导读:本文包含了共表达疫苗论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:疫苗,基因,病毒,蛋白,细胞株,粒细胞,分枝。
共表达疫苗论文文献综述
江红[1]（2016）在《LRG47/Rv2031c共表达重组慢病毒载体疫苗的实验研究》一文中研究指出研究目的:构建LRG47/Rv2031c共表达重组慢病毒载体疫苗,使其能在巨噬细胞(MΦ)中特异性表达自噬诱导蛋白LRG47和结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis Mtb)持留状态下特异表达的免疫优势抗原Rv2031c。然后从分子、细胞水平探讨其杀伤Mtb的效果及相关机制。研究方法:1.采用PCR的方法扩增出Rv2031c编码基因和2031-LRG47基因片段,分别克隆入含巨噬细胞特异性启动子的慢病毒表达质粒pLenti-146-GFP中,构建重组慢病毒表达质粒pLenti-2031和pLenti-2031-LRG47,构建成功后采用限制性内切酶酶切和测序法进行鉴定。2.分别将重组慢病毒表达质粒pLenti,pLenti-146-GFP,pLenti-2031和pLenti-2031-LRG47与慢病毒包装质粒pMD2G,pSPAX2以一定比例共转染293T细胞,72h后收集相应的病毒颗粒,并用超滤离心管浓缩法浓缩所收集的病毒颗粒,获得重组慢病毒LV-Lenti,LV-Lenti-146-GFP,LV-Lenti-2031,LV-Lenti-2031-LRG47。然后通过流式细胞仪的方法检测LV-Lenti-146-GFP感染RAW264.7细胞后GFP阳性细胞的比例来获取所包装慢病毒的滴度,以确定后续研究中慢病毒感染的最适滴度。3.将重组慢病毒LV-Lenti-146-GFP感染RAW264.7细胞,分别于感染后的24h,48h,72h,96h在荧光显微镜下观察绿色荧光的表达情况,以选择重组慢病毒感染RAW264.7细胞的最佳时间点,用于后续研究。并在选择的最佳时间点通过荧光定量PCR和Western-blot的方法检测巨噬细胞内Rv2031c和LRG47的表达情况。4.采用上述重组慢病毒感染RAW264.7细胞,72h后以MOI=5:1的比例分别感染H37RV和H37RV-GFP,感染4h后洗去未被巨噬细胞吞噬的菌并以此为0h,采用流式细胞法检测0h时巨噬细胞吞噬H37Rv-GFP的水平,然后分别在H37RV感染后的不同时间点用0.1%SDS裂解细胞,稀释后涂于7H10固体平板,待菌落生长后计数,以检测重组慢病毒对巨噬细胞杀伤Mtb能力的影响。5.采用上述重组慢病毒感染RAW264.7细胞,72h后进行以下指标的检测,以探讨其对巨噬细胞影响的可能机制:(1)通过western-blot的方法检测细胞自噬相关蛋白lc3的表达情况,采用cyto-idautophagydetectionkit试剂盒检测各组细胞的自噬水平。(2)通过免疫荧光的方法在激光共聚焦显微镜下观察mtb与溶酶体的共定位情况。(3)采用流式细胞法检测巨噬细胞表面mhcii,cd80的表达水平。6.采用ova致敏balb/c小鼠,用于制备ova致敏淋巴细胞。采用上述重组慢病毒感染小鼠腹腔巨噬细胞,48小时后加入ova进行抗原荷载,72小时后加入ova致敏的小鼠脾淋巴细胞进行混合培养,然后分别于混合培养后不同时间检测淋巴细胞的增殖和活化水平,以探讨重组慢病毒对巨噬细胞抗原提呈能力的影响。研究结果:1.酶切和测序结果显示,重组慢病毒表达质粒plenti-2031和plenti-2031-lrg47构建成功。2.重组慢病毒lv-lenti,lv-lenti-146-gfp,lv-lenti-2031,lv-lenti-2031-lrg47包装成功,且通过检测滴度在1-2×107tu/ml以上,可用于后续的研究。重组慢病毒gfp表达时相的观察结果显示重组慢病毒感染raw264.7细胞的最佳时间点为72h。3.荧光定量pcr和western-blot的检测结果证实重组慢病毒携带的重组基因rv2031c和lrg47均可在raw264.7细胞中有效表达。4.流式细胞术检测荷菌量检测结果表明,重组慢病毒感染不会显着影响巨噬细胞对结核分枝杆菌的吞噬能力,但与对照组相比,lv-lenti-2031-lrg47可显着增强巨噬细胞对mtb的杀伤功能。5.与对照组相比,lv-lenti-2031-lrg47可以显着提高巨噬细胞的自噬水平,促进巨噬细胞内mtb与溶酶体的融合。6.与对照组相比,lv-lenti-2031-lrg47可以显着提高巨噬细胞表面mhcⅡ和cd80的表达水平。同时,混合细胞培养结果显示,lv-lenti-2031-lrg47感染可显着增强巨噬细胞活化淋巴细胞的能力。结论:1.本研究成功构建了lrg47/rv2031c重组慢病毒表达质粒,完成了慢病毒的包装与浓缩,实现了其在巨噬细胞中的有效表达。2.本研究证实lrg47/rv2031c重组慢病毒可以增强巨噬细胞对胞内mtb的杀伤能力。3.本研究证实LRG47/Rv2031c重组慢病毒可诱导巨噬细胞发生自噬,并提高巨噬细胞内含Mtb的吞噬体与溶酶体的融合。4.本研究证实LRG47/Rv2031c重组慢病毒可有效提高巨噬细胞的抗原提呈功能。(本文来源于《南昌大学》期刊2016-05-01）
齐亚灵,赵文杰,王伟群,杨广民,时阳[2]（2015）在《共表达pcIL-18/MAGE-1 DNA疫苗对JEG-3细胞HLA-G基因表达的影响》一文中研究指出目的观察共表达基因疫苗pc IL-18/MAGE-1对绒癌JEG-3细胞株HLA-G基因表达的影响,探究pc IL-18/MAGE-1抗肿瘤作用机制。方法应用构建的共表达pc IL-18/MAGE-1 DNA疫苗免疫小鼠,同时设阴性对照组和空白对照组,免疫后分别收集脾细胞,作用于靶细胞JEG-3,应用FCM检测小鼠T细胞亚群情况及NK细胞活性,MTT法检测肿瘤特异性CTL对靶细胞的杀伤率,RT-PCR法检测HLA-G基因表达情况。结果免疫组HLA-G基因表达降低,且对JEG-3细胞杀伤活性增加,与对照组比较,差异显着(P<0.05)。免疫组NK细胞活性及CD4+/CD8+、CD8+、CD4+值均高于对照组(P<0.05)。结论共表达基因疫苗pc IL-18/MAGE-1通过降低HLA-G基因的表达,进而增加NK细胞活性以及诱导肿瘤特异性CTL直接杀伤肿瘤细胞,发挥抗肿瘤作用。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2015年20期）
齐亚灵,钟南田,张彦慧,洪灯,崔志刚[3]（2015）在《IL-18/MAGE-1共表达基因疫苗抗肿瘤作用机制》一文中研究指出本实验应用构建的pcIL-18-MAGE-1基因疫苗免疫C57BL/6J小鼠,同时设空白对照组和阴性对照组,免疫后收集脾细胞作为效应细胞,分别作用于靶细胞即肝癌细胞株SMMC-7721、Hepal-6。应用FCM检测小鼠T细胞亚群情况及NK细胞活性,MTT法检测肿瘤特异性CTL对靶细胞的杀伤作用,RT-PCR检测HLA-G与KIR基因表达。结果表明,共表达pcIL-(本文来源于《中国解剖学会2015年年会论文文摘汇编》期刊2015-08-08）
许晗[4]（2015）在《共表达PCV2 Cap蛋白和免疫增强因子InvC重组腺病毒甚因工程疫苗的研究》一文中研究指出猪圆环病毒病(PCVDs)由猪圆环病毒2型(PCV2)引起,是当前对养猪业危害严重的传染性疾病。疫苗免疫接种是预防本病的主要手段,常用的疫苗有全病毒灭活疫苗,免疫效果较好,但存在病毒滴度较低、需要进行病毒浓缩、价格较高的问题。抗原滴度高、免疫效果好、使用更安全的PCV2疫苗研发是一个重要目的。腺病毒活载体疫苗具有制备相对简单、病毒滴度高、免疫刺激持久、效果确实等优点,在PCV2基因工程疫苗研究中受到关注。目前的重组病毒构建策略一般是将PCV2的衣壳蛋白(Cap)基因插入到病毒基因组中进行表达。假结核耶尔森菌侵袭素(Inv)是一种外膜蛋白,能够增强宿主细胞对抗原的摄取能力,提高疫苗免疫效果,蛋白的C端(InvC)在这一过程中发挥重要作用。本研究将PCV2的Cap基因和InvC基因在重组腺病毒共表达,构建一种同时表达目的抗原和免疫促进因子的重组腺病毒,进行动物免疫试验,对免疫效果进行评价,以期获得一种新型的PCV2腺病毒疫苗。本研究获得了以下结果:1.构建了共表达PCV2 Cap基因和InvC基因的重组腺病毒。将PCV2的Cap基因和InvC基因依次嵌入重组腺病毒穿梭载体,转化入BJ5183感受态细胞进行同源重组,获得重组腺病毒骨架质粒pAd-Cap-InvC,转染HEK293细胞,包装出重组腺病毒rAd-Cap-InvC。经PCR、RT-PCR、Western blot、IFA检测,rAd-Cap-InvC遗传基因稳定分析,证明Cap-InvC融合蛋白能够在重组病毒中得到表达。滴度可达109.32 TCID50/mL。2.重组病毒的动物免疫试验显示,其能有效刺激机体产生特异性的抗体。以108TCID50/只的重组腺病毒rAd-Cap-InvC和rAd-Cap分别免疫接种PCV2抗体阴性昆明系小鼠,首免后14 d加强免疫一次(108TCID50/只)。首免后14、21、35、42 d分别测定试验鼠血清中PCV2抗体水平。结果发现,两种重组腺病毒免疫小鼠均产生了针对PCV2 Cap的抗体,其中rAd-Cap-InvC免疫组比rAd-Cap免疫组的抗体滴度要高,在整个检测时间段均显着差异(P<0.05)。以1010TCID50/只的重组腺病毒rAd-Cap-InvC,109TCID50/只的重组腺病毒rAd-Cap-InvC、rAd-Cap及rAd分别免疫接种试验猪2头,首免后14 d加强免疫一次(各组病毒剂量同首免)。首免后第14、21、28、36 d测定试验猪血清中PCV2抗体水平。结果发现,rAd-Cap-InvC组的抗体滴度在各检测时间点均要高于rAd-Cap组;1010TCID50/只的重组腺病毒rAd-Cap-InvC免疫组抗体滴度也高于109TCID50/只免疫组。动物免疫试验表明,重组腺病毒rAd-Cap-InvC和rAd-Cap均能使试验动物产生针对PCV2 Cap蛋白的特异性抗体,并且rAd-Cap-InvC能够产生更高的抗体滴度。本研究构建了共表达PCV2 Cap蛋白和免疫增强因子InvC重组腺病毒,其能使试验动物产生更高水平的特异性的免疫抗体,由此可知InvC对抗体的产生具有促进作用。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2015-05-01）
齐亚灵,孟德欣,杨广民,周晓红,李艳君[5]（2014）在《pcIL-18-MAGE-1共表达基因疫苗对肝癌细胞株SMMC-7721、Hepal-6增殖的影响》一文中研究指出目的观察pc IL-18-MAGE-1共表达基因疫苗接种小鼠所引起的免疫应答情况以及对肝癌细胞株SMMC-7721、Hepal-6增殖抑制情况,探究pc IL-18-MAGE-1共表达基因疫苗抗肿瘤作用。方法用pc IL-18-MAGE-1基因疫苗免疫小鼠,同时设空白对照组和阴性对照组,免疫后收集脾细胞作为效应细胞,分别作用于靶细胞即肝癌细胞株SMMC-7721、Hepal-6。应用流式细胞仪(FCM)检测小鼠T细胞亚群情况及自然杀伤(NK)细胞活性,MTT法检测肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对靶细胞的杀伤作用。结果与对照组比较,共表达pc IL-18-MAGE-1基因疫苗对靶细胞均有明显的杀伤作用(P<0.01);对SMMC-7721细胞杀伤作用高于Hepal-6细胞(P<0.05)。免疫组CD4+、CD8+、CD4+/CD8+均高于阴性对照组(P<0.05)。结论 pc IL-18-MAGE-1共表达基因疫苗通过同时激活CD4+T细胞及CD8+T细胞、增加NK细胞活性及诱导肿瘤特异性CTL直接杀伤肿瘤细胞,发挥抗肿瘤作用。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2014年21期）
魏金钢,韩晓萍,刘英俊,兰芳菲,梁爱心[6]（2014）在《GM-CSF与生长抑素共表达基因疫苗的构建和鉴定》一文中研究指出以基因疫苗pVGS/2SS-asd为模板,采用分子生物学方法,分别获得目的片段粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和含有乙肝表面抗原S基因的生长抑素基因(SS)。以共表达质粒pIRES为载体,采用基因工程方法,将GM-CSF和SS基因片段分别克隆到载体的多克隆位点A和多克隆位点B上,构建共表达基因疫苗pIRES-GM-CSF/2SS,旨在同时表达GM-CSF和SS两种蛋白。获得表达质粒后,酶切和测序鉴定该共表达基因疫苗,结果显示,该共表达基因疫苗pIRES-GM-CSF/2SS构建成功,为该共表达基因疫苗的后续研究奠定了良好的基础。(本文来源于《江西农业大学学报》期刊2014年05期）
朱羿龙,李昌,杜寿文,任大勇,王茂鹏[7]（2014）在《共表达HIV-1 gag和gp145重组鸡痘病毒疫苗的构建、筛选及免疫原性研究》一文中研究指出研究背景:据中国卫生部公布的最新数据表明,目前在中国感染了艾滋病的患者约有86万人,已死亡的24万人,总感染人数在100万人左右。中国HIV感染者在亚洲已经位居第2位,在全球居第14位,而且艾滋病感染人数仍在持续的增加,尽管新药在不断地发展着,但由于HIV的高度变异性,使得高效抗逆转录病毒的疗法(HAART)经常无法达到理想的治疗效果,国内艾滋病的防控形势十分严峻。(本文来源于《第九届全国免疫学学术大会论文集》期刊2014-10-18）
Ren,J,Q,吴艳[8]（2014）在《共表达基因Ⅰ型猪繁殖与呼吸综合征病毒GP3和GP5蛋白DNA疫苗的构建及免疫活性测定》一文中研究指出猪繁殖与呼吸综合征病毒欧洲型(PRRSV基因Ⅰ型)最近在中国被发现。基因Ⅰ、Ⅱ型PRRSV毒株的共存对PRRSV诊断和管理造成严重的影响。现有疫苗不能保护猪完全免受PRRSV的感染,且存在可遗传的缺点。目前已研制出基因工程疫苗,包括DNA疫苗和活载体工程疫苗。本试验旨在通过对小鼠免疫基因Ⅰ型PRRSV GP3和GP5蛋白共表达的DNA疫苗,测定其增强免疫反应。为评价欧洲型PRRSV GP3和GP5蛋白的免疫原性,试验以基因Ⅰ型PRRSV LV株(GenBank登录号:M96262)为基础,构建pVAX1-EU-ORF3-ORF5、pVAX1-EU-ORF3、pVAX1-EU-ORF5 3个DNA疫苗,采用以壳聚糖基因纳米粒子形式转运的DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,为了增强免疫效果,以Quil A(Quillaja)为免疫佐剂;检测了免疫小鼠血清中的GP3和GP5特异性抗体、中和抗体和细胞因子(IL-2、IL-4、IL-10、IFNγ)及其他免疫参数,包括脾脏T淋巴细胞增殖反应和T淋巴细胞亚型。结果显示,基因Ⅰ型PRRSV的ORF3和ORF5蛋白诱导GP3和GP5特异性抗体,能中和病毒;加强免疫之后试验组IL-2、IL-4、IL-10和IFNγ的水平均显著高于对照组(P<0.05),且诱导CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞的产生。T淋巴细胞增殖试验结果显示,PRRSV LV株能刺激试验组小鼠T淋巴细胞的增殖。以Quil A为佐剂,基因Ⅰ型PRRSV GP3、GP5蛋白有良好的免疫原性和反应性。更重要的是,与免疫单独任何一个蛋白DNA疫苗的小鼠相比,免疫共表达GP3和GP5蛋白DNA疫苗的小鼠具有较好的PRRSV特异性中和抗体滴度和细胞介导的免疫反应。本试验结果表明小鼠共免疫GP3和GP5后诱导免疫反应效果较好。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2014年07期）
杨志刚[9]（2014）在《共表达禽（番鸭）呼肠孤病毒σB-σC-LTB蛋白亚单位疫苗载体的构建及免疫保护的研究》一文中研究指出番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus，ARV)，其属于呼肠孤病毒属(Reovirus genus)禽呼肠孤病毒(Avian reovirus)的一员，具备禽呼肠孤病毒的一般生物学特性。临床中，此病在夏季番鸭中发病频繁，个体发病时间在4日龄～45日龄之间，发病率在20%～90%之间，但死亡比率差异较大，在约10%～30%之间。与其他病源混合感染率较高，甚至达90%以上。感染耐过番鸭个体一般表现为生长迟缓，变成僵鸭，对番鸭养殖的发展造成严重危害。该病毒基因，S3基因(片段大小1104bp)和S1基因(片段大小为810bp)，分别编码该病毒的σB外衣壳蛋以及σC吸附蛋白。已有研究表明，这两种蛋白能够诱导机体产生特异性中和抗体，控制病毒的感染。因此，本实验选取σB基因和σC基因，及两者的串联基因σB-σC，同时将σB-σC基因与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位（LTB）串联，将以上四种蛋白原核表达，通过动物免疫试验，分析比较了四种蛋白的免疫效果。本研究以NCBI中公布的ARV序列为模板，设计了特异性的引物，利用RT-PCR方法从细胞培养ARV中扩增了ARV约为1100bp的σB基因和约为810bp的σC基因。将目的基因片段克隆到pMD18-T simple载体上，并进行酶切、PCR鉴定和序列测定，重组质粒命名为pMD18-T-σB和pMD18-T-σC。利用相同的酶切位点将σB和σC基因串联，构建了重组质粒pMD18-T-σB-σC。另外通过重迭延伸PCR的方法，将σB-σC基因与LTB串联，构建了重组质粒pMD18-T-σB-σC-LTB。将四个重组质粒经双酶切，回收目的基因片段，分别与经同样双酶切的大肠杆菌表达载体pET30b连接，转化感受态BL21，筛选阳性克隆，并进行酶切、PCR和测序鉴定，重组质粒命名为pET30b-σB，pET30b-σC，pET30b-σB-σC，pET30b-σB-σC-LTB。将以上四种阳性重组菌，经IPTG进行诱导表达，经SDS-PAGE分析表明σB蛋白，σC蛋白，σB-σC蛋白，σB-σC-LTB四种蛋白均获得了正确的表达，分子量分别约为42kD，35kD，78kD，90kD。将表达的蛋白进行Western blot分析可知，四种蛋白都能够与ARV的阳性血清产生特异性的结合。证明这几种蛋白具备了有良好的免疫原性。四种蛋白均以包涵体形式表达。对包涵体进行提取、纯化和复性。将复性后的蛋白免疫SPF雏鸡，观察四种蛋白免疫效果。分别于免疫前、初次免疫后第7d、14d、21d、28d、35d收集雏鸡血清，经间接ELISA试验检测血清抗体产生情况。结果表明，四种蛋白实验组与免疫组比较可知，在免疫后第7天，利用间接ELISA方法检测免疫后不同时间点雏鸡血清抗体的变化。结果表明，四种蛋白免疫组均在免疫后第7d就出现了血清抗体。加强免疫后，抗体水平逐渐升高，第35d时达到最高，与对照组PBS组相比均差异极显着（p＜0.01）。四种蛋白免疫组雏鸡产生的血清抗体情况比较可知σB-σC-LTB蛋白免疫组高于σB-σC蛋白组，高于蛋白σC组，高于σB蛋白组。这些结果表明，这些重组蛋白具有较好的免疫原性，均能刺激机体产生良好的抗体水平，为进一步的临床动物保护试验提供了基础。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2014-06-01）
史文艳[10]（2014）在《柔嫩艾美耳球虫EtMic2蛋白与鸡IL-18共表达核酸疫苗的研究》一文中研究指出鸡球虫病是一种危害严重的细胞内寄生虫病，对全世界的养鸡业造成了严重的经济损失。鸡球虫病的防治主要是依靠化学药物和活球虫疫苗的使用（Shirley et al.,2005），然而随着化学药物的使用，药物残留、抗药性虫株的产生以及人们对动物性食品药物残留的担心等诸多问题随即而生，而开发新的化学药物成本又高，同时弱毒球虫疫苗的应用因具有致病性、生产成本高、可能产生“返祖”的现象等弊端而影响养鸡业生产。随着生物技术的发展，新型疫苗的应用研究越来越深入。核酸疫苗具有可靠的安全性，较高的稳定性，便于生产和运输，生产成本低，能诱导机体产生高效的免疫应答等诸多优点。柔嫩艾美耳球虫微线体蛋白2（EtMic2）是由球虫顶复合器微线体分泌的多种蛋白质之一，已有研究表明，EtMic2蛋白在鸡球虫入侵时起着重要的作用（Kawazoe et al.,1992）。鸡IL-18（ChIL-18）是一种具有多向和多层次免疫调节功能的细胞因子，能刺激产生Th1细胞介导的细胞免疫和Th2细胞介导的体液免疫，在宿主防御、抑瘤抗瘤、抗变态反应等方面具有重要作用，是一种良好的免疫增强剂。本研究将柔嫩艾美耳球虫微线体蛋白2基因（EtMIC2）单独和与作为免疫增强剂的ChIL-18基因串联插入到pVAX1真核表达载体中构建DNA疫苗，并检测其对E. tenella攻虫的保护作用。试验具体分为以下几个部分：1. ChIL-18蛋白的表达纯化及多克隆抗体的制备将重组质粒pET-28a(+)-IL-18在大肠杆菌中进行原核表达，重组质粒经IPTG诱导验证表达后，进行大量表达并用Ni柱进行ChIL-18蛋白的纯化。将纯化后的ChIL-18蛋白叁次免疫BALB/c小鼠进行多克隆抗体的制备。通过间接ELISA方法测定抗ChIL-18抗体的效价后，将采取并分离的血清作为多克隆抗体使用。2.核酸疫苗重组质粒的构建与表达利用DNA重组技术，分别构建了核酸疫苗pVAX1-MIC2，pVAX1-IL-18和pVAX1-MIC2-IL-18。重组质粒经酶切鉴定正确后，为了验证其在体外的表达，将构建的各重组质粒转染293T细胞，并通过IFA和Western blot方法检测。为了验证其在体内的表达，将3种DNA疫苗注射到昆明小鼠体内，通过检测小鼠血清中EtMic2和ChIL-18特异性抗体的水平验证其在体内表达。3.重组核酸疫苗的免疫保护性试验设立pVAX1-MIC2，pVAX1-IL-18，pVAX1-MIC2-IL-18和pVAX1-MIC2混合pVAX1-IL-18四个免疫组进行免疫保护试验，同时设立pVAX1.0空质粒免疫组和感染非免疫和非感染非免疫对照组，每组20只雏鸡。分别将各重组核酸疫苗以100μg/只的剂量于7、14、21日龄叁次经腿部肌肉注射免疫雏鸡。28日龄时，除非感染非免疫组的鸡只外的全部雏鸡经口感染6000个新鲜的E. tenella孢子化卵囊，感染后一周宰杀全部的试验动物，一方面从增重、盲肠病变计分、卵囊排出量和抗球虫指数等指标进行统计，另一方面进行抗体水平检测、脾淋巴细胞检测和细胞因子水平检测等。通过两个方面对构建的DNA疫苗进行保护力大小的评价。结果表明，pVAX1-MIC2，pVAX1-MIC2-IL-18和pVAX1-MIC2混合pVAX1-IL-18免疫组均能增加体重，减轻鸡球虫感染后的盲肠病变和减少卵囊排出量，其中pVAX1-MIC2免疫组的ACI为153，pVAX1-MIC2混合pVAX1-IL-18免疫组的为156，而pVAX1-MIC2-IL-18免疫组的ACI可达171，可见pVAX1-MIC2-IL-18免疫组的保护效果略好。而从抗体水平、脾淋巴细胞和细胞因子水平等方面检测的结果同样表明pVAX1-MIC2-IL-18免疫组的免疫效果要优于其他各免疫组。(本文来源于《山东农业大学》期刊2014-05-04）
共表达疫苗论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的观察共表达基因疫苗pc IL-18/MAGE-1对绒癌JEG-3细胞株HLA-G基因表达的影响,探究pc IL-18/MAGE-1抗肿瘤作用机制。方法应用构建的共表达pc IL-18/MAGE-1 DNA疫苗免疫小鼠,同时设阴性对照组和空白对照组,免疫后分别收集脾细胞,作用于靶细胞JEG-3,应用FCM检测小鼠T细胞亚群情况及NK细胞活性,MTT法检测肿瘤特异性CTL对靶细胞的杀伤率,RT-PCR法检测HLA-G基因表达情况。结果免疫组HLA-G基因表达降低,且对JEG-3细胞杀伤活性增加,与对照组比较,差异显着(P<0.05)。免疫组NK细胞活性及CD4+/CD8+、CD8+、CD4+值均高于对照组(P<0.05)。结论共表达基因疫苗pc IL-18/MAGE-1通过降低HLA-G基因的表达,进而增加NK细胞活性以及诱导肿瘤特异性CTL直接杀伤肿瘤细胞,发挥抗肿瘤作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
共表达疫苗论文参考文献
[1].江红.LRG47/Rv2031c共表达重组慢病毒载体疫苗的实验研究[D].南昌大学.2016
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