禽脑脊髓炎病毒内蒙分离株论文_刘丽华,马学恩,顾玉芳,赵振华

导读:本文包含了禽脑脊髓炎病毒内蒙分离株论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:病毒,内蒙,脑脊髓,序列,活性,外壳,蛋白。

禽脑脊髓炎病毒内蒙分离株论文文献综述

刘丽华,马学恩,顾玉芳,赵振华^[1]（2007）在《禽脑脊髓炎病毒内蒙分离株(AEV-NH937)基因组全序列分析》一文中研究指出禽脑脊髓炎病毒(avian encephalomyelitisvirus,AEV)的大小、形态和浮力密度显示其属于小RNA病毒家族,小RNA病毒是小的单链RNA病毒[1]。AEV可引起鸡、火鸡、鸭及鹌鹑等禽类的脑脊髓炎[2,3,4]。AEV野毒株通常在肠(本文来源于《中国兽医杂志》期刊2007年09期）

刘丽华,马学恩,赵振华^[2]（2007）在《禽脑脊髓炎病毒内蒙分离株外壳蛋白VP1基因在大肠杆菌中的融合表达及活性分析》一文中研究指出为研制禽脑脊髓炎病毒(avian encephalomyelitis virus,AEV)亚单位疫苗,对AEV-NH937内蒙分离株外壳蛋白VP1基因进行融合表达、纯化及活性分析.根据AEV-NH937基因组全序列,设计一对引物.利用RT-PCR技术,扩增AEV的外壳蛋白VP1基因.经序列分析,VP1基因编码区为810bp,编码270个氨基酸残基.将VP1基因插入载体pGEX-4T1构建表达重组质粒,然后转化大肠杆菌BL21.经IPTG诱导后,用聚丙稀酰氨凝胶电泳分析,结果表明,有融合蛋白表达,其分子量为56KD.纯化后,利用ELISA检测分析VP1蛋白,证明VP1蛋白有一定的抗原活性.(本文来源于《内蒙古工业大学学报(自然科学版)》期刊2007年03期）

刘丽华^[3]（2003）在《关于禽脑脊髓炎病毒内蒙分离株基因组的研究》一文中研究指出禽脑脊髓炎病毒(Avian Encephalomyelitis Virus,AEV)是一种小RNA病毒。侵害鸡的中枢神经系统和其它实质性器官，该病毒通过口-粪途径传播，具有水平和垂直传播的能力。由于它极大的稳定性，被污染的区域可能长期保持传染性。鸡胚适应株Van Roekel是高度嗜神经的，并且在鸡的肠道内不能有效的生长，而野毒株却是嗜肠道型的。尽管这样，野毒株和Van Roekel株的病毒多肽具有一致的抗原性。幼鸡感染该病毒后，引起麻痹、头颈震颤甚至共济失调，而成鸡常呈亚临床感染或导致产蛋量和孵化率下降。病毒的感染性不受氯仿、低pH、胃蛋白酶、胰酶和脱氧核糖核酸酶的影响，镁离子可增强病毒对热的稳定性，病毒的浮密度为1.31g／ml，直径为22-30nm，该病毒主要在鸡胚中增殖，在大多数细胞培养物中不生长。 1932年Jones首次报道了在1930年美国新英格兰地区幼鸡群爆发的禽脑脊髓炎。随后十年中，在欧洲、加拿大、日本和澳大利亚都有此病的报道。八十年代，该病传入我国。AEV一直被认为是最重要的禽病病原之一，尽管它很重要，但有关其基础生物学，发病机理的了解却较少。本项研究，旨在利用分子生物学的技术手段，搞清楚AEV基因组的序列和结构，从而探讨基因结构与功能的关系。本研究共分四个部分：第一部分为AEV的增殖，纯化和电镜观察，用1:5倍稀释的AEV-NH937株和阴性对照PBS分别经卵黄囊接种于6dSPF鸡胚，继续孵化10d后，收集尿囊液。比较接种组和健康对照组鸡胚的大小，结果显示，健康对照组鸡胚明显大于接种组。分离、提纯AEV，把纯化的病毒在电镜下观察，证明确有大量AEV病毒粒子存在，说明AEV在鸡胚中成功扩增；第二部分是AEV-NH937基因组的序列测定工作。根据Calnek疫苗株序列设计了9对引物，利用反转录聚合酶链式反应，成功地扩增了AEV-NH937毒株的全基因。把它们分段克隆在pUCm-T载体上，经序列分析，获得了AEV-NH937毒株的基因组全序列及推导的氨基酸序列，基因组全长为7055个核苷酸，与calnek疫苗株具有94.3％的同源性，编码一个含2134个氨基酸的多聚蛋白。这是国内首次对AEV基因组全序列的分析；第叁部分：AEV外壳蛋白VP_1基因在大肠杆菌中的融合表达、纯化及活性研究。将VP_1基因编码区的810bp片段插入载体pGEX-4T1构建表达重组质粒，然后转化大肠杆菌BL_(21)，经IPTG诱导后，用聚丙稀酰氨凝被电泳分析。结果表明，表达产物为53KD的融合蛋白。经超声波裂解，用尿素溶解包涵体，电泳纯化后，利用ELISA检测VP_1 外壳蛋白，表明具有一定抗原性；第四部分：应用原位杂交检测 AEV i用 D i g 标记的探针与sd、10d、20d的攻毒鸡脑组织杂交，来检测那V的RNA。结果显示，sd、10d、20d的攻毒脑组织切片均有阳性杂交信号，阴性对照却没有杂交信号，该方法与其它检测方法具有良好的平行关系。(本文来源于《内蒙古农业大学》期刊2003-06-01）

禽脑脊髓炎病毒内蒙分离株论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

为研制禽脑脊髓炎病毒(avian encephalomyelitis virus,AEV)亚单位疫苗,对AEV-NH937内蒙分离株外壳蛋白VP1基因进行融合表达、纯化及活性分析.根据AEV-NH937基因组全序列,设计一对引物.利用RT-PCR技术,扩增AEV的外壳蛋白VP1基因.经序列分析,VP1基因编码区为810bp,编码270个氨基酸残基.将VP1基因插入载体pGEX-4T1构建表达重组质粒,然后转化大肠杆菌BL21.经IPTG诱导后,用聚丙稀酰氨凝胶电泳分析,结果表明,有融合蛋白表达,其分子量为56KD.纯化后,利用ELISA检测分析VP1蛋白,证明VP1蛋白有一定的抗原活性.

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。