导读:本文包含了小鼠肝细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:急性肝衰竭,臭牡丹大黄素,肝细胞内质网应激,小鼠
小鼠肝细胞论文文献综述
寇小妮,解新科,郝明霞,吴维,樊晓丹[1]（2019）在《臭牡丹大黄素对急性肝衰竭小鼠生化指标及肝细胞内质网应激的影响》一文中研究指出目的观察臭牡丹大黄素对小鼠急性肝衰竭的治疗作用及肝细胞内质网应激的影响并探讨其作用机制。方法提取臭牡丹大黄素,将30只雄性C57BL/6小鼠随机均分为对照组、模型组和干预组。干预组在建模前6 h腹腔给予臭牡丹大黄素(80 mg/kg)。模型组和干预组腹腔注射D-氨基半乳糖(700 mg/kg)和脂多糖(10μg/kg),对照组给予等量0.9%氯化钠注射液,6 h后造模成功,对肝组织进行HE染色,检测血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(GOT)水平,El检测肝组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、GSK3β、p-GSK3β、ERK、JNK、p38和Caspase-3表达水平及肝组织细胞凋亡情况。结果对照组大鼠肝脏结构正常;模型组出现肝小叶结构紊乱,出血,存在炎性细胞浸润和肝细胞坏死;干预组病理改变较模型组减轻。与对照组比较,模型组ALT、GOT、IL-1β、IL-6、TNF-α、GSK3β、p-GSK3β、ERK、JNK、p38、Caspase-3和细胞凋亡水平显着增高(P <0.05);与模型组比较,干预组ALT、GOT、IL-1β、IL-6、TNF-α、GSK3β、p-GSK3β、ERK、JNK、p38、Caspase-3和细胞凋亡水平显着降低(P<0.05)。结论臭牡丹大黄素可以减轻小鼠ALF的炎症反应,减轻肝细胞坏死和凋亡,发挥治疗作用,其机制可能与通过抑制ERS相关信号分子有关。(本文来源于《中国中医急症》期刊2019年10期）
谢婧,李丽华[2]（2019）在《脱水穿心莲内酯对四氯化碳诱导的肝纤维化模型小鼠肝细胞凋亡的抑制作用及其机制》一文中研究指出目的:探讨脱水穿心莲内酯(DA)对四氯化碳(CCl_4)诱导的肝纤维化模型小鼠肝细胞凋亡的抑制作用,并阐明其可能的作用机制。方法:30只6～8周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。除正常对照组外其余2组小鼠采用20%CCl_42.0mL·kg~(-1)腹腔注射,每周3次,制备肝纤维化模型,对照组小鼠给予等量的橄榄油。治疗组小鼠按100mg·kg~(-1 )DA灌胃给药,每周3次,对照组和模型组小鼠灌服等体积生理盐水。给药4周,末次给药后24h摘眼球取血,断髓,取肝脏。检测各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;检测各组小鼠肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平;HE染色和天狼猩红染色观察各组小鼠肝脏病理学表现;Western blotting法检测各组小鼠肝组织中8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶1(Ogg1)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白水平;免疫组织化学法检测各组小鼠肝组织中转化生长因子β1(TGF-β1)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠血清中ALT和AST活性及肝组织中MDA水平均明显升高(P<0.05),肝组织中SOD活性明显下降(P<0.05);与模型组比较,治疗组小鼠血清中ALT和AST活性及肝组织中MDA水平明显降低(P<0.05),肝组织中SOD活性明显升高(P<0.05)。HE染色和天狼猩红染色,与模型组比较,治疗组小鼠肝组织中炎性细胞浸润和胶原沉积程度明显改善。与对照组比较,模型组小鼠肝组织中Ogg1、Caspase-3、Bax、TGF-β1、α-SMA和Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,治疗组小鼠肝组织中Ogg1、Caspase-3、Bax、TGF-β1和α-SMA蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:DA对CCl_4导致的肝纤维化小鼠具有保护作用,其机制可能与降低氧化应激损伤、抑制肝细胞凋亡和减少肝星状细胞活化有关。(本文来源于《吉林大学学报(医学版)》期刊2019年05期）
马士朝,张超群,孙殿兴[3]（2019）在《局部应用Cp G寡聚脱氧核苷酸联合OX40单抗治疗肝细胞癌小鼠模型的效果分析》一文中研究指出目的探讨局部应用CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)联合OX40单抗方案对肝细胞癌的疗效,以及对远处同源肿瘤的治疗效果。方法在BALB/c雄性小鼠四肢腋窝皮下注射H22单细胞悬液,建立荷瘤模型,7 d后筛选出30只荷瘤体积相当的小鼠,随机分成模型对照组、CpG组、CpG+OX40组,每组10只,并在左下肢瘤内注射药物。选取10只同批正常小鼠作为正常对照组。计算荷瘤体积,ELISA法检测血清IL-12和IFNγ浓度,流式细胞术检测脾脏CD8+T淋巴细胞比例,比较3组小鼠治疗后的生存情况。计量资料多组间比较采用重复测量设计资料的方差分析和单因素方差分析,进一步两两组间比较采用LSD-t检验;采用log-rank检验分析3组小鼠(不包含正常组)生存率,并绘制生存曲线。结果给予治疗后,模型对照组荷瘤呈进行性增长,血清IL-12和IFNγ水平、脾脏CD8+T淋巴细胞比例较正常对照组均减低(P值均<0. 05)。与模型对照组相比,CpG组和CpG+OX40组干预荷瘤体积均缩小(P值均<0. 05); CpG+OX40组远处荷瘤体积比CpG组和模型对照组增长减慢(P值均<0. 05),但CpG组远处荷瘤体积与模型对照组差异无统计学意义(P> 0. 05)。与模型对照组相比,两实验组血清中IL-12和IFNγ水平及脾脏CD8+T淋巴细胞比例均升高(P值均<0. 05),且CpG+OX40组高于CpG组(P值均<0. 05)。CpG+OX40组小鼠生存率均高于模型对照组和CpG组(P值均<0. 05),CpG组与模型对照组之间差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论 OX40单抗联合CpG-ODN可使治疗处肝脏肿瘤缩小,并有效减缓远处肿瘤增长,延长小鼠生存时间。(本文来源于《临床肝胆病杂志》期刊2019年09期）
刘畅,朱耀辉,何亚兰,王艳,李磊[4]（2019）在《镉抑制Nrf2激活NLRP3诱导的小鼠肝细胞焦亡》一文中研究指出镉为常见环境污染物,对人和动物具有广泛毒性,急性中毒常表现为严重的肝损伤,本研究旨在讨论急性镉中毒导致的小鼠肝脏损伤发病机理,为防治镉诱导的肝损伤提供参考。选择20只SPF级ICR小鼠,适应性饲养一周后,随机分为空白对照组与染镉组,空白对照组按照0.1 m L/10g.b.w腹腔注射生理盐水,染镉小鼠按照4 mg/kg腹腔注射Cd Cl2溶液,染毒18 h后摘眼球采血并分离血清,颈椎脱臼处死小鼠,迅速分离肝脏,取大小约1 mm3的肝组织置于2.5%戊二醛溶液固定,其余肝脏置于-80℃保存。采用赖氏比色法测定小鼠血清中丙氨酸氨基转氨酶(alanineaminotransferase,ALT)与天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)活力;采用比色法测定肝脏组织中谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量与超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力;固定的肝组织按照常规方法制备超薄组织切片,经醋酸铀-柠檬酸铅染色后通过透射电镜观察肝细胞超微病理变化;另外采用westernblot技术检测肝脏中Nrf2与NLPR3蛋白表达情况。结果发现,镉可显着增加小鼠血清ALT、AST的活性(P<0.01),显着减少肝脏GSH含量(P<0.01),显着增加肝脏MDA的含量(P<0.01),同时显着抑制肝脏SOD的活力(P<0.01),表明4mg/kgCd Cl2可造成小鼠肝脏氧化应激损伤。超微病理组织检查发现,染镉小鼠肝细胞核出现明显皱缩、核周围出现气球样囊泡、线粒体膜破损,嵴消失等细胞焦亡的典型超微病理变化。进一步研究发现,染镉小鼠肝脏中转录因子Nrf2入核显着下降,同时伴随着NRLP3蛋白表达量显着升高。以上结果表明,小鼠经4mg/kg Cd Cl2处理可造成肝细胞焦亡,这可能与Cd Cl2抑制了转录因子Nrf2的转录活性降低肝脏抗氧化能力,引起肝脏氧化应激损伤,进而激活NRLP3从而诱发细胞焦亡。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集》期刊2019-07-27）
吴源泉,吴建华,王梁,林洋[5]（2019）在《脐带间充质干细胞通过旁分泌机制维持原代小鼠肝细胞的体外生长》一文中研究指出背景:肝细胞移植对于晚期肝功能衰竭患者是一种非常有效的替代治疗方法,体外条件下扩增培养肝细胞具有非常重要的临床意义。目的:体外实验探讨人脐带间充质干细胞对原代小鼠肝细胞功能的调控作用。方法:实验分3组:①人脐带间充质干细胞与原代小鼠肝细胞非接触共培养(非接触共培养组);②人脐带间充质干细胞培养液上清与原代小鼠肝细胞共培养(上清组);③原代小鼠肝细胞用含体积分数为10%胎牛血清的低糖DMEM培养(常规培养组)。培养48,72,96 h,采用MTT法检测3组肝细胞增殖情况,吲哚菁绿检测肝细胞相关功能,ELISA法检测白蛋白及尿素分泌情况,RT-PCR检测肝细胞相关基因表达。该研究的实施符合喀什地区第一人民医院的相关伦理要求(伦理批件号:01号)。结果与结论:①与常规培养组相比,培养48,72,96 h时非接触共培养组和上清组都可以显着促进小鼠肝细胞增殖,差异有显着性意义(P <0.05);②与常规培养组相比,培养96 h时非接触共培养组和上清组都可以维持小鼠肝细胞的摄取功能活性,差异有显着性意义(P <0.05);③与常规培养组相比,在48 h和96 h时非接触共培养组和上清组小鼠肝细胞分泌白蛋白及尿素水平显着升高,差异有显着性意义(P <0.05);④与常规培养组相比,非接触共培养组和上清组HGF、b FGF以及ALB mRNA表达显着升高,差异有显着性意义(P <0.05);但细胞色素基因CYP2B9的表达在3组细胞内差异无显着性意义(P> 0.05);⑤结果表明,脐带间充质干细胞可通过旁分泌机制在体外维持原代小鼠肝细胞功能,并促进其增殖,是体外条件下人工扩增肝细胞的一种新的应用策略。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2019年25期）
吴杰[6]（2019）在《CD38基因敲除对酒精引起的小鼠原代肝细胞氧化应激损伤的保护作用及机制研究》一文中研究指出研究背景与研究目的:酒精性肝病是由长期大量饮酒造成的一类代谢性疾病,其主要病变包括脂肪堆积,纤维化和肝硬化等。据统计,至少60%的肝脏疾病相关死亡是由于过量饮酒造成的,目前认为氧化应激是造成酒精性肝病发生和发展的主要原因,抗氧化应激被认为是最直接和最有效的酒精性肝病治疗策略。我们实验室前期研究发现,CD38基因缺失的小鼠胚胎成纤维细胞对H_2O_2和缺氧复氧诱导的氧化应激损伤具有显着的保护作用,同时CD38干扰可以改善由心脏脂质超载诱导的氧化应激损伤,然而CD38是否可以通过影响氧化应激影响酒精在肝损伤中的作用尚无文献报道。本课题拟在体外制备酒精诱导的肝细胞损伤模型,利用原代CD38基因敲除肝细胞研究其在酒精引起肝细胞氧化应激损伤中的作用及其具体机制,从而为酒精性肝病的防治提供新的作用靶点与研究思路。实验方法:1.肝原代细胞的提取与酒精诱导的肝细胞损伤模型的制备:1)通过在体灌流法分离培养6-8周龄C57BL/6小鼠原代肝细胞;2)梯度浓度酒精处理体外培养的原代肝细胞10小时,用DCFH-DA荧光探针标记细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS),荧光显微镜检测细胞荧光强度;3)以1%酒精处理体外培养的原代肝细胞,检测不同时间点细胞ROS;4)Q-PCR和Western Blot法检测酒精对CD38转录与表达的影响。2.CD38敲除对酒精诱导细胞氧化应激损伤作用的分析:分离培养野生型和CD38基因敲除小鼠原代肝细胞,1%酒精处理10小时以诱导细胞氧化应激损伤模型。1)Q-PCR和Western Blot检测细胞中CD38敲除效率;2)流式细胞仪检测细胞ROS含量;3)多功能酶标仪检测线粒体膜电位;4)TBA法检测细胞丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量。3.机制分析:1)Western Blot检测酒精处理后野生型和CD38敲除组氧化应激相关蛋白SOD2、NOX2和FOXO3的表达;2)WST法检测超氧化物歧化酶活性(SOD);3)Q-PCR检测CD38基因敲除或过表达对酒精代谢相关基因ALDH2 mRNA水平的影响。实验结果:1.酒精浓度梯度处理原代肝细胞10小时后,细胞ROS水平随酒精浓度增加明显升高,并且CD38 mRNA表达量随酒精浓度增加而降低。1%酒精处理原代肝细胞,随着时间延长细胞ROS累积增加,并且在十小时左右达到最大量。2.1%酒精处理原代肝细胞十小时后,相比于野生型对照组,CD38基因敲除能够明显降低细胞ROS,MDA含量,并改善酒精诱导的线粒体膜电位降低。3.CD38基因敲除可以促进总SOD活性,但抑制SOD2的蛋白表达,然而并不影响FOXO3蛋白表达。酒精处理肝细胞后CD38基因敲除可以抑制NOX2表达。4.CD38基因敲除促进肝细胞ALDH2 mRNA表达,过表达CD38抑制ALDH2 mRNA表达。结论:CD38基因敲除对酒精诱导的肝细胞细胞氧化应激损伤具有保护作用。敲除CD38基因可促进肝细胞超氧化物歧化酶活性,加速ROS清除;同时CD38敲除促进ALDH2表达,从而改善酒精诱导的氧化应激损伤。(本文来源于《南昌大学》期刊2019-06-01）
李歆[7]（2019）在《雷公藤红素调控NF-κB信号通路抑制AKT/c-Met诱导小鼠肝细胞癌作用机制初步研究》一文中研究指出目的:研究AKT/c-Met共表达诱导的肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)小鼠模型中NF-κB信号通路对小鼠HCC的发生发展的作用,探讨NF-κB相关信号通路对HCC的影响。用雷公藤红素对AKT/c-Met小鼠HCC模型进行干预,观察雷公藤红素对小鼠HCC模型中NF-κB表达水平的影响。方法:1、AKT/c-Met共表达促进NF-κB信号通路的激活采用野生型FVB/N小鼠32只,随机平均分成4组,AKT组,c-Met组和AKT/c-Met组运用SB介导的高压尾静脉转染技术注射相应质粒,WT组注射等体积生理盐水。造模6W后,眼眶静脉丛取血,测定各组小鼠血清中AST和ALT含量。麻醉情况下将小鼠处死,剥离肝脏组织,拍照,称重记录。取一部分小鼠肝脏组织用4%多聚甲醛固定。组织包埋切片HE染色后,在显微镜下观察。另一部分组织-80℃保存,并通过Western Bloting检测NF-κB及IL-6、TNF-α、COX-2和PGE2表达水平。2、雷公藤红素调控NF-κB信号通路抗AKT/c-Met共表达诱导小鼠肝细胞癌初步研究32只野生型FVB/N小鼠随机分成4组:正常组(WT)、AKT/c-Met模型组、雷公藤红素低剂量组(AKT/c-Met-Cel-1)、雷公藤红素高剂量组(AKT/c-Met-Cel-2)。造模4周后给予雷公藤红素进行干预,连续3周(腹腔给药,1和2 mg/kg/天)。给药结束后,麻醉情况下将小鼠处死,剥离肝脏组织,拍照,称重记录。用Western Bloting检测雷公藤红素给药后HCC小鼠肝组织中PCNA和NF-κB及相关蛋白水平变化。3、雷公藤红素对体外HCC细胞生长中的NF-κB信号通路的影响将人源肝癌细胞HepG2和SMMC-7721在含5%胎牛血清的H-DMEM培养液中培养,细胞密度达到80%时,提取细胞蛋白,检测细胞中NF-κB的表达水平,结果进行对比分析。NF-κB表达较高细胞直接进行雷公藤红素干预研究,NF-κB表达较低细胞先进行AKT/c-Met质粒转染,然后给予雷公藤红素干预;并考察不同给药时间和不同给药浓度对细胞的影响。雷公藤红素干预结束后,提取细胞蛋白,采用Western Bloting检测细胞中NF-κB等相关蛋白的表达水平。结果:(1)转染6周后,AKT组小鼠肝组织有脂肪变性,c-Met组小鼠肝组织无异常,但是AKT/c-Met组肝脏表面肉眼可见大小不等的灰白色,切面呈多结节状,小鼠肝脏病理组织学结果示为肝细胞癌。与正常组对比,AKT组、c-Met组和AKT/c-Met组的ALT、AST均显着升高,具有统计学差异(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。与正常组相比,AKT/c-Met组的NF-κB的表达量显着升高,差异有统计学意义(P<0.001)。(2)与模型组对比,雷公藤红素低、高剂量组肝重下降(P<0.05)。与模型组对比,雷公藤红素低、高剂量组肝组织中NF-κB蛋白表达降低(P<0.01,P<0.001)(3)SMMC-7721细胞中NF-κB蛋白表达水平低于HepG2细胞中的NF-κB蛋白表达水平。雷公藤红素抑制了SMMC-7721,HepG2细胞中NF-κB,TNF-α蛋白的表达。结论雷公藤红素能抑制AKT/c-Met诱导的HCC小鼠模型发生发展,该作用可能是通过抑制NF-κB信号通路。(本文来源于《湖北中医药大学》期刊2019-05-25）
Yang,L,王玮珺[8]（2019）在《肝细胞E1A激活基因阻遏子通过转化生长因子激酶1依赖减轻小鼠肝缺血再灌注损伤》一文中研究指出【据《Hepatology》2019年1月】报道:肝细胞E1A激活基因阻遏子通过转化生长因子激酶1依赖减轻小鼠肝缺血再灌注损伤(作者Yang L等)肝缺血再灌注损伤是在肝移植、肝切除手术中不可避免的损伤过程,是肝脏外科手术的一大难题。目前唯一有效的治疗方案是缺血预处理,但在适应症上存在缺陷。因此,对肝缺血再灌注损伤发病机制的深入了解并开发有效(本文来源于《临床肝胆病杂志》期刊2019年05期）
贾晨号[9]（2019）在《载铅超细炭黑对CAT、SOD及小鼠肝细胞毒性效应与机理的研究》一文中研究指出近年来,雾霾污染越来越严重,作为雾霾主要组成部分的超细颗粒物(UFPs)对健康的影响也引起了社会的广泛关注。UFPs分布广泛,能通过呼吸道与人体接触并进入细胞,与功能蛋白结合影响其结构和功能表达,进而诱发急性肺炎、心脑血管损伤和免疫系统损伤等疾病。UFPs的组成复杂,其毒性效应是各组分共同作用的结果,目前缺乏对UFPs各组分毒性效应机理的探讨与研究。超细炭黑(UFCB)与UFPs具有相似的理化性质,可作为UFPs生物学研究的替代模型。重金属铅极易被UFPs吸附,负载了铅的UFPs在大气中广泛存在,给人类健康带来了新的问题。目前UFPs的毒理学研究主要集中在单一 UFCB颗粒对呼吸系统细胞的影响,对于多组分的UFPs作用于功能蛋白和组织器官,从而使机体致病的机理研究仍然匮乏。氧化应激是所有疾病的诱因,肝脏肩负着机体氧化防御的重要任务;过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)在保护机体免受氧化应激损伤中起着重要作用。因此本文选取小鼠原代肝细胞为靶细胞,选取CAT和SOD为靶蛋白,选取UFCB作为UFPs的生物替代模型,在细胞水平和分子水平研究比对了UFCB和载铅UFCB诱发机体氧化应激的效应与机理。本文主要包括以下几部分内容:(1)综述了大气颗粒物、UFPs、UFCB和铅的污染现状及现阶段毒理学研究进展,明确了现阶段对载铅UFPs毒性机理评价的不足,确定了本次的研究目的和研究内容。(2)利用多种方法对UFCB进行改性修饰,改性后超细炭黑(MCB)水溶液的Zeta电位为-39.7 mV,远高于改性之前的-18.2 mV,证明MCB的分散稳定性优于改性之前。将MCB应用于铅的吸附实验,最后得到铅含量为0.235 g/g的载铅MCB(即Pb-MCB)。(3)研究比对了 MCB和Pb-MCB诱发小鼠肝细胞氧化应激效应的影响。实验结果表明:肝细胞活力与MCB和Pb-MCB暴露浓度之间均呈负活力-剂量关系。细胞内MDA含量随MCB和Pb-MCB暴露浓度的增加而升高,且在50 mg/L时达到最高,分别为对照组的204.44%和172.49%,高浓度的MDA打破了细胞内部的氧化还原平衡并破坏了细胞膜的完整性,使细胞发生脂质过氧化作用从而导致细胞活力降低甚至死亡。随着MCB和Pb-MCB暴露浓度的升高,细胞内CAT的相对活力均呈先上升后下降的趋势。MCB的暴露同样导致了胞内SOD的相对活性先上升后下降,但是随Pb-MCB暴露浓度的增加,SOD的相对活性逐步上升。比对同等暴露条件下MCB和Pb-MCB对小鼠肝细胞氧化应激指标的影响发现,MCB的细胞毒性较Pb-MCB的细胞毒性强,原因是MCB较Pb-MCB带更多的负电荷,更易与膜蛋白、CAT和SOD结合作用,影响细胞和酶的活力及功能表达。(4)利用多种光谱学手段研究比对了MCB和Pb-MCB的暴露对CAT和SOD分子结构和功能的影响。结果发现:无论是MCB还是Pb-MCB都会与CAT和SOD结合,在炭黑颗粒表面形成一层“蛋白冠”类的物质,改变了CAT和SOD发色团的微环境,使蛋白质骨架结构紧缩,疏水性增强。MCB和Pb-MCB暴露染毒均使CAT的活性先上升后下降,使SOD的活性持续下降。CAT和SOD活性的变化一方面说明了结构的改变影响了酶的功能表达;另一方面酶与MCB或Pb-MCB的结合会影响其活性位点附近氨基酸的微环境,从而间接对酶的活性产生影响或者抑制作用。比对同等暴露条件下MCB和Pb-MCB对CAT和SOD分子的影响时发现,MCB对CAT和SOD结构和功能的影响大于Pb-MCB对两种酶蛋白的影响,原因是MCB带大量的负电荷,更易与带正电荷的CAT或者SOD结合作用,改变酶蛋白的结构使其活性降低;而Pb-MCB溶液中微量Pb2+的存在促进了 Pb-MCB粒子的团聚沉降,粒径的增大使Pb-MCB与酶蛋白之间的作用力和结合面积减小,因此MCB较Pb-MCB表现出更强的分子毒性。本论文从细胞和分子两个层面研究并比对了MCB和Pb-MCB对机体氧化应激机制的毒性作用机理,为多组分大气颗粒物的毒性效应评价提供了理论和方法的参考。(本文来源于《山东大学》期刊2019-05-12）
潘贵[10]（2019）在《miR-124-3p在原代小鼠肝细胞重编程为胰岛素分泌细胞过程中的关键调控作用研究》一文中研究指出目的:通过小分子化合物分阶段将小鼠肝细胞重编程为胰岛素分泌细胞(insulin producing cells,IPCs),建立一种用非转基因方式重编程原代肝细胞为胰岛素分泌细胞的方法并探索miRNA-124-3p在诱导分化过程中的机制。方法:小鼠原代肝细胞分离、培养、鉴定,利用各类小分子化合物分阶段将肝细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞,通过qPCR、细胞免疫荧光检测分化各阶段标志物的表达,通过胰岛素释放实验检测IPCs的功能。设计miRNA-124-3p类似物(mimic)和抑制剂(inhibitor)序列,将mimic和inhibitor分别转染至小鼠肝细胞,并通过qPCR检测转染后miRNA-124-3p和靶基因Foxa2表达量变化,以此来判断载体是否构建成功,再将miR-124-3p上调和下调后的肝细胞诱导分化为IPCs,采用qRT-PCR,细胞免疫荧光检测miRNA-124-3p上调及下调后诱导各阶段胰岛素发育相关基因及蛋白表达量变化。小鼠胰岛素酶联免疫分析(ELISA)检测各阶段细胞分泌胰岛素的差异。结果:1.糖原染色显示分离得到的细胞为含有糖原颗粒的肝细胞,通过细胞免疫荧光染色也得到了进一步的证实。诱导得到的IPCs表达β细胞功能相关基因GK、Glut2和insulin1,细胞免疫荧光显示insulin和C-肽蛋白表达阳性,胰岛素释放实验证明肝细胞成功的重编程为有功能的IPCs。2.转染mimic后,miR-124-3p表达量显着上调,靶基因Foxa2的表达量较对照组下调,转染miR-124-3p inhibitor后,靶基因Foxa2的表达量显着上调,成功构建miR-124-3p过表达和抑制载体。miR-124-3p抑制表达后诱导的IPCs中Foxa2、Pdx1、NeuroD、insulin1、insulin2基因表达水平显着上调,miR-124-3p过表达后结果则相反。细胞免疫荧光、体外葡萄糖刺激实验等结果均表明,抑制miR-124-3p的表达后,insulin,pdx1,C-peptide的表达量较对照组和过表达组升高,分化效率升高。结论:1.通过小分子化合物诱导,成功将原代小鼠肝细胞重编程为胰岛素分泌细胞。2 miR-124-3p在肝细胞体外分化为IPCs的过程中发挥负调控作用。抑制miR-124-3p表达可以显着提高Foxa2以及Pdx1的表达,促进肝细胞向IPCs分化,提高诱导效率;过表达miR-124-3p显着抑制Foxa2以及Pdx1的表达,降低诱导效率。(本文来源于《南昌大学》期刊2019-05-01）
小鼠肝细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探讨脱水穿心莲内酯(DA)对四氯化碳(CCl_4)诱导的肝纤维化模型小鼠肝细胞凋亡的抑制作用,并阐明其可能的作用机制。方法:30只6～8周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。除正常对照组外其余2组小鼠采用20%CCl_42.0mL·kg~(-1)腹腔注射,每周3次,制备肝纤维化模型,对照组小鼠给予等量的橄榄油。治疗组小鼠按100mg·kg~(-1 )DA灌胃给药,每周3次,对照组和模型组小鼠灌服等体积生理盐水。给药4周,末次给药后24h摘眼球取血,断髓,取肝脏。检测各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;检测各组小鼠肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平;HE染色和天狼猩红染色观察各组小鼠肝脏病理学表现;Western blotting法检测各组小鼠肝组织中8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶1(Ogg1)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白水平;免疫组织化学法检测各组小鼠肝组织中转化生长因子β1(TGF-β1)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠血清中ALT和AST活性及肝组织中MDA水平均明显升高(P<0.05),肝组织中SOD活性明显下降(P<0.05);与模型组比较,治疗组小鼠血清中ALT和AST活性及肝组织中MDA水平明显降低(P<0.05),肝组织中SOD活性明显升高(P<0.05)。HE染色和天狼猩红染色,与模型组比较,治疗组小鼠肝组织中炎性细胞浸润和胶原沉积程度明显改善。与对照组比较,模型组小鼠肝组织中Ogg1、Caspase-3、Bax、TGF-β1、α-SMA和Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,治疗组小鼠肝组织中Ogg1、Caspase-3、Bax、TGF-β1和α-SMA蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:DA对CCl_4导致的肝纤维化小鼠具有保护作用,其机制可能与降低氧化应激损伤、抑制肝细胞凋亡和减少肝星状细胞活化有关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
小鼠肝细胞论文参考文献
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