导读:本文包含了锌指基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:基因,蛋白,转录,耐高温,条锈病,腺瘤,宫颈癌。
锌指基因论文文献综述
李雪,王凤涛,冯晶,庞云星,贾湘[1](2019)在《两个锌指转录因子基因在调控小麦条锈菌耐高温反应中的作用》一文中研究指出小麦条锈病是由条形柄锈菌小麦专化型(Puccinia striiformis f.sp.tritici Erikes,Pst)引起的气传真菌病害,它最适宜在冷凉潮湿的气候条件下发生和流行。中国是小麦条锈病最大且相对独立的流行区,大部分小麦种植区受到条锈病流行暴发的严重为害。在病害侵染循环及流行过程中,病原菌在越夏易变区(即秋季菌源基地)的越夏情况是决定冬季繁殖区初侵染菌源数量的关键环节。近年来全球气候变暖,然而我国条锈菌越夏海拔下限逐年下降,越夏和越冬地区范围进一步扩大。同时,世界其他条锈病流行地区也出现了耐高温型菌株。Pst耐高温胁迫能力增强给未来小麦条锈病流行学研究以及制定相应的防控策略产生深远影响,并带来新的挑战。锌指转录因子在调控病原真菌生长发育、抗逆反应以及致病性中发挥重要作用。本研究利用实时荧光定量PCR技术对两个锌指转录因子基因(PSTG_11249,PSTG_06705)进行表达谱分析,并利用BSMV Agro/LIC寄主诱导的基因沉默(HIGS)技术体系验证候选基因在Pst耐高温胁迫反应中的作用。结果显示,C_3HC_4型锌指转录因子基因PSTG_11249在耐高温型菌株A4中受高温(21℃)处理诱导表达,当该基因被沉默后,高温条件下接种并潜育培养的高感条锈病品种Local Red幼苗叶片单位面积夏孢子堆密度显着低于对照处理组,能显着降低高温培养条件下Pst耐高温型菌株的发病严重度(P<0.05),说明PSTG_11249基因正调控Pst应答高温胁迫过程。对于属于Zn_2-Cys_6型双锌指结构转录因子基因PSTG_06705,高温条件下接种并潜育培养能抑制该基因在耐高温型菌株中表达,当沉默了耐高温型菌株A4基因PSTG_06705后,导致在高温条件下接种并潜育培养的高感病品种Local Red幼苗叶片单位面积平均夏孢子堆密度显着高于对照处理,显着增加了高温条件下Pst耐高温型菌株A4的发病严重度(P<0.05)。说明PSTG_06705对Pst耐高温胁迫起负调控作用。本研究结果对明确锌指转录因子在Pst耐高温反应中的调控作用,以及揭示小麦条锈菌适应高温胁迫的调控机制具有重要意义。(本文来源于《中国植物保护学会2019年学术年会论文集》期刊2019-10-23)
邹晖,李海明,王伟英,林江波[2](2019)在《中国水仙NtCCHC锌指蛋白基因的克隆与原核表达》一文中研究指出【目的】利用建立的多效唑诱导中国水仙的SSH文库,克隆中国水仙NtCCHC锌指基因的cDNA序列,进行原核表达,为深入研究NtCCHC锌指基因在中国水仙中的功能奠定基础。【方法】采用Trizol法提取多效唑处理后的中国水仙叶片总RNA,反转录成cDNA后,根据已知的CCHC锌指蛋白基因序列设计引物进行基因克隆和同源性分析,并构建原核表达载体进行诱导表达。【结果】克隆一段810bp的cDNA编码区序列,编码269个氨基酸,同源性分析表明与多个物种的CCHC基因存在着较高的同源性,命名为NtCCHC。该基因能成功在pGEX-4T-3原核表达载体上实现诱导表达,系统进化树分析表明:NtCCHC与中国莲遗传距离最近。【结论】克隆了中国水仙NtCCHC基因序列,并成功诱导表达。(本文来源于《福建农业学报》期刊2019年08期)
黄幸,严爱芬,邓廷贤,欧阳宏佳,刘连[3](2019)在《锌指核酸酶介导的陆川猪Fat1基因打靶载体构建及体外转基因研究》一文中研究指出秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans) Fat1基因翻译产物是ω-3多不饱和脂肪酸脱氢酶,哺乳动物因为缺少这个基因,不能将ω-6多不饱和脂肪酸转化为ω-3多不饱和脂肪酸,因此只能通过饮食获得ω-3多不饱和脂肪酸,以保证ω-6/ω-3的平衡,满足机体的健康所需。为获得整合了Fat1基因且能稳定表达的转基因猪(Sus scrofa),本实验采用锌指核酸酶(zinc finger nuclease, ZFN)介导的多位点打靶技术从细胞水平上开展了转基因技术的研究。首先构建了陆川猪Fat1基因打靶载体pCAGGS-DS2-eGFP-Fat1-DS1,并设计和构建了两个靶向陆川猪r DNA基因中内转录间隔区1 (internal transcribed spacer-1, ITS-1)序列的锌指核酸酶真核表达载体pcDNA3.1-NLS-ZFN-R和pcDNA3.1-NLS-ZFN-L。然后从猪的肾脏中成功分离出原代成纤维细胞(primary kidney fibroblast, PKF),通过脂质体共转染将Fat1基因打靶载体和锌指核酸酶载体导入细胞,转染细胞7 d后,提取细胞基因组DNA,PCR检测外源基因整合情况,结果表明Fat1基因成功整合到陆川猪PKF细胞基因组中,本研究为进一步获得转基因猪提供了一定的理论依据。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2019年08期)
王静毅,刘菊华,贾彩红,胡伟,金志强[4](2019)在《香蕉C2H2类锌指蛋白基因MaZAT10的克隆及表达分析》一文中研究指出本研究利用RT-PCR技术从巴西蕉中克隆到1个C2H2型锌指蛋白转录因子,命名为MaZAT10。香蕉MaZAT10基因开放阅读框全长732 bp,编码243个氨基酸,预测蛋白分子量为25.257 3 kD,理论等电点为7.7。香蕉MaZAT10蛋白序列包含2个C2H2型锌指结构域,在其N-端含有与核定位有关的NLS即B-box和富含亮氨酸的L-box,C-端含有一个转录抑制结构域EAR/DLN-box。系统进化分析显示,MaZAT10与马来西亚野蕉(XP_009388925.1)、油棕(XP_008792675.1)、海枣(XP_010907391.1)及菠萝(OAY84607.1)亲缘关系较近。低温、干旱和高盐胁迫处理后MaZAT10的表达水平显着上调,但在ABA处理下,MaZAT10的表达水平显着下调。本研究表明,MaZAT10可能在香蕉响应低温、干旱、高盐等非生物胁迫中起重要作用。本研究结果将为今后研究香蕉C2H2型锌指蛋白转录因子家族基因功能提供参考,并为香蕉抗逆研究及分子育种提供科学依据。(本文来源于《分子植物育种》期刊2019年14期)
郑舒方,胡唯伟,杨勇,陈真[5](2019)在《多形性腺瘤基因锌指蛋白家族成员在肿瘤中的研究进展》一文中研究指出多形性腺瘤基因(PLAG)锌指蛋白家族主要作为核蛋白转录调节因子对机体多种重要基因表达发挥调控作用,家族成员包括多形性腺瘤基因1、多形性腺瘤基因L1和多形性腺瘤基因L2。近年来,对多形性腺瘤基因家族蛋白的结构,功能和作用机制等的研究都取得了较大进展,且发现该家族成员与多种肿瘤的发生发展密切相关。本文通过对多形性腺瘤基因家族蛋白成员的结构,转录机制及其对肿瘤调控的机制等方面的研究进展进行论述,为多形性腺瘤基因家族成员作为肿瘤治疗新靶点提供理论依据。(本文来源于《药学研究》期刊2019年07期)
石海燕,胡维维,张鑫,吕晋,杨秀媚[6](2019)在《锌指蛋白84基因促进宫颈癌细胞增殖的初步研究》一文中研究指出目的探讨锌指蛋白84基因(ZNF84)在宫颈病变组织中的表达及其对肿瘤细胞增殖的影响。方法收集某院2015年1月至2016年5月正常宫颈组织15例和宫颈癌组织45例,应用免疫组织化学法检测组织中ZNF84蛋白的表达;培养宫颈癌Hela细胞和C33a细胞,合成ZNF84 RNA干扰序列siZNF84,并将siZNF84转染宫颈癌细胞检测ZNF84基因的表达;CCK-8法检测siZNF84对宫颈癌细胞增殖的影响。结果 ZNF84在宫颈正常组织不表达,在宫颈癌组织的表达率为77.8%(35/45),差异有统计学意义(P<0.01)。ZNF84蛋白表达与肿瘤大小、HPV感染有关(P<0.01或0.05)。siZNF84显着下调了ZNF84的mRNA表达,抑制了宫颈癌Hela细胞和C33a细胞的体外增殖能力(P<0.05)。结论 ZNF84在宫颈癌组织中表达,与肿瘤大小、HPV感染有关,能够促进肿瘤细胞增殖,可能对宫颈癌的发生、发展有一定的影响。(本文来源于《广东医科大学学报》期刊2019年03期)
李宝钧,刘少贞,任有蛇,乔利英,刘建华[7](2019)在《绵羊CCCH型锌指蛋白基因ZC3H10的mRNA表达研究》一文中研究指出为探明ZC3H10基因在绵羊组织及前体脂肪细胞分化过程中的mRNA表达规律,利用转录组测序技术分析ZC3H10在绵羊肾周脂肪、皮下脂肪和尾部脂肪组织的表达模式。利用实时荧光定量PCR技术检测ZC3H10在成体绵羊脂肪组织以及心脏、肾、肝、肺、脾、小肠和肌肉(背最长肌)8种不同器官组织的mRNA表达水平,测定其在体外前体脂肪细胞分化0、2、4、6、8、10d的表达变化。结果显示:ZC3H10在绵羊3个脂肪组织部位均有高水平的mRNA表达,且与脂肪沉积相关基因FABP4和ADIPOQ有相似表达特征;ZC3H10在所检测的组织均有mRNA表达,其在前体脂肪细胞分化0 d的mRNA表达显着高于其他时间点,分化10 d的表达显着低于其他时间点。绵羊ZC3H10 mRNA高表达于脂肪组织,也表达于其他多种器官组织,且在前体脂肪细胞分化过程中呈表达下调趋势,可能在脂肪代谢和脂肪细胞分化中发挥重要作用。(本文来源于《中国畜牧杂志》期刊2019年09期)
陈存,高志宏,冯媛媛,伍勇,祁伟亮[8](2019)在《拟南芥中一个锌指蛋白AT 5 g 47610的基因克隆及表达分析》一文中研究指出逆境胁迫是植物正常生长发育与作物产量提高的重要限制因素,具有锌指结构的E 3泛素连接酶作为一个重要的蛋白家族,在植物逆境胁迫应激中起着重要的调控作用。本文从一个含有锌指结构的蛋白AT 5 g 47610出发,通过PCR对其基因进行克隆,然后连接到PET 32 a原核表达载体,37℃通过0.2 mM IPTG诱导出了目标蛋白,为后续的蛋白功能鉴定研究奠定了基础。(本文来源于《种子》期刊2019年04期)
吕天琦[9](2019)在《白菜C2H2型锌指蛋白基因家族的进化及DAZ3在转录水平调控花粉发育的研究》一文中研究指出花粉发育是被子植物生殖发育的重要环节,花粉的育性直接关系到植株能否进行授粉受精进而产生下一代,这对于十字花科蔬菜等农作物的产量及种子的品质至关重要。花粉的发育涉及到一系列复杂的基因调控过程,众多的转录因子在其中发挥着重要的调控功能。C2H2型锌指蛋白组成了最大的核酸结合类群,通过其锌指结构域能够与DNA、RNA或蛋白结合,进而参与到多样的生物过程。在花发育过程中,C2H2型锌指蛋白能够作为组蛋白甲基转移酶或去甲基化酶参与开花诱导过程,通过影响细胞增殖并受激素调控等多种形式作用于花器官模型特征基因的转录调控。然而,关于C2H2型锌指蛋白参与花发育后期的成熟过程尤其是花粉发育过程中的转录调控鲜有报道。对C2H2型锌指蛋白在花粉发育过程中的功能和转录调控研究,将为认识该家族基因在此领域中的调控机制提供新的知识,对于探究被子植物的生殖发育具有重要意义。本文以白菜(Brassicacampestris subsp.chinensis(syn.Brassicarapasubsp.chinensis))为材料,对白菜C2H2型锌指蛋白基因家族进行鉴定、进化和表达分析,为研究C2H2型锌指蛋白在花粉发育过程中的功能提供数据基础。随后重点对BrDAZ3的表达进行分析,并通过RNA干涉技术、CRISPR CAS9技术和过表达技术研究BrDAZ3在白菜花粉发育过程中的功能;并以模式植物拟南芥为材料,对BrDAZ3的拟南芥直系同源基因AtDAZ3的T-DNA插入突变体进行鉴定,分析AtDAZ3的突变对花粉发育的影响;使用农杆菌介导的浸花转化法对AtDAZ3基因突变的表型进行恢复,确认突变体的表型是由AtDAZ3单基因引起的;结合过表达技术,分析AtDAZ3在拟南芥花粉发育过程中的作用;并通过酵母单杂交、酵母双杂交、双分子荧光互补以及双荧光素酶实验分析DAZ3在花粉发育过程中的转录调控。取得的主要结果与结论如下:(1)对白菜C2H2型锌指蛋白基因家族进行鉴定,得到243个该家族基因。根据锌指结构域的数目,锌指间的间隔,以及是否含有QALGGH结构域,将白菜C2H2型锌指蛋白分为5种不同的类型;通过基因结构、蛋白结构域和进化树分析,将该基因家族分为1~X个亚族。值得关注的是,Ⅱ、Ⅳ和Ⅸ这叁个亚族的多数成员以及X亚族的两个成员,在其C端含有EAR抑制结构域。通过染色体定位、基因复制和共线性分析,发现白菜C2H2型锌指蛋白基因家族的扩张主要来源于片段重复和串联重复。通过计算直系和旁系同源基因之间的Ka,Ks和Ka/Ks值来分析复制后基因分化的选择类型和机制,结果显示,白菜的旁系同源是在与拟南芥基因组分离后经历全基因组叁倍化事件产生的,且白菜的C2H2型锌指蛋白与拟南芥的C2H2型锌指蛋白相比在进化的过程中有较低的选择压力和进化速率。此外对白菜C2H2型锌指蛋白基因在根、茎、叶、花和角果以及萼片、花瓣、雄蕊和雌蕊中的表达进行分析,筛选在雄蕊中特异或高表达的基因,并分析其在花粉母细胞时期、四分体时期、单核花粉时期、双核花粉时期和叁核花粉时期的表达,筛选出至少20个潜在的花粉发育相关的C2H2型锌指蛋白基因。并通过共表达网络分析,探究C2H2型锌指蛋白基因在花发育过程中的调控网络。(2)克隆得到BrDAZ3的CDS和基因全长,根据氨基酸序列推断其编码的是一个D类型的C2H2型锌指蛋白,且在C端含有两个EAR抑制结构域。分析BrDAZ3的时空表达模式,通过RT-PCR和qPCR检测其在各个组织和器官中的表达水平,发现BrDAZ3在雄蕊中特异高表达;检测其在不同花蕾发育时期的表达,发现BrDAZ3在单核小孢子时期开始表达,在随后的发育时期表达逐渐增加,直至叁核花粉时期表达最高,且能够在花粉管中持续表达,即BrDAZ3属于花粉发育过程中的“晚期”基因。通过亚细胞定位分析,发现BrDAZ3是定位在细胞质和细胞核的蛋白,表明其能够参与核蛋白的转录调控,同时也能够参与细胞质中重要的生化代谢活动。(3)利用RNA干涉、CRISPR CAS9技术和过表达技术分析BrDAZ3的功能,发现BrDAZ3表达的异常影响花粉壁和花粉管的发育。BrDAZ3的异常表达不影响营养生长,但导致约一半的花粉自单核时期开始细胞质发生异常降解,并在随后的发育过程中逐渐加剧,最终导致花粉粒皱缩坍塌,且无内壁的形成,同时异常的花粉粒自坍塌处外壁的基粒棒形状异常呈球形。BrDAZ3的异常表达还能够影响花粉管的体外萌发,BrDAZ3表达的下调导致约一半的花粉不能萌发,部分萌发的花粉形状异常,花粉的细胞质向外异常突出导致花粉粒被撑破而分为两瓣,且萌发的花粉管顶端卷曲;而BrDAZ3表达的上调则引起部分花粉管的顶端膨大呈泡状。这些异常的花粉在雌蕊中的萌发受阻,最终导致自交授粉后大部分胚珠不能受精,产生的角果变短,且部分没有种子,结籽率降低。(4)AtDAZ3具有与BrDAZ3相似的保守结构域和表达模式。AtDAZ3编码的也是一个D类型的C2H2型锌指蛋白。分析AtDAZ3的时空表达模式,结果显示,AtDAZ3在花中高表达,且在花发育的第11时期即单核花粉时期开始表达,随着发育历程表达逐渐增加,在第14时期的成熟花粉中表达最高,并持续在花粉管中表达,即与BrDAZ3的表达相似。分析AtDAZ3的亚细胞定位,发现其定位在细胞质和细胞核中。(5)突变体atdaz3的叶片变窄,花器官较小且花粉发育异常。对atdaz3的营养生长进行观察,发现叶片的长宽与野生型相比显着增加,且叶片的表皮细胞变大,靠近上表皮的栅栏组织细胞形状异常、细胞间隙变大,海绵组织的细胞排列紊乱。花器官的萼片、花瓣、雄蕊和雌蕊的宽度或长度均显着或极显着低于对照。AtDAZ3的突变导致花粉自单核时期细胞质开始降解,最终导致内壁无法形成,花粉粒皱缩坍塌,且自坍塌处外壁的基粒棒形状异常呈球形。突变体的花粉体内萌发受阻,导致自交授粉后大部分胚珠不能受精,结籽率降低。AtDAZ3能够完全恢复突变体atdaz3的表型。AtDAZ3表达的上调不影响营养生长和花器官的发育,产生的花粉部分自单核时期开始细胞质异常降解,最终形成皱缩坍塌的小孢子,但这种异常并不影响最终的结籽率。(6)BrDAZ3和AtDAZ3在花粉发育过程中具有相同的转录调控途径。BrDUO1a,而不是BrDUO1b能够直接激活BrDAZ3的转录;AtDUO1能够直接激活AtDAZ3的转录,其中DAZ3启动子上的MYB结合位点是转录激活必须的。BrDAZ3和AtDAZ3的C端的EAR抑制结构域能够与BrTPL/TPR和AtTPL/TPR的N端的CTLH结构域互作,彼此形成复合物。此外,在白菜和拟南芥中,DAZ3和TPL分别能够与HDA6和HDA19互作。检测参与花粉内壁、外壁和花粉管发育相关基因在atdaz3中的表达,结果显示一系列参与内壁物质合成、外壁孢粉素合成基因的表达异常,花粉管发育过程中细胞壁的形成和修饰、细胞信号传导和细胞转运等相关基因的表达发生变化;检测细胞增殖、细胞循环和细胞分裂相关基因在atdaz3中的表达也存在异常。因此得出的转录调控模型为,DAZ3能够被DUO1直接激活调控,DAZ3与TPL、HDA6和HDA19形成共抑制因子抑制下游基因的转录,从而参与花粉壁和花粉管的发育。(本文来源于《浙江大学》期刊2019-04-15)
张宁,左丽,肖谜,应江山[10](2019)在《E盒结合锌指蛋白2基因对卵巢癌细胞侵袭及迁移影响的实验研究》一文中研究指出目的探讨E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)在卵巢癌细胞侵袭及迁移中的作用及机制。方法将卵巢癌细胞SKOV3分为Control组、ZEB2 shRNA组、shRNA-NC组。ZEB2 shRNA组、shRNA-NC组分别转染ZEB2 shRNA和shRNA-NC,Control组不进行细胞转染。采用实时聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)法检测转染效果,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室检测细胞侵袭能力,Western blot法检测迁移和侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶2(MMP2)、波形蛋白(vimentin)的相对表达量。结果 ZEB2 shRNA组细胞ZEB2mRNA和蛋白相对表达量均低于shRNA-NC组和Control组(P﹤0.05)。ZEB2 shRNA组细胞迁移率均低于Control组和shRNA-NC组,侵袭细胞数目均少于Control组和shRNA-NC组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。ZEB2 shRNA组细胞中MMP2、vimentin蛋白相对表达量均低于Control组和shRNA-NC组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论沉默ZEB2基因表达能够抑制卵巢癌细胞迁移和侵袭能力,MMP2和vimentin可能是其作用机制之一。(本文来源于《癌症进展》期刊2019年07期)
锌指基因论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
【目的】利用建立的多效唑诱导中国水仙的SSH文库,克隆中国水仙NtCCHC锌指基因的cDNA序列,进行原核表达,为深入研究NtCCHC锌指基因在中国水仙中的功能奠定基础。【方法】采用Trizol法提取多效唑处理后的中国水仙叶片总RNA,反转录成cDNA后,根据已知的CCHC锌指蛋白基因序列设计引物进行基因克隆和同源性分析,并构建原核表达载体进行诱导表达。【结果】克隆一段810bp的cDNA编码区序列,编码269个氨基酸,同源性分析表明与多个物种的CCHC基因存在着较高的同源性,命名为NtCCHC。该基因能成功在pGEX-4T-3原核表达载体上实现诱导表达,系统进化树分析表明:NtCCHC与中国莲遗传距离最近。【结论】克隆了中国水仙NtCCHC基因序列,并成功诱导表达。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
锌指基因论文参考文献
[1].李雪,王凤涛,冯晶,庞云星,贾湘.两个锌指转录因子基因在调控小麦条锈菌耐高温反应中的作用[C].中国植物保护学会2019年学术年会论文集.2019
[2].邹晖,李海明,王伟英,林江波.中国水仙NtCCHC锌指蛋白基因的克隆与原核表达[J].福建农业学报.2019
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[8].陈存,高志宏,冯媛媛,伍勇,祁伟亮.拟南芥中一个锌指蛋白AT5g47610的基因克隆及表达分析[J].种子.2019
[9].吕天琦.白菜C2H2型锌指蛋白基因家族的进化及DAZ3在转录水平调控花粉发育的研究[D].浙江大学.2019
[10].张宁,左丽,肖谜,应江山.E盒结合锌指蛋白2基因对卵巢癌细胞侵袭及迁移影响的实验研究[J].癌症进展.2019