梁倩[1]2004年在《羊栖菜多糖对肿瘤细胞HL-60和lovo诱导凋亡作用的研究》文中研究表明研究背景 羊栖菜是具有悠久历史的药用植物，在全藻中分离出的羊栖菜多糖(Sargassum fusiforme polysaccharides，SFPS)主要含有褐藻胶、羊栖菜多糖硫酸酯(FCD)、褐藻淀粉等，SFPS是羊栖菜水提物的主要成分。FCD的糖基组成主要是岩藻糖，此外还有木糖、甘露糖和半乳糖。FCD的分子量段为42000和95000，SFPS经分离还可得到分子量段为3500～10000的组分，该组分在生物细胞膜间的穿透能力强。 现代药理研究表明，羊栖菜多糖具有抗肿瘤作用，还有增强免疫、抗脂质过氧化等作用。SFPS能清除荷瘤小鼠体内的自由基、抗脂质过氧化，明显促进红细胞免疫，使荷瘤小鼠生存时间显着延长。此外对小鼠艾氏腹水癌(EAC)、小鼠肉瘤、小鼠网状组织细胞白血病也有抑制作用。 细胞凋亡疗法已经成为肿瘤治疗学研究的热点，许多抗肿瘤药物是通过启动凋亡(apoptosis)机制完成的。目前国内外对中药及其有效成分诱导肿瘤细胞凋亡的研究方兴未艾。中药多糖抗肿瘤作用的研究引起了国内外的广泛关注，国内外研究者对多糖诱导肿瘤细胞的凋亡作用进行了初步的探索，发现中药多糖可通过抑制DNA拓扑异构酶的活性，上调Bax，Fas，FasL等蛋白的表达，降低HL-60细胞的末端转移酶的活性，激活JNK-1通路，诱导免疫细胞产生TNFα和IFNγ浙江人学硕卜学位论文2004等多种途径诱导肿瘤细胞凋亡。 但关于SFPS对肿瘤细胞凋亡的影响，鲜见报道，而对人体肿瘤细胞凋亡的研究，更未见报道。研究目的本实验选择早幼粒白血病细胞系HL一60细胞和人大肠癌lovo细胞，作为S即S抗肿瘤的研究对象，探讨羊栖菜多糖(S FPS)诱导HL一60细胞和tovo细胞凋亡及其抗肿瘤机理，为开发传统中药羊栖菜提供理论基础。研究方法(1) MTT法观察SFPS的体外抗HL60细胞和lovo细胞增殖作用; (27) DNA琼脂糖凝胶电泳检测DNA ladder;(3)扫描电镜、透射电镜观察HL一60细胞和lovo细胞形态学变化:(4)流式细胞仪检测HL一60细胞和10vo细胞凋亡。研究结果MTT结果发现，SFPS对HL一60细胞和lovo细胞具有显着的生长抑制作用，并呈时效和量效关系。药物作用于HL一60细胞后24，36，48和72h的IC50分别为390，362，402和421mg/L，而lovo细胞对应于以上时lbJ点的IC，。分别为375，355，178，60 mg/L。琼脂糖凝胶电泳显示，sm留L和som留L sFPS处理HL一60细胞后，无DNA梯形条带(DNA ladder)出现，而lovo细胞产生典型的oNA ladder;300mg/L SFPs作用24h后，两种细胞均产生典型的DNA ladder，呈180一20obp整数倍递增;SFPS浓度为500m留L时，HL一60细胞和lovo细胞产生的DNA ladde:模糊，开始出现“涂片状”(smear)，lovo细胞的DNA ladder比HL一60细胞清晰;随着药物浓度增高达1000m留L时，HL一60细胞和lovo细胞的DNA ladder完全消失，呈“涂片状”。细胞形态学观察发现，经30Om留L sFPS处理72h后，HL6O细胞和fovo细胞微绒毛减少、染色质固缩、边集，形成“帽状”或“新月状”结构，凋亡小体形成。流式细胞术结果显示，HL一60细胞经浓度大于SOm留L的sFPs处理后，DNA直方图出现亚G;峰;在一定浓度范围内，SFPS诱导细胞凋亡的作用呈现浓度和时间依赖性，同时GZ/M期的细胞比例有不同程度的增高，相应的GO/GI期细胞比例降低。而lovo细胞经sm岁L，50m岁L，300担岁L，500m岁L sFPs处理12h后，出现明显的亚Gl峰，但细胞周期比例无明显改变。 研究结论(1) SFPS是一种有效的抗肿瘤药物，其抗肿瘤作用与诱导细胞凋亡有关。SFPS对HL一60细胞的抗肿瘤作用还与GZ/M期细胞阻滞有关，对lovo浙江人学硕1:学位论文2004细胞的抗肿瘤作用与细胞周期无关。(2)SFPS对不同组织来源的细胞具有不同的作用强度，对不同细胞的细胞周期的影响是不同的。(3)SFPS对同一种细胞的抗肿瘤效果和浓度、时间有关，依浓度不同而呈现不同的生物学效应。
严璘璘[2]2006年在《羊栖菜多糖诱导人大肠癌细胞凋亡的实验研究》文中提出研究背景 羊栖菜是北太平洋西部特有的暖温带性海藻,具有较高的营养和药用价值。早在我国《神农本草经》中,羊栖菜的药用功能就有所记载,而现代医学研究也表明,羊栖菜及其提取物中有多种抗肿瘤和改善人体免疫的活性成分。鉴于近年来我国结肠癌的高发生率和可行抗肿瘤疗法的效果不甚理想,该疾病的预防和治疗成为公共健康的首要任务,积极开发研制新药是当务之急,而中药因为毒副作用低等特点引起了人们的广泛关注。 近年来,关于羊栖菜水提物的抗肿瘤作用的研究已有报道,并证实具有一定的抑瘤作用。羊栖菜多糖(Sargassum fusiforme polysaccharides, SFPS)作为羊栖菜水提物的主要成分,主要含有褐藻酸、羊栖菜多糖硫酸酯(FCD)、褐藻淀粉,其分子量在3500-10000之间,在生物体细胞膜间的穿透能力强。作为一种海藻多糖,具有调节免疫功能,提高细胞免疫力,促进淋巴细胞的转化,在体内间接激活巨噬细胞的吞噬功能,具有抗肿瘤作用,抗感染作用以及降血脂等作用。以往对SFPS的研究多以动物作为研究对象,围绕其免疫促进功能和对荷瘤动物体内自由基、脂质过氧化的影响展开的。对于体外诱导人大肠癌细胞凋亡及其相关分子机制的研究,迄今鲜见报道。该研究对于开发有价值的抗肿瘤天然药物,贡献于人类的卫生健康事业具有重要的意义。 研究目的 本实验选择人大肠癌细胞系lovo细胞和RKO细胞,作为羊栖菜多糖
参考文献：
[1]. 羊栖菜多糖对肿瘤细胞HL-60和lovo诱导凋亡作用的研究[D]. 梁倩. 浙江大学. 2004
[2]. 羊栖菜多糖诱导人大肠癌细胞凋亡的实验研究[D]. 严璘璘. 浙江大学. 2006