冻存脐带血中内皮祖细胞的分离培养及生物学特性鉴定

论文摘要

目的:建立和开发一种新型的从冻存脐带血中分离培养内皮祖细胞（EPC）的方法,探讨其生物学特性,提高冻存脐带血分离获得EPC的成功率。方法:自液氮罐中收集公共库中2000年至2001年保存的12例冻存脐带血,37℃水浴锅中快速复苏后,磷酸缓冲盐溶液（PBS缓冲液）洗涤,获得总有核细胞（TNCs）,将TNCs接种至培养皿中诱导扩增EPC。使用流式细胞术和免疫荧光方法鉴定EPC并确定纯度。采用下列方法体外鉴定内皮祖细胞的功能:荧光显微镜观察细胞特异性摄取Dil-Ac-LDL和FITC-UEA-I的功能、在基质胶中形成毛细管样结构的情况,ELISA法检测释放VEGF因子的功能。结果:培养3周后,出现1-5个鹅卵石铺路石样内皮祖细胞集落。体外培养第1-3代EPC,其表面CD31、CD34、CD144和VEGFR （CD309）标记阳性率分别为（92. 91±5. 20）%、（30. 0±23. 27）%、（88. 55±3. 83）%和（67. 21±12. 12）%。EPC细胞具有特异性内吞Dil-Ac-LDL和FITCUEA-I、形成毛细管结构,释放低浓度VEGF因子等功能。结论:采用本方法从冻存脐带血中分离EPC的稳定性与重复性高,从冻存的脐带血中分离EPC的成功率可提高至85%。该方法为临床应用丰富的内皮祖细胞奠定了基础。

论文目录

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 付亚茹,孙阳阳,王洪星,刘小盾,曲廷瑜

关键词: 冻存脐带血,内皮祖细胞,细胞分离,生物学特性鉴定

来源: 中国实验血液学杂志 2019年01期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 山东省齐鲁干细胞工程有限公司

分类号: R329.2

页码: 215-220

总页数: 6

文件大小: 1918K

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