导读:本文包含了血流剪切力论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:内皮,血管,细胞,多普勒,超声,白质,粥样。
血流剪切力论文文献综述
王艳霞[1]（2019）在《运动引起的血流剪切力信号调控内皮细胞功能的体外研究》一文中研究指出运动是无创性心血管疾病预防的重要手段,它能够引起血流剪切力幅值和频率的改变,并且这种改变与运动强度相关。位于血管壁最内层的内皮细胞能够识别不同的血流剪切力信号,并将该机械力信号传递到细胞内部,从而引起一氧化氮(nitric oxide,NO)和活性氧类(reactive oxygen species,ROS)等血管活性物质分泌量的改变,这些活性物质与血管内皮细胞功能以及血管稳态密切相关。尽管大量在体研究表明血流剪切力在运动调节内皮功能中起关键作用,但是不同强度运动所引起的剪切力信号对血管内皮功能的调控规律及其力学生物学机制尚未阐明。鉴于体外系统能够有效模拟动脉内剪切力环境且适用于监测细胞生物学响应,本论文以运动前后人体颈总动脉处的血流剪切力波形为依据构建运动剪切力体外模拟系统,研究不同强度运动诱发的剪切力对于血管内皮细胞中NO和ROS水平的影响以及相关的力学生物学机制,为合理运动强度的选择以及心血管疾病的预防提供一定的可能性。主要研究内容和成果如下:(1)基于实测数据与血流动力学建模方法,获取了不同强度运动前后颈总动脉处的血流剪切力波形及其特征。利用彩色超声多普勒仪及电子血压计分别测量了静息、中等强度(55%最大心率)和高等强度(75%最大心率)运动后1 1名受试者颈总动脉处的轴心流速和管径波形以及肱动脉处的心率和血压;基于上述所测得的血流动力学参量,分别利用刚性管和弹性管模型计算得到了静息、中等和高等强度运动后的剪切力波形。研究结果不仅证实了动脉管壁的弹性形变在血流剪切力波形计算中的必要性,而且表明随着运动强度的增加,剪切力的幅值和频率同时增加。(2)构建了矩形和非矩形平行平板流动腔系统,在体外模拟运动前后颈总动脉处具有前后双向振荡特征的脉动流剪切力波形。依据运动前后基于弹性管模型所获得的颈总动脉处剪切力波形,发展了能产生双向振荡流动现象的五元件集中参数血流动力学模型;然后通过数值拟合确定了该模型中各元件的参数值;最后根据各元件的参数值,选用能够模拟顺应性、流体惯性以及流体阻力的元件,搭建了能有效模拟中等和高等强度运动前后颈总动脉处血流剪切力波形关键特征的多元件平行平板流动腔系统。系统中的关键部分平行平板流动腔分为矩形和非矩形两种结构。矩形流动腔底部可以产生大小均一的剪切力波形,利于后续进行特定幅值和频率剪切力刺激后细胞蛋白的收集;而非矩形流动腔底部可产生一定幅值范围的剪切力波形,便于同时进行不同幅值、相同频率剪切力波形作用下细胞响应的研究,有效地提高了实验效率。(3)阐明了不同强度运动剪切力作用下细胞内NO和ROS的响应规律及其相互作用。基于本论文所构建的非矩形流动腔系统,研究了叁种幅值(低、中、高)或/和叁种频率(1.3 Hz、1.8 Hz、2.5 Hz)两两组合的剪切力波形作用下内皮细胞中NO和ROS的动态响应及其相互作用。实验结果表明,单独剪切力幅值或频率的增大均能够引起细胞内NO和ROS水平的增高;当剪切力幅值和频率同时增大时,细胞内ROS的水平持续升高,而NO则在1.8 Hz、中等幅值剪切力(中等强度运动)作用下水平最高,随着剪切力幅值和频率的继续增大(高等强度运动)其水平反而降低。实验结果同时表明,中等强度运动剪切力所引起的适量ROS的生成有助于NO的生成,而高等强度运动所引起的更高水平的ROS产生则能够在一定程度上降低细胞内NO的生成。(4)揭示了自噬在不同强度运动剪切力作用下细胞内NO和ROS生成中的关键作用。为了进一步明确内皮细胞中NO和ROS生成的力学生物学机制,基于本论文所构建的多元件矩形流动腔系统,研究了自噬在一氧化氮合酶(endothelial NO synthase,eNOS)磷酸化以及NO和ROS生成中的作用。在运用Western Blot法对自噬相关蛋白进行检测并运用mRFP-EGFP-LC3质粒对自噬体的形成和降解进行示踪后发现,静息、中等和高等强度运动剪切力作用下的自噬水平、eNOS Ser1177位点的磷酸化水平和NO生成水平的变化趋势基本一致,均表现出在中等强度运动剪切力作用下其表达或生成水平最高。在运用自噬的抑制剂氯喹进行预处理以后,细胞内eNOS Ser1177的磷酸化水平和NO的量均出现了显着性降低,而在运用自噬的激活剂雷帕霉素进行预处理后,eNOS Ser1177的磷酸化水平和NO的量均出现了显着性增加,表明自噬能够通过eNOS Ser1177的磷酸化上调不同强度运动剪切力作用下NO的生成。另外,在运用自噬的抑制剂或激活剂分别对细胞进行预处理后发现ROS的水平出现了显着性升高或降低,表明自噬能够抑制不同强度运动剪切力作用下细胞内ROS的生成。综上,本论文构建的多元件矩形和非矩形平行平板流动腔系统能够为研究不同强度运动剪切力作用下的细胞响应及机制提供可靠有效的实验平台;本论文不仅从细胞力学生物学角度揭示了中等和高等强度运动对血管内皮细胞功能的影响,而且为选择合理的运动强度以预防和改善心血管疾病提供了一种可能性。(本文来源于《大连理工大学》期刊2019-06-06）
张华巍[2]（2018）在《血流剪切力调控内皮细胞外泌体分泌进而调控冠状动脉平滑肌细胞增殖和迁移》一文中研究指出研究背景:大部分粥样斑块好发的位置在血管分叉、弯曲以及狭窄等血流稍慢的地方。研究表明,由于剪切力高低的不同,造成的结果也不一样,大部分平直的血管,受到的是高剪切力刺激,也就是我们俗称的高剪切力,近期研究结论认为高剪切力具有抗动脉粥样硬化形成的作用。而在血管分叉,弯曲等位置,容易产生涡流,以致血流方向不均一,速度受到影响,与之前位置相比明显降低的剪切力(剪切力0± 4 dyne/cm2),这一剪切力与之前数据相比,也称之为低剪切力,一定程度上促进了动脉粥样硬化斑块的形成与发展。外泌体,主要是由细胞内部囊泡运输体组成。它的形成主要通过细胞外泌囊泡,囊泡直径一般在30-l00nm之间,外泌体最重要的功能是可以装载细胞的各种成分,同时可以选择性地传递至靶细胞,继而引起靶细胞的改变。其中,Exosomes区别于其他信号通路的最大特点能在细胞间直接摄取,并能有效的转运包括miRNA在内的核酸序列。目的:为了初步探索Exosomes是否参与致A S的机制中,并探讨血流剪切力对于外泌体分泌是否有影响。方法通过新生儿脐带提取HUVECs并培养,对于培养的上述细胞给予不同时间剪切力的干预并通过超速离心法分离外泌体。采用BCA法测量总的蛋白含量以及外泌体蛋白含量,同时通过免疫印迹法测量获得的外泌体的表型蛋白。实验结果1.外泌体表型蛋白western blot鉴定本实验对离心所得exosomes进行western blot方法检测TSG101,CD63表达情况,以细胞蛋白作为阳性对照,测量外泌体表型蛋白。2.低剪切力对HUVECs外泌体蛋白浓度的影响低剪切力刺激后外泌体数量随着时间的延长有着明显的改变,在24小时蛋白浓度达到了高峰,与对照组相比有着明显的差异。3.低剪切力对HUVECs外泌体蛋白/细胞蛋白浓度的影响给予不同时间的剪切力刺激后,刺激时间越长,外泌体分泌的数量越多,也证实了低剪切力下,外泌体的分泌与刺激时间成正相关。结论1.通过原始HUVECs细胞可以培养外泌体,同时应用超速离心法能有效的分离HUVECs 颗粒,提取 exosomes。2.内皮细胞中外泌体表达受剪切力调控:低剪切力刺激时间越长,外泌体分泌的数量越多。研究背景近年来随着对其研究的深入,外泌体这一特定基因携带体逐渐被人们认识。外泌体(Exosomes)是如何起作用的,它主要通过细胞外泌囊泡形成,囊泡直径一般在30-1OOnm之间,外泌体最重要的功能是可以装载细胞的各种成分,同时可以选择性地传递至靶细胞,继而引起靶细胞出现改变。目的外泌体主要起一个传递信号的作用,具体的影响作用还要靠其中携带的不同的miRNA的作用。而血流剪切力能否增强携带miRNA的作用。同时通过低剪切力的刺激使哪种miRNA引起改变呢。本研究通过培养的内皮细胞给予低剪切力刺激,通过免疫荧光法观察能否引起外泌体内所含基因的改变。实验方法通过新生儿脐带提取HUVECs并培养,对于培养的上述细胞给予不同时间剪切力的干预并通过超速离心法分离外泌体。对于不同组的外泌体细胞提取总的RNA,目的是通过荧光定量方式显示miRNA表达是否存在不同。结果与静止对照组相比,低剪切力刺激组明显上调miRNA-145,miRNA-143等基因的表达,而其它相关基因与静止组相比上调变化不大,(P<0.05)。结论1.外泌体主要是通过其携带的微小基因来进行信号传导,进而在细胞层面调控细胞的迁移与增殖。2.受剪切力的影响,在剪切力刺激后外泌体中携带的miRNAs表达差异相差较大。研究背景动物实验的冠脉血管内超声研究表明,大部分易损斑块容易发生的位置在哪,一般来说发生在低ESS的血管段。并且,基线上低ESS的程度严重影响了斑块进展。之前的研究中观察了体外作用下低剪切力引起内皮细胞外泌体分泌增加,同时改变了外泌体中所含的信号转导机制。目的本部分研究通过体外研究方式将提取的低剪切力刺激后的外泌体与静止状态下的外泌体分别转染冠状动脉平滑肌细胞,观察其对冠状动脉平滑肌细胞的作用,通过免疫荧光法及蛋白印迹法证实能否引起冠状动脉平滑肌细胞的增值与迁移。实验方法在外泌体与动脉平滑肌内皮细胞一起孵育后,为观察能否有效,通过荧光共聚焦显微镜观察hCASMCs摄取外泌体的效果,并通过MTT方法检测hCASMCs增值水平,Transwell实验检测hCASMCs迁移水平以及western blot检测hCASMCs相关表型蛋白实验结果1荧光共聚焦显微镜观察hCASMCs摄取外泌体荧光共聚焦显微镜可以观察到动脉平滑肌细胞能有效摄取外泌体。2 Transwell实验检测hCASMCs迁移水平与空白对照组相比,经过摄取低剪切力处理组的外泌体后,冠状动脉平滑肌细胞的迁移能力明显增加,与静止组摄取的外泌体相比,迁移能力得到明显提升,两组之间存在统计学差异,同样,酶标仪检测迁移细胞吸光度值也反映同样的结果(P<0.05)。3.低剪切力处理后HUVECs分泌的外泌体对hCASMCs增殖能力的影响与空白对照组相比,通过酶标仪检测迁移细胞吸光度值,经过摄取低剪切力处理组的外泌体后,冠状动脉平滑肌细胞的增值能力明显增加,与静止组摄取的外泌体相比,增值能力得到明显提升,两组之间存在统计学差异。(P<0.05)。4低剪切力处理后HUVECs分泌的外泌体对hCASMCs表型转换的影响叁组之间通过蛋白印迹法测量处理后的冠状动脉平滑肌细胞的表型蛋白,可见通过低剪切力处理的外泌体被摄取后,冠状动脉平滑肌内皮细胞对于Osteopontin,Epiregulin,Elasti几类蛋白与对照组和空白组相比有差异,a-SMA,Caldesmon,Calponin差异不大。结论1.将低剪切力处理组和对照组外泌体使用PKH67标记,与hCASMCs共孵育24小时。荧光共聚焦显微镜证实hCASMCs确实能够摄取外泌体。2.对比空白对照组(不加外泌体)、对照处理HUVECs分泌的外泌体刺激以及低剪切力处理HUVECs分泌的外泌体刺激,低剪切力处理的外泌体对于hCASMCs迁移能力较其他两组有了明显提高。3.低剪切力处理后HUVECs分泌的外泌体对hCASMCs增殖能力,对比空白对照组(不加外泌体)、对照处理HUVECs分泌的外泌体刺激,增殖能力有了明显提高。4.低剪切力处理的外泌体对于hCASMCs增生以及蛋白表型的变化较其他两组没有显着差异。研究背景通过前面的研究我们发现低剪切力可以刺激原始内皮细胞产生较多的外泌体。通过分泌的外泌体与平滑肌细胞的孵育培养,观察到平滑肌细胞可以充分的摄取外泌体,继而引起下一步的信号转导。而外泌体仅仅是作为一种直接转运RNA的载体,其可以转运多种小分子RNA,从而引起不同细胞之间的不同作用。不同的RNA在信号转导过程中起的作用是不一样的,到底是哪个基因在信号转导中起了主要作用,必须将其单独给予增强来证实这一点。目的单独将miRNA-145作为单独研究对象,并通过与其抑制剂及阴性对照组进行比较,观察该基因是否能增强细胞的增值与迁移,继而可以明确是否通过该基因的调控来促进平滑肌细胞的迁移与增殖。从而最终获取低剪切力是通过调节何种基因来改变平滑肌细胞的性能的。实验方法通过购买的合成的miR-145的mimic,inhibitor,和negative。对外泌体细胞进行转染,根据酶标仪测量转染的效率,同时通过转染的外泌体被内皮细胞摄取后,测量hCASMCs迁移能力,增殖水平以及外泌体对hCASMCs表型转换的影响。实验结果1转染效率的验证含miRNA-145,miRNA-145抑制剂以及阴性对照剂的不同组经过多代细胞培养后。含miRNA-145转染效果明显高于另外2组,与另外两组相比之间存在统计学差异。(P<0.05)。2 MTT法检测外泌体对hCASMCs增殖水平的影响采用MTT方法检测通过冠状动脉平滑肌细胞摄取含有不同miRNA的外泌体后,细胞增值能力的改变,通过酶标仪检测迁移细胞吸光度值,含miRNA-145外泌体的被内皮细胞摄取后,冠状动脉平滑肌细胞的增殖能力明显增加,与另外两组相比之间存在统计学差异。(P<0.05)。3.各组外泌体对hCASMCs迁移能力的影响与加入抑制剂的对照组及阴性试剂的对照组相比,经过摄取含miRNA-145组的外泌体后,冠状动脉平滑肌细胞的迁移能力得到明显提升,叁组之间存在统计学差异,(P<0.05)。4 Western blot检测外泌体对hCASMCs表型转换的影响叁组之间通过蛋白印迹法测量处理后的冠状动脉平滑肌细胞的表型蛋白,可见含有miRNA-145的外泌体被摄取后,冠状动脉平滑肌内皮细胞对于a-SMA,Caldesmon,Calponin,Osteopontin,Epiregulin,Elasti 几类表型蛋白与对照组和空白组相比有明显差异。结论1.在外泌体含有的基因中,miRNA-145对细胞增殖作用以及迁移能力是明显提高的。2.抑制了 miRNA-145后,其他基因对于平滑肌内皮细胞的增殖作用以及迁移能力没有太大影响。3.低剪切力是通过调节HUVECs分泌的外泌体中特定miRNA对冠状动脉平滑肌细胞增殖、迁移和表型转换产生作用。(本文来源于《中国人民解放军医学院》期刊2018-05-23）
谢祖龙,房炎,王学懂,田进伟,杜华安[3]（2018）在《血流剪切力对支架内新生动脉粥样硬化形成的影响》一文中研究指出目的:探讨血流剪切力对支架内新生粥样硬化斑块形成的影响。方法:在6只新西兰白兔右髂动脉植入金属裸支架,术后高脂喂养8周。将支架按长度均等分为近中远3段,应用多普勒超声测量各支架段血管的血流速度和血管内径,根据Poiseuille定律计算出术后即刻及术后8周时各支架段的平均血流剪切力。应用光学相干断层成像技术(optical coherence tomography,OCT)检测术后8周支架内新生内膜的生长情况及特性。结果:成功建立支架内斑块动物模型。术后即刻近中远支架段的血流剪切力分别为4.25±0.92,2.49±1.07,1.67±0.49Pa(P<0.05);术后8周近中远支架段血流剪切力分别为20.40±6.07,11.09±1.74,7.97±0.26Pa(P<0.05),均较术后即刻明显升高(P<0.001);术后8周近中远支架段的内膜异质性发生率分别为86.67%,53.33%,41.12%(P<0.05);术后8周近中远支架段OCT检测的富含脂质斑块的发生率分别为53.3%,20%,0%(P<0.05)。结论:支架内新生粥样硬化斑块的发生可能与较高的血流剪切力相关。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2018年08期）
王明月,勇强[4]（2018）在《DSA、MRA、MS-CT及血流剪切力等影像学检查方法在评价颈动脉粥样硬化斑块形成及易损性的诊断价值》一文中研究指出动脉粥样硬化是动脉的一种增生性、退行性、非炎症性病变,导致血管壁增厚变硬而失去弹性,最先表现为颈动脉内中膜(IMT)的增厚,随后可形成粥样硬化斑块,随着斑块体积的增大,可导致颈动脉管腔狭窄及斑块的破裂,进而引起高死亡率、高致残率、高复发率的脑卒中的发生。目前直接评价颈动脉粥样硬化的方法包括:磁共振血管造影(MRA),多层螺旋CT成像(MS-CT),数字减影血管造影(DSA),超声造影(CEUS)、叁维超声(3DUS)等,而其他检查颈动脉粥样硬化及斑块稳定性的方法包括速度向量成像技术(VVI)、剪切力测定等。目前,DSA被认为是评估颈动脉狭窄程度与闭塞的"金标准",可以对介入治疗的过程加以指导并评估预后情况;剪切力测定是二维灰阶超声的一个重要发展,它不仅可以通过观察不同情况下的颈动脉血流动力学指标的改变,来预测颈动脉粥样硬化疾病的发生及颈动脉斑块破裂风险,同时还具有无放射性、无创性、操作简单方便、重复性好及成像快捷等优点,有望成为预测脑卒中发生的重要参考指标。(本文来源于《血管与腔内血管外科杂志》期刊2018年02期）
王艳霞,刘海斌,刘波,元文学,刘书田[5]（2017）在《运动对动脉内皮功能的调控及血流剪切力的介导作用》一文中研究指出正常的动脉内皮功能在调节血管通透性、维持正常的凝血功能以及免疫、炎症反应中起重要作用,受损的内皮功能则可引起血管的重构以及血栓、动脉粥样硬化等疾病的发生和发展。合理的运动训练能够通过促进一氧化氮(nitric oxide,NO)、前列环素(prostacyclin,PGI2)等物质的分泌来维持和改善动脉内皮功能,并预防动脉粥样硬化的发生。而高强度运动训练则会导致氧化应激的发生并降低NO的生物活性,从而造成内皮功能障碍及心血管疾病的发生。大量研究表明,运动引起的血流剪切力幅度及形式的变化在上述血管生物学响应中起重要的介导作用。本文综述了运动训练对动脉内皮功能的调控作用、血流剪切力的介导作用以及相关分子生物学机制等方面的研究进展,为进一步深入研究运动调控内皮功能的血流动力学机制特别是血流剪切力的重要介导作用提供参考,同时也为通过监控血流剪切力等血流动力学参数以选择最佳运动方式提供一定的科学依据。(本文来源于《北京生物医学工程》期刊2017年06期）
郭宜竞,邱要颜,蔡维君[6]（2017）在《老年大鼠后肢高血流剪切力诱导的侧支血管生长及其与血管生成素-1表达的关系》一文中研究指出目的:检测老年大鼠后肢高血流剪切力诱导的侧支血管生长情况及其与血管生成素-1(Ang-1)表达的关系。方法:实验组取12只老年健康SD大鼠,左侧行股动静脉单纯分离,右侧行股动静脉吻合术,在1周与4周时间点分别处死6只大鼠,采用血管造影与共聚焦免疫荧光术分别观察侧支血管生长情况及Ang-1在血管处的表达情况,正常组3只大鼠用作正常对照组。结果:正常对照组的侧支血管生长与假手术侧无明显差异,但吻合侧的侧支血管生长明显增加,且4周组吻合侧的血管生长多于1周组。正常对照组的血管Ang-1表达与假手术组无明显差异,仅在血管外膜及部分中膜存在表达;1周组吻合侧的Ang-1不仅在原有表达区域明显表达增加,且在内皮细胞处也有所表达;4周组吻合侧Ang-1在血管各层均明显存在高表达。与假手术侧相比,吻合侧Ang-1表达增加,差异具有统计学意义;4周吻合侧的Ang-1荧光强度较1周吻合侧明显增加,其差异也具有统计学意义。结论:老年大鼠后肢高血流剪切力模型可以诱导侧支血管的生长,且与相应部位血管Ang-1表达的增长呈正相关。(本文来源于《解剖学杂志》期刊2017年02期）
徐志鸿,段春霞,曾志亮,吴良美,林哲宏[7]（2016）在《用彩色多普勒超声评价分析血流剪切力与脑卒中的关系》一文中研究指出目的探讨使用彩色多普勒超声波评价分析来研究血流剪切力与脑卒中的关系。方法选取2014年3月~2016年3月在我院接受治疗的116例脑卒中合并患有动脉粥样硬化的患者为研究对象,对所有患者均使用美国西门子公司生产的彩色多普勒诊断仪,观察所有患者血流动力情况以及斑块的发生情况。结果彩色多普勒诊断仪共查出425处斑块,且斑块大多属于混合回声斑块,且双侧斑块的数量明显高于单侧斑块;检测结果显示,发生在卒中侧的血流剪切力数值明显高于未发生在卒中侧的血流剪切力数值,两者相比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论血流剪切力与脑卒中的联系紧密,临床中可以使用彩色多普勒诊断仪来获取脑卒中合并动脉粥样硬化患者的血流动力信息,为该病患的治疗提供有利的参考。(本文来源于《心血管病防治知识(学术版)》期刊2016年08期）
柴守栋,顾承雄[8]（2016）在《血流剪切力对静脉桥血管再狭窄影响的研究进展》一文中研究指出大隐静脉因其易得、长度足够且较为匹配等特点是冠状动脉搭桥术中广泛使用的血管材料,然而静脉桥具有较高的再狭窄率,术后10年约50%的静脉桥血管发生狭窄或闭塞。造成静脉桥血管再狭窄的因素较多,如获取静脉血管时的操作损伤、缺血再灌注,早期血管内血栓形成,内膜细胞的增殖、血小板及白细胞的黏附及平滑肌细胞的增生等。静脉桥(本文来源于《心肺血管病杂志》期刊2016年06期）
陈金贺,安毅,李丹[9]（2016）在《支架术后血流剪切力在内皮细胞信号转导的研究进展》一文中研究指出支架置入后损伤血管内皮细胞,内皮细胞内皮化不完全,血小板聚集在内皮下胶原纤维上,从而引起血栓形成,导致支架内再狭窄。除内皮细胞损伤外,支架置入后改变了血管正常剪切力,剪切力的改变也是支架内再狭窄的一个重要因素。剪切力通过细胞表面受体及胞内信使把机械信号转化为化学信号,细胞因子分泌失衡,引起内皮细胞修复不完全及平滑肌细胞增殖、迁徙,从而引起内膜增生,导致支架内再狭窄。因此,如何使损伤内皮细胞快速修复及剪切力趋于正常成为支架研究需要克服的难题。(本文来源于《医学综述》期刊2016年10期）
孙晓林[10]（2016）在《高龄老人血流剪切力与脑白质病变及认知功能障碍的相关性》一文中研究指出背景:高龄老人是指年龄等于或大于80岁的老人的总称。当今社会,随着经济的迅猛发展、国民的生活水平逐渐提高,我国国民饮食结构较之前有较大的不同,更多的含有甘油叁酯、胆固醇等的食物被摄入,医疗保障体系逐步完善使人民享受到的医疗服务水平较之前有极大的改善,人口预期寿命逐渐增长,另有计划生育基本国策的有力实施,由此带来的人口老龄化成为我国亟需面对和解决的问题。流行病学调查发现,一些与年龄关系密切的疾病,如动脉硬化、高血压、痴呆等,在高龄老人中的患病率逐渐增高。血管壁剪切应力(Wall shear stress,WSS)是指血液在血管内流动时血液对血管内皮细胞产生的单位面积上的摩擦力。颈动脉低WSS与一系列危险因素相关,比如年龄、高血压、高血脂和胰岛素抵抗等。颈动脉内膜中层厚度(Intima-media thickness,IMT)可反映冠状动脉、脑动脉、外周动脉的硬化程度,可作为监测全身动脉粥样硬化程度的指标。已经有流行病学研究表明,WSS均值和WSS峰值随着年龄的增长逐渐降低,而在高龄老人中,脑白质疏松的发病率较其他年龄段人群的发病率都高,我们由此猜测在高龄老人中,颈动脉低WSS和脑白质病变(Brain white matter lesions,WMLs)有一定的联系。已经有研究发现,脑白质病变的程度与认知功能下降的程度呈明显正相关,认知障碍不仅有临床症状,还有相应的病理变化,脑白质疏松正是其中最重要的一种。因此对这种现象的研究,并探讨其发展规律,为防治高龄老人的认知障碍及相关疾病,应对即将到来的人口老龄化有非常重要的意义。目的:探讨高龄老人颈动脉剪切力与脑白质病变和认知功能障碍的关系。方法:采用超声测量362例高龄老人的颈动脉血管内径及血流速度,并用公式计算出WSS均值(Mean wall shear stress,mWSS)和WSS峰值(Peak wall shear stress,pWSS),根据mWSS叁分位将受试者分为叁组,分别为低mWSS叁分位组、中mWSS叁分位组、高mWSS叁分位组,根据pWSS叁分位将受试者分为叁组,分别为低pWSS叁分位组、中pWSS叁分位组、高pWSS叁分位组。用问卷调查的方法调查所有受试者的性别,年龄,烟酒史,受教育程度,高血压、糖尿病、高血脂等病史,测量身高、体重、收缩压(Systolic blood pressure,SBP)、舒张压(Diastolic blood pressure,DBP)、最大颈动脉内膜中层厚度(Carotid arteries intima-media thickness(CCA-IMT)、简易精神状态检查测量表(Mini-Mental State Examination,MMSE)分数、WSS,检测总胆固醇(Total cholesterol,TCHO)、甘油叁酯(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoproteincholesterol,hdl-c)、低密度脂蛋白胆固醇(lowdensitylipoproteincholesterol,ldl-c)、空腹血糖(fastingplasmaglucose,fpg)等生化指标,并根据公式计算脑白质病变(brainwhitematterlesions,wmh)和wmh百分比。结果:1.根据mwss叁分位分组组间脑白质病变、mmse分数和最大cca-imt比1)低mwss叁分位组、中mwss叁分位组、高mwss叁分位组的wmh分别为11.29±2.99,8.64±3.03,6.58±2.78ml,与低mwss叁分位组比较,中、高mwss叁分位组的wmh明显降低,差异有统计学意义(p<0.01);wmh百分数分别为0.80±0.21,0.62±0.22,0.46±0.20%,与低mwss叁分位组比较,中、高mwss叁分位组的wmh百分比明显降低,差异有统计学意义(p<0.01)。2)低mwss叁分位组、中mwss叁分位组和高mwss叁分位组的mmse分数分别为22.53±1.92、23.87±2.73和25.29±2.81。与低mwss叁分位组比较,中、高mwss叁分位组的mmse分数明显升高,差异有统计学意义(p<0.01)。3)低mwss叁分位组、中mwss叁分位组和高mwss叁分位组的最大cca-imt分别为1.58±0.32、1.44±0.30和1.34±0.25mm。与低mwss叁分位组比较,中、高mwss叁分位组的最大cca-imt明显降低,差异有统计学意义(p<0.01)。2.根据pwss叁分位分组组间脑白质病变、mmse分数和最大cca-imt比较1)低pwss叁分位组、中pwss叁分位组和高pwss叁分位组的wmh分别为11.46±3.14、8.46±2.84和6.60±2.66ml。与低pwss叁分位组比较,中、高pwss叁分位组的wmh明显降低,差异有统计学意义(p<0.01);低pwss叁分位组、中pwss叁分位组和高pwss叁分位组的wmh百分比分别为0.8±0.22、0.61±0.21和0.47±0.19%。与低pwss叁分位组比较,中、高pwss叁分位组的wmh百分比明显降低,差异有统计学意义(p<0.01)。2)低pwss叁分位组、中pwss叁分位组和高pwss叁分位组的mmse分数分别为22.86±2.53、23.79±2.47和25.04±2.83。与低pwss叁分位组比较,中、高pwss叁分位组的mmse分数明显升高,差异有统计学意义(p<0.01)。3)低pwss叁分位组、中pwss叁分位组和高pwss叁分位组的最大cca-imt分别为1.59±0.29、1.45±0.31和1.32±0.25mm。与低pwss叁分位组比较,中、高pwss叁分位组的最大cca-imt明显降低,差异有统计学意义(p<0.01)。3.wss与wmh、wmh百分比、mmse分数、最大cca-imt的相关分析1)wmh、wmh百分比、最大cca-imt分别与mwss呈明显负相关(r=-0.576,-0.576,-0.364,p<0.01),mmse分数与mwss呈明显正相关(r=0.440,p<0.01)。2)wmh、wmh百分比、最大cca-imt分别与pwss呈明显负相关(r=-0.576,-0.574,-0.326,p<0.01),mmse分数与pwss呈明显正相关(r=0.328,p<0.01)。4.最大cca-imt与wmh、wmh百分比、mmse分数的相关分析wmh、wmh百分比分别与最大cca-imt呈明显正相关(r=0.457,0.443,p<0.01),mmse分数与最大cca-imt呈明显负相关(r=-0.303,p<0.01)。5.wmh、wmh百分比与mmse分数的相关分析wmh与mmse分数呈显着负相关(r=-0.453,p<0.01);wmh百分比与mmse分数呈显着负相关(r=-0.461,p<0.01)。6.wmh、wmh百分比及mmse与其相关影响因素的多元线性回归分析1)以mwss、年龄、性别、受教育程度、吸烟史、饮酒史、血压、血脂、空腹糖耐量和最大cca-imt为自变量时以wmh为因变量,结果显示mwss(β=-0.439,t值=-10.243,p<0.01)、受教育程度(β=-0.134,t值=-3.376,p<0.01)、饮酒次数(β=0.084,t值=2.161,p=0.031)、sbp(β=0.141,t值=3.511,p<0.01)、tg(β=0.186,t值=4.591,p<0.01)和最大cca-imt(β=0.233,t值=5.076,p<0.01)是wmh的主要影响因素;以wmh百分比为因变量,结果显示mwss(β=-0.442,t值=-10.015,p<0.01)、受教育程度(β=-0.125,t值=-3.056,p<0.01)、饮酒次数(β=0.089,t值=2.227,p=0.027)、sbp(β=0.112,t值=2.707,p<0.01)、tg(β=0.152,t值=3.654,p<0.01)和最大cca-imt(β=0.232,t值=4.910,p<0.01)是wmh百分比的主要影响因素;以mmse分数为因变量,结果显示,mwss(β=0.329,t值=7.781,p<0.01)、受教育程度(β=0.534,t值=13.666,p<0.01)和高密度脂蛋白(β=0.078,t值=2.009,p=0.045)是mmse分数的主要影响因素。2)以pwss、年龄、性别、受教育程度、吸烟史、饮酒史、血压、血脂、空腹糖耐量和最大cca-imt为自变量时以wmh为因变量,结果显示pwss(β=-0.426,t值=-10.119,p<0.01)、受教育程度(β=-0.130,t值=-3.288,p<0.01)、sbp(β=0.121,t值=3.015,p<0.01)、tg(β=0.194,t值=4.804,p<0.01)和最大cca-imt(β=0.262,t值=5.817,p<0.01)是wmh的主要影响因素;以wmh百分比为因变量,结果显示pwss(β=-0.432,t值=-9.981,p<0.01)、受教育程度(β=-0.121,t值=-2.975,p<0.01)、sbp(β=0.092,t值=2.227,p=0.027)、TG(β=0.164,t值=3.948,P<0.01)和最大CCA-IMT(β=0.261,t值=5.625,P<0.01)是WMH百分比的主要影响因素;以MMSE分数为因变量,结果显示pWSS(β=0.207,t值=4.769,P<0.01)、受教育程度(β=0.533,t值=13.003,P<0.01)和最大CCA-IMT(β=-0.128,t值=-2.743,P<0.01)是MMSE分数的主要影响因素。结论:在高龄老人中,颈动脉剪切力与脑白质病变和认知障碍相关。(本文来源于《济南大学》期刊2016-05-01）
血流剪切力论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
研究背景:大部分粥样斑块好发的位置在血管分叉、弯曲以及狭窄等血流稍慢的地方。研究表明,由于剪切力高低的不同,造成的结果也不一样,大部分平直的血管,受到的是高剪切力刺激,也就是我们俗称的高剪切力,近期研究结论认为高剪切力具有抗动脉粥样硬化形成的作用。而在血管分叉,弯曲等位置,容易产生涡流,以致血流方向不均一,速度受到影响,与之前位置相比明显降低的剪切力(剪切力0± 4 dyne/cm2),这一剪切力与之前数据相比,也称之为低剪切力,一定程度上促进了动脉粥样硬化斑块的形成与发展。外泌体,主要是由细胞内部囊泡运输体组成。它的形成主要通过细胞外泌囊泡,囊泡直径一般在30-l00nm之间,外泌体最重要的功能是可以装载细胞的各种成分,同时可以选择性地传递至靶细胞,继而引起靶细胞的改变。其中,Exosomes区别于其他信号通路的最大特点能在细胞间直接摄取,并能有效的转运包括miRNA在内的核酸序列。目的:为了初步探索Exosomes是否参与致A S的机制中,并探讨血流剪切力对于外泌体分泌是否有影响。方法通过新生儿脐带提取HUVECs并培养,对于培养的上述细胞给予不同时间剪切力的干预并通过超速离心法分离外泌体。采用BCA法测量总的蛋白含量以及外泌体蛋白含量,同时通过免疫印迹法测量获得的外泌体的表型蛋白。实验结果1.外泌体表型蛋白western blot鉴定本实验对离心所得exosomes进行western blot方法检测TSG101,CD63表达情况,以细胞蛋白作为阳性对照,测量外泌体表型蛋白。2.低剪切力对HUVECs外泌体蛋白浓度的影响低剪切力刺激后外泌体数量随着时间的延长有着明显的改变,在24小时蛋白浓度达到了高峰,与对照组相比有着明显的差异。3.低剪切力对HUVECs外泌体蛋白/细胞蛋白浓度的影响给予不同时间的剪切力刺激后,刺激时间越长,外泌体分泌的数量越多,也证实了低剪切力下,外泌体的分泌与刺激时间成正相关。结论1.通过原始HUVECs细胞可以培养外泌体,同时应用超速离心法能有效的分离HUVECs 颗粒,提取 exosomes。2.内皮细胞中外泌体表达受剪切力调控:低剪切力刺激时间越长,外泌体分泌的数量越多。研究背景近年来随着对其研究的深入,外泌体这一特定基因携带体逐渐被人们认识。外泌体(Exosomes)是如何起作用的,它主要通过细胞外泌囊泡形成,囊泡直径一般在30-1OOnm之间,外泌体最重要的功能是可以装载细胞的各种成分,同时可以选择性地传递至靶细胞,继而引起靶细胞出现改变。目的外泌体主要起一个传递信号的作用,具体的影响作用还要靠其中携带的不同的miRNA的作用。而血流剪切力能否增强携带miRNA的作用。同时通过低剪切力的刺激使哪种miRNA引起改变呢。本研究通过培养的内皮细胞给予低剪切力刺激,通过免疫荧光法观察能否引起外泌体内所含基因的改变。实验方法通过新生儿脐带提取HUVECs并培养,对于培养的上述细胞给予不同时间剪切力的干预并通过超速离心法分离外泌体。对于不同组的外泌体细胞提取总的RNA,目的是通过荧光定量方式显示miRNA表达是否存在不同。结果与静止对照组相比,低剪切力刺激组明显上调miRNA-145,miRNA-143等基因的表达,而其它相关基因与静止组相比上调变化不大,(P<0.05)。结论1.外泌体主要是通过其携带的微小基因来进行信号传导,进而在细胞层面调控细胞的迁移与增殖。2.受剪切力的影响,在剪切力刺激后外泌体中携带的miRNAs表达差异相差较大。研究背景动物实验的冠脉血管内超声研究表明,大部分易损斑块容易发生的位置在哪,一般来说发生在低ESS的血管段。并且,基线上低ESS的程度严重影响了斑块进展。之前的研究中观察了体外作用下低剪切力引起内皮细胞外泌体分泌增加,同时改变了外泌体中所含的信号转导机制。目的本部分研究通过体外研究方式将提取的低剪切力刺激后的外泌体与静止状态下的外泌体分别转染冠状动脉平滑肌细胞,观察其对冠状动脉平滑肌细胞的作用,通过免疫荧光法及蛋白印迹法证实能否引起冠状动脉平滑肌细胞的增值与迁移。实验方法在外泌体与动脉平滑肌内皮细胞一起孵育后,为观察能否有效,通过荧光共聚焦显微镜观察hCASMCs摄取外泌体的效果,并通过MTT方法检测hCASMCs增值水平,Transwell实验检测hCASMCs迁移水平以及western blot检测hCASMCs相关表型蛋白实验结果1荧光共聚焦显微镜观察hCASMCs摄取外泌体荧光共聚焦显微镜可以观察到动脉平滑肌细胞能有效摄取外泌体。2 Transwell实验检测hCASMCs迁移水平与空白对照组相比,经过摄取低剪切力处理组的外泌体后,冠状动脉平滑肌细胞的迁移能力明显增加,与静止组摄取的外泌体相比,迁移能力得到明显提升,两组之间存在统计学差异,同样,酶标仪检测迁移细胞吸光度值也反映同样的结果(P<0.05)。3.低剪切力处理后HUVECs分泌的外泌体对hCASMCs增殖能力的影响与空白对照组相比,通过酶标仪检测迁移细胞吸光度值,经过摄取低剪切力处理组的外泌体后,冠状动脉平滑肌细胞的增值能力明显增加,与静止组摄取的外泌体相比,增值能力得到明显提升,两组之间存在统计学差异。(P<0.05)。4低剪切力处理后HUVECs分泌的外泌体对hCASMCs表型转换的影响叁组之间通过蛋白印迹法测量处理后的冠状动脉平滑肌细胞的表型蛋白,可见通过低剪切力处理的外泌体被摄取后,冠状动脉平滑肌内皮细胞对于Osteopontin,Epiregulin,Elasti几类蛋白与对照组和空白组相比有差异,a-SMA,Caldesmon,Calponin差异不大。结论1.将低剪切力处理组和对照组外泌体使用PKH67标记,与hCASMCs共孵育24小时。荧光共聚焦显微镜证实hCASMCs确实能够摄取外泌体。2.对比空白对照组(不加外泌体)、对照处理HUVECs分泌的外泌体刺激以及低剪切力处理HUVECs分泌的外泌体刺激,低剪切力处理的外泌体对于hCASMCs迁移能力较其他两组有了明显提高。3.低剪切力处理后HUVECs分泌的外泌体对hCASMCs增殖能力,对比空白对照组(不加外泌体)、对照处理HUVECs分泌的外泌体刺激,增殖能力有了明显提高。4.低剪切力处理的外泌体对于hCASMCs增生以及蛋白表型的变化较其他两组没有显着差异。研究背景通过前面的研究我们发现低剪切力可以刺激原始内皮细胞产生较多的外泌体。通过分泌的外泌体与平滑肌细胞的孵育培养,观察到平滑肌细胞可以充分的摄取外泌体,继而引起下一步的信号转导。而外泌体仅仅是作为一种直接转运RNA的载体,其可以转运多种小分子RNA,从而引起不同细胞之间的不同作用。不同的RNA在信号转导过程中起的作用是不一样的,到底是哪个基因在信号转导中起了主要作用,必须将其单独给予增强来证实这一点。目的单独将miRNA-145作为单独研究对象,并通过与其抑制剂及阴性对照组进行比较,观察该基因是否能增强细胞的增值与迁移,继而可以明确是否通过该基因的调控来促进平滑肌细胞的迁移与增殖。从而最终获取低剪切力是通过调节何种基因来改变平滑肌细胞的性能的。实验方法通过购买的合成的miR-145的mimic,inhibitor,和negative。对外泌体细胞进行转染,根据酶标仪测量转染的效率,同时通过转染的外泌体被内皮细胞摄取后,测量hCASMCs迁移能力,增殖水平以及外泌体对hCASMCs表型转换的影响。实验结果1转染效率的验证含miRNA-145,miRNA-145抑制剂以及阴性对照剂的不同组经过多代细胞培养后。含miRNA-145转染效果明显高于另外2组,与另外两组相比之间存在统计学差异。(P<0.05)。2 MTT法检测外泌体对hCASMCs增殖水平的影响采用MTT方法检测通过冠状动脉平滑肌细胞摄取含有不同miRNA的外泌体后,细胞增值能力的改变,通过酶标仪检测迁移细胞吸光度值,含miRNA-145外泌体的被内皮细胞摄取后,冠状动脉平滑肌细胞的增殖能力明显增加,与另外两组相比之间存在统计学差异。(P<0.05)。3.各组外泌体对hCASMCs迁移能力的影响与加入抑制剂的对照组及阴性试剂的对照组相比,经过摄取含miRNA-145组的外泌体后,冠状动脉平滑肌细胞的迁移能力得到明显提升,叁组之间存在统计学差异,(P<0.05)。4 Western blot检测外泌体对hCASMCs表型转换的影响叁组之间通过蛋白印迹法测量处理后的冠状动脉平滑肌细胞的表型蛋白,可见含有miRNA-145的外泌体被摄取后,冠状动脉平滑肌内皮细胞对于a-SMA,Caldesmon,Calponin,Osteopontin,Epiregulin,Elasti 几类表型蛋白与对照组和空白组相比有明显差异。结论1.在外泌体含有的基因中,miRNA-145对细胞增殖作用以及迁移能力是明显提高的。2.抑制了 miRNA-145后,其他基因对于平滑肌内皮细胞的增殖作用以及迁移能力没有太大影响。3.低剪切力是通过调节HUVECs分泌的外泌体中特定miRNA对冠状动脉平滑肌细胞增殖、迁移和表型转换产生作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
血流剪切力论文参考文献
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