度凋亡有关。(本文来源于《世界最新医学信息文摘》期刊2017年95期）
王坤,燕海峰,曲湘勇,何俊,王庆桥[5]（2016）在《鸡囊胚细胞冷冻损伤的评价方法》一文中研究指出采用滤纸环法分离鸡囊胚细胞(blastodermal cells,BCs),冷冻复苏后使用二乙酰荧光素(fluorescein diacetate,FDA)测定细胞活率,以及培养24h测定细胞贴壁率简称"贴壁率法",探究2种方法在不同冷冻程序优化试验中对细胞冷冻损伤的评价效果。结果显示,FDA染色法与贴壁率法在冷冻保护剂浓度优化、冷冻及解冻速率优化试验中对细胞冷冻损伤的评价结果差异不显着(P>0.05),相关性很好,但也有一定差异;不同冷冻剂浓度优化试验中,5%DMSO冷冻保护液有细胞活率,但无贴壁现象;投入液氮温度对比试验中,-35℃以后,随着投入温度的降低,细胞活率略微升高,但贴壁率呈较明显的下降趋势。因此,2种方法均适合鸡BCs冷冻损伤评价,但贴壁率法能给出更多关于细胞状况的信息,评价结果更加真实可靠。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2016年06期）
王坤[6]（2016）在《黑凤鸡囊胚细胞冷冻及嵌合体制作方法的探索》一文中研究指出鸡囊胚细胞(Blastodermal Cells, BCs)是潜在的鸡胚胎干细胞,在禽类雌性遗传资源冷冻保存、转基因技术以及药物研究模型等方面具有广阔的应用前景。本文通过分析黑凤鸡囊胚细胞原代培养操作过程中离散程度、接种密度、离心损伤等对贴壁率的影响,建立了贴壁法的细胞活力评价标准,并与二乙酰荧光素(Fluorescein diacetate, FDA)染色测活率法相结合。研究了黑凤鸡囊胚细胞冷冻操作过程中冷冻保护剂浓度、冷冻和解冻速率以及抗氧化剂等因素对冷冻效果的影响,从而建立了较为系统的黑凤鸡囊胚细胞冷冻保存技术。同时,本研究对鸡囊胚细胞嵌合体制作技术中的封口方式、气室恢复、孵化过程中翻蛋角度及相对湿度、注射剂量等进行了优化,建立了一套高效率、高孵化率的种蛋嵌合体制作技术。研究结果如下：1、建立了囊胚细胞损伤的间接评价方法贴壁法：使用滤纸环法从鸡第X期胚胎中分离囊胚,机械吹打20下离散细胞,5590×g离心5 min去除杂质,然后将细胞悬液稀释成5×104个/mL的密度,用含10% FBS、青霉素和链霉素的高糖DMEM培养基重悬,接种到96孔板培进行无饲养层培养。培养24 h贴壁率可作为一个评价细胞状态的标准。荧光素染色法：将FDA工作液滴入细胞液中,FDA终浓度为1 ug/mL,混合均匀后置于37℃暗室染色3-5 min,制片后使用荧光显微镜观察,计数需在10 min中内完成。发绿色荧光的是活细胞,不发绿色荧光的是死细胞,死活细胞对比明显。2、建立了囊胚细胞高效率的冷冻方法使用胚胎程序冷冻仪及细管冷冻的方法对黑凤鸡囊胚细胞进行冷冻保存,冷冻保护剂DMSO的最佳浓度为20%(终浓度10%)；最佳的冷冻、解冻程序为：细管从5℃以-1℃.min-1的速率降温至-7℃,保持10 min,继续以同样速率降温至-35℃投入液氮保存。细管从液氮取出后,立即投入37℃水浴1-2 min解冻细胞,不仅可以获得较好的细胞活力,而且培养后可以获得较高的贴壁率。3、探讨了抗氧化剂对囊胚细胞冷冻保存作用在冷冻液中添加NAC (N-Acetyl-L-cysteine, NAC)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、番茄红素(lycopene, LP)对细胞冷冻,在活率上与未添加抗氧化剂组差异不显着(P>0.05),但培养24 h后贴壁率却有显着提高且差异显着(P<0.05)。对活率提高效果最好的是CAT(200 U/mL),对贴壁率提高效果最好的是LP(0.05mg/mL)。在NAC和CAT冷冻保护液的保存及使用上,发现5℃现配现用和-20℃冷冻2个月后使用效果没有差异。但5℃冷藏2个月后保护效果明显减弱。4、初步探讨了囊胚细胞嵌合体的制作方法采用先胶水后粉方法封口,封口后大头向上竖立放置组孵化率最高,达到68.8%；同时发现,开窗后种蛋的气室存在率与孵化率存在高度的正相关；开窗种蛋最佳孵化条件为,孵化过程中90。/2 h翻蛋,70%相对湿度,37.5℃恒温恒湿孵化；试验也发现开窗和注射操作会显着降低孵化率(P<0.01),同时,在胚下腔进行显微注射,随着注射量的增加孵化率显着降低(P<0.05),注射luLDMEM培养基得到的孵化率最高(48.4%),且极显着优于3uL、5μL、10uL组(P<0.01)。因此,本文从鸡囊胚细胞的体外培养、活力检测、冷冻保存以及囊胚细胞嵌合体制作技术等几个关键步骤进行研究,建立了一套系统高效的方法,为BCs在冷冻保存禽类遗传资源以及相关生物技术领域的研究奠定了基础。(本文来源于《湖南农业大学》期刊2016-06-01）
王坤,张佰忠,易康乐,蒋隽,王庆桥[7]（2016）在《不同冷冻速率对鸡囊胚细胞冷冻效果的影响》一文中研究指出为探究不同冷冻速率对鸡囊胚细胞冷冻效果的影响,使用胚胎冷冻仪分步冷冻,比较不同步骤中不同冷冻速率冷冻后,细胞二乙酸荧光素(FDA)染色活率(简称活率)和培养24 h后细胞贴壁率(简称贴壁率)。结果表明:第1步冷冻,-0.7℃/min组活率最高(0.846),但与-0.5℃和~1℃/min组差异不显着(P>0.05)。-1℃/min组贴壁率最高(59.1%),且与各组间差异均极显着(P<0.01)。第2步冷冻,投入液氮前不同温度,-75℃组活率最高(0.530),但与-35℃、-55℃组差异不显着(P>0.05);-35℃组贴壁率最高(36.6%),且与各组间差异极显着(P<0.01)。因此,鸡BCs使用胚胎冷冻仪进行分步冷冻,以-1℃/min的速率降温至-7℃保持10 min,继续以同样速率降温至-35℃投入液氮保存,解冻后不仅可以获得较好的活率,而且培养后可以获得较高的贴壁率。(本文来源于《中国畜牧杂志》期刊2016年09期）
熊彦娥,刘晓柳[8]（2016）在《小鼠囊胚细胞DNA损伤与维甲酸的诱导作用》一文中研究指出目的观察维甲酸(RA)对小鼠囊胚细胞DNA的损伤,进一步证实RA对囊胚细胞凋亡效应。方法获取妊娠3.5d小鼠囊胚,分别培养在含0、1μmol/l和10μmol/l的RA的M199培养基中24h,用单细胞凝胶电泳技术检测RA对体外培养小鼠囊胚细胞DNA的损伤。结果 RA可破坏囊胚细胞DNA的结构,诱导细胞凋亡,导致囊胚滋养层和内细胞群细胞减少。结论维生素A酸对小鼠胚胎的生长发育具有细胞毒性作用。(本文来源于《世界最新医学信息文摘》期刊2016年18期）
方晨,王霞,王伟,龚良超,刘学[9]（2015）在《麦穗鱼囊胚细胞的分离与冷冻保存》一文中研究指出为了探讨麦穗鱼囊胚细胞的分离方法及其较佳的冷冻保存条件,采用胰蛋白酶酶解法和低温冷冻保存技术对麦穗鱼囊胚细胞的分离和保存进行研究。结果显示,20℃微流水条件下,受精后120 min左右麦穗鱼胚胎发育达到囊胚期;25℃条件下,0.25%胰蛋白酶作用12~18 min,麦穗鱼囊胚细胞即可脱去胚胎膜,且所获的囊胚细胞存活率可达90%以上;10%DMSO+DMEM作为冷冻储存保护液,储存于-80℃超低温冰箱中8 d,囊胚细胞存活率保持在50%以上;储存于-196℃,8 d后囊胚细胞存活力可达70%以上,储存128 d后,细胞存活率仍可保持60%以上。表明25℃、0.25%胰蛋白酶作用是较好的麦穗鱼囊胚细胞卵膜去膜条件,10%DMSO+DMEM保护液、细管和液氮(-196℃)保存囊胚细胞128 d可保持其有60%以上的存活率。(本文来源于《广东农业科学》期刊2015年24期）
王坤,张佰忠,易康乐,蒋隽,王庆桥[10]（2015）在《鸡Ⅹ期囊胚细胞研究进展及其应用》一文中研究指出鸡Ⅹ期囊胚细胞(Blastodermal cells,BCs)作为潜在的胚胎干细胞,在胚胎发育动物模型、禽类转基因技术以及家禽种质资源冷冻保存等方面有广阔的应用前景。文章对鸡BCs的形态特征、体外培养、诱导分化、遗传修饰、冷冻保存、性别鉴定等体外操作方面的研究与应用进行了综述。(本文来源于《中国家禽》期刊2015年23期）
囊胚细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的建立一种基于囊胚细胞全基因组扩增(WGA)结合目的序列短片段Gap-PCR基因分型技术的α-地中海贫血东南亚型(SEA)缺失突变快速植入前遗传学诊断新方法。方法以多重置换扩增(MDA)WGA技术为基础,建立以管家基因GAPDH和β-actin为目的序列的WGA产物双重荧光PCR质检体系,以及突变和正常序列短片段Gap-PCR的α-地中海贫血SEA缺失基因分型体系,通过对不同细胞数SEA携带者淋巴细胞样本的检测进行灵敏度与准确性评价,对12例囊胚活检样本的检测进行应用评价。结果应用本研究建立的方法,不同淋巴细胞数样本的结果显示3细胞时即未出现等位基因脱扣,4细胞时目标模板的WGA产物量趋于稳定;10例WGA成功的囊胚活检样本的基因分型结果分别为--SEA/αα(5例)和αα/αα(5例),与验证基因型相符。结论本研究建立的方法为一个完整检测流程,即以4～6个囊胚活检细胞为检材,对MDA产物进行WGA质检及相对浓度评估后,以短片段Gap-PCR体系而实现α-地贫SEA缺失的PGD快速基因分型;此方法简单快速、结果准确、检测成本低而适合临床常规应用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
囊胚细胞论文参考文献
[1].屈平平,李涛,田文儒.热应激对小鼠早期囊胚细胞骨架的影响[J].黑龙江畜牧兽医.2019
[2].徐惠玲,刘彦慧,晏平,何怡,秦佳纯.囊胚细胞WGA结合短片段Gap-PCR的α-地贫SEA突变快速植入前遗传学诊断[J].南方医科大学学报.2018
[3].韩倩倩,赵军招,杨昭鹏,史建峰,王迎.囊胚细胞计数法评价辅助生殖用医疗器械临床前安全性[J].中国医疗器械杂志.2018
[4].熊彦娥,刘晓柳,胡琪.Caspase-8在维甲酸致小鼠囊胚细胞凋亡中的作用[J].世界最新医学信息文摘.2017
[5].王坤,燕海峰,曲湘勇,何俊,王庆桥.鸡囊胚细胞冷冻损伤的评价方法[J].中国兽医学报.2016
[6].王坤.黑凤鸡囊胚细胞冷冻及嵌合体制作方法的探索[D].湖南农业大学.2016
[7].王坤,张佰忠,易康乐,蒋隽,王庆桥.不同冷冻速率对鸡囊胚细胞冷冻效果的影响[J].中国畜牧杂志.2016
[8].熊彦娥,刘晓柳.小鼠囊胚细胞DNA损伤与维甲酸的诱导作用[J].世界最新医学信息文摘.2016
[9].方晨,王霞,王伟,龚良超,刘学.麦穗鱼囊胚细胞的分离与冷冻保存[J].广东农业科学.2015
[10].王坤,张佰忠,易康乐,蒋隽,王庆桥.鸡Ⅹ期囊胚细胞研究进展及其应用[J].中国家禽.2015
论文知识图
