环介导等温扩增法快速检测牛羊肉中的掺杂肉

环介导等温扩增法快速检测牛羊肉中的掺杂肉

论文摘要

面对肉制品掺假突发事件频发的现状,对动物源性成分快检方法需求迫切。在等温扩增方法基础上,开展了肉制品掺假鉴定方法研究。以猪、鸡、鸭线粒体细胞色素b基因为目的序列,采用软件Primer Explorer Version5,通过序列比对设计并筛选环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)的特异性扩增引物。通过反应体系优化建立猪、鸡、鸭源性成分的环介导等温扩增技术分析方法,对常见9种动物源性成分进行特异性分析,检出限达到0.001 ng/μL,高浓度牛、羊DNA不影响方法检出限。通过分析模板脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid, DNA)浓度与反应循环数的关系,建立牛羊肉产品中,阈值为1%的猪、鸡、鸭掺杂成分的LAMP快速检测方法,分析时间36 min。采用该方法对深加工模拟掺杂肉样本分析结果与现行国家标准方法结果一致。研究可为肉制品原材料、市售生鲜肉及加工肉制品的肉成分快速筛查提供解决途径。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 LAMP引物的设计与合成
  •   1.4 DNA模板的提取
  •   1.5 LAMP反应
  •   1.6 荧光PCR检测 (quantitative real-time PCR, qPCR) 方法
  •   1.7 特异性试验
  •   1.8 模拟掺杂样品检出限
  •   1.9 牛羊肉掺杂肉LAMP检测方法建立
  •     1.9.1 1%掺杂样本快速检测方法建立
  •     1.9.2 不同加工方式产品的适用性
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 引物的设计和优化
  •   2.2 特异性试验
  •   2.3 模拟掺杂样品检出限
  •   2.4 牛羊肉掺杂肉LAMP检测方法建立
  •     2.4.1 掺杂1%样品的检验参数确定
  •     2.4.2 各类加工产品模拟掺杂样品分析结果
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 于媛媛,曲勤凤,张奕南

    关键词: 环介导等温扩增,牛羊肉,掺杂肉,动物源性成分

    来源: 食品工业 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 上海市质量监督检验技术研究院

    基金: 上海市科学技术委员会科研计划项目《高通量测序用于食品中动物源性成分DNA检测共性技术研究》,项目编号16DZ0501700

    分类号: TS251.7

    页码: 325-330

    总页数: 6

    文件大小: 2765K

    下载量: 120

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