温—压协同处理对仙人掌有孢汉逊酵母的致死机理

温—压协同处理对仙人掌有孢汉逊酵母的致死机理

论文摘要

酵母菌的生长繁殖是造成浆果类产品微生物腐败的主要因素。但由于细胞壁的保护作用,酵母菌对环境的抗逆性较强,难以完全致死。近年来新兴的超高压杀菌技术虽然对酵母菌具有较好的杀灭效果,但在粘度大的高糖溶液中,杀菌效果无法满足工业生产需求。一味地提高处理压力和保压时间,不仅提高了对设备的要求,还会增加能耗,不利于工业化推广。因此,本论文采用温-压协同处理的方式对仙人掌有孢汉逊酵母(Hanseniaspora opuntiae)进行灭活,筛选最佳杀菌工艺参数,从多角度探究温度和压力的作用机制,阐述温-压协同处理对酵母菌的致死机理。主要研究结果包括:(1)仙人掌有孢汉逊酵母的最适生长温度28℃;高温处理对仙人掌有孢汉逊酵母的压敏性无明显影响;选用300MPa/300s+55℃/120s的灭菌条件对菌悬液进行处理,可以将菌种完全致死(致死率>6 1g)。(2)处理温度升高,仙人掌有孢汉逊酵母细胞膜的通透性呈上升趋势,超高压处理对菌体细胞膜通透性的影响则更加显著,会造成细胞膜破裂或穿孔,进而直接导致菌体的死亡。温度和超高压处理均会显著提高菌体细胞膜的渗透性,导致细胞内的核酸及蛋白质大量外泄。电镜结果显示:高温会导致菌体的细胞器解体,超高压处理会破坏菌体的膜结构、造成细胞内物质泄漏。(3)高温处理会显著降低仙人掌有孢汉逊酵母胞内ATP酶的活力,而高压处理对ATP酶活性的影响相对较小。不同处理方式对菌体内蛋白质各类二级结构的含量会造成不同的影响。与温度处理相比,超高压处理对菌体DNA的破坏作用更加显著;超高压处理会明显降低菌体线粒体膜电位,温度处理对线粒体膜电位的影响不显著。(4)通过RNA-Seq技术,分析了仙人掌有孢汉逊酵母经过温度和超高压处理后差异基因的表达情况。灭活处理后,仙人掌有孢汉逊酵母的基因表达出现了不同程度的上调或下调,以应对环境的变化,其中最显著的影响在于与细胞膜有关的基因发生了显著的差异性表达。两种处理方式对于仙人掌有孢汉逊酵母的减数分裂和菌体自噬这两个生命过程均会产生显著的影响。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 主要符号表
  • 1 绪论
  •   1.1 非热杀菌技术
  •     1.1.1 非热杀菌技术简介
  •     1.1.2 非热杀菌技术分类
  •     1.1.3 非热杀菌技术发展及研究现状
  •   1.2 超高压杀菌技术
  •     1.2.1 超高压杀菌技术简介
  •     1.2.2 超高压杀菌技术研究现状
  •     1.2.3 超高压杀菌机理
  •     1.2.4 超高压杀菌的影响因素
  •     1.2.5 超高压杀菌技术在果蔬加工中的应用
  •   1.3 联合杀菌技术
  •     1.3.1 超高压与其它因子联合杀菌技术
  •     1.3.2 温-压联合杀菌技术
  •     1.3.3 温-压联合杀菌技术在果蔬加工中的应用
  •   1.4 非酿酒酵母
  •     1.4.1 酵母菌的生理特点
  •     1.4.2 非酿酒酵母简介
  •     1.4.3 非酿酒酵母对食品的影响
  •     1.4.4 酵母菌致死机理研究现状
  •   1.5 立题背景及研究意义
  •   1.6 主要研究内容
  • 2 仙人掌有孢汉逊酵母悬浮液制备及灭活条件筛选
  •   2.1 引言
  •   2.2 实验试剂与设备
  •     2.2.1 实验原料和试剂
  •     2.2.2 主要仪器和设备
  •   2.3 实验方法
  •     2.3.0 菌种的分离、纯化及鉴定
  •     2.3.1 菌种活化及菌悬浮液制备
  •     2.3.2 微生物计数方法
  •     2.3.3 菌种生长曲线测定
  •     2.3.4 热处理
  •     2.3.5 超高压处理
  •     2.3.6 温-压协同处理
  •   2.4 结果与讨论
  •     2.4.1 仙人掌有孢汉逊酵母生长曲线的测定
  •     2.4.2 热处理对仙人掌有孢汉逊酵母致死率的影响
  •     2.4.3 超高压处理对仙人掌有孢汉逊酵母致死率的影响
  •     2.4.4 温-压协同处理对仙人掌有孢汉逊酵母致死率的影响
  •   2.5 本章小结
  • 3 温-压协同处理对菌体形态及膜结构的影响
  •   3.1 引言
  •   3.2 实验试剂与设备
  •     3.2.1 实验原料和试剂
  •     3.2.2 主要仪器和设备
  •   3.3 实验方法
  •     3.3.1 菌体细胞膜通透性的测定
  •     3.3.2 菌体细胞膜渗透性的测定
  •     3.3.3 菌体超微结构的观察
  •   3.4 结果与讨论
  •     3.4.1 不同处理对仙人掌有孢汉逊酵母细胞膜通透性的影响
  •     3.4.2 不同处理对仙人掌有孢汉逊酵母细胞膜渗透性的影响
  •     3.4.3 不同处理对仙人掌有孢汉逊酵母超微结构的影响
  •   3.5 本章小结
  • 4 温-压协同处理对菌体胞内物质的影响
  •   4.1 引言
  •   4.2 实验试剂与设备
  •     4.2.1 实验原料和试剂
  •     4.2.2 主要仪器和设备
  •   4.3 实验方法
  •     4.3.1 胞内酶活力变化情况的测定
  •     4.3.2 胞内蛋白质变性情况的测定
  •     4.3.3 遗传物质变化情况的测定
  •     4.3.4 线粒体膜电位变化情况的测定
  •   4.4 结果与讨论
  •     4.4.1 不同处理对仙人掌有孢汉逊酵母胞内酶活力的影响
  •     4.4.2 不同处理对仙人掌有孢汉逊酵母胞内蛋白质的影响
  •     4.4.3 不同处理对仙人掌有孢汉逊酵母遗传物质的影响
  •     4.4.4 不同处理对仙人掌有孢汉逊酵母线粒体膜电位的影响
  •   4.5 本章小结
  • 5 仙人掌有孢汉逊酵母转录组学分析
  •   5.1 引言
  •   5.2 实验试剂与设备
  •   5.3 实验方法
  •     5.3.1 前处理
  •     5.3.2 Illumina Hi Seq测序
  •     5.3.3 生物信息分析
  •   5.4 结果与讨论
  •     5.4.1 测序数据质量评估
  •     5.4.2 RNA-Seq整体质量评估
  •     5.4.3 基因差异表达分析
  •     5.4.4 差异基因GO富集分析
  •     5.4.5 差异基因KEGG富集分析
  •   5.5 本章小结
  • 6 结论与展望
  •   6.1 主要结论
  •   6.2 展望
  • 参考文献
  • 个人简介
  • 导师简介
  • 致谢
  • 文章来源

    类型: 硕士论文

    作者: 吴傲

    导师: 孙爱东

    关键词: 酵母菌,温压协同处理,致死机理

    来源: 北京林业大学

    年度: 2019

    分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 生物学,轻工业手工业

    单位: 北京林业大学

    基金: 国家重点研发计划“食品非热加工新技术研究与装备开发”(课题编号:2016YFD0400302)

    分类号: TS201.3

    DOI: 10.26949/d.cnki.gblyu.2019.000590

    总页数: 64

    文件大小: 5549K

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