导读:本文包含了免疫胶体金层析论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:层析,胶体,免疫,李斯特,湖羊,丙酮酸,血清学。
免疫胶体金层析论文文献综述
王缚鲲,冉向阳,陈晶,程琰,王廷廷[1]（2018）在《检测抗白色念珠菌烯醇化酶IgG抗体免疫胶体金层析试纸的制备》一文中研究指出目的建立一种快速检测抗白色念珠菌烯醇化酶IgG抗体的免疫胶体金层析试纸法。方法以重组烯醇化酶包被于硝酸纤维素膜上,与金标垫上包被的金标小鼠抗人IgG单克隆抗体配对,优化试纸制备条件并制备试纸条,检测人血清中的抗念珠菌烯醇化酶IgG抗体。用该方法对38例确证念珠菌血流感染者和50例健康体检者血清进行检测,分析其检测效能。结果用直径30 nm金颗粒制备的烯醇化酶IgG抗体检测试纸条,最适烯醇化酶包被浓度为1. 0 mg/ml。该试纸用于检测多种念珠菌引起的血流感染中的抗烯醇化酶IgG抗体,检测灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为71. 1%,96. 0%,93. 1%和83. 4%。结论用重组白色念珠菌烯醇化酶制备的免疫胶体金层析试纸条有较好的检测效能,具有准确、快速、方便的优点,可用于人血清抗念珠菌IgG抗体的检测。(本文来源于《解放军医药杂志》期刊2018年11期）
蒋蔚,刘迎春,陈永军,陈国志,姚凯岭[2]（2016）在《一种检测动物弓形虫病的新型动态免疫胶体金层析技术的建立》一文中研究指出弓形虫病对人类健康和畜牧业生产构成严重威胁,对疑似弓形虫病的快速筛查是预防和控制该病的关键。纳米金标记技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体检测的一种免疫标记技术。对传统胶体金层析技术进行创新改造,有利于该项技术的广泛应用和推广。本研究以弓形虫为模型,结合免疫层析法和流体动力学原理,建(本文来源于《中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会论文集》期刊2016-10-19）
伍宏彪[3]（2016）在《免疫胶体金层析技术在兽医临床诊断中的应用》一文中研究指出随着动物医学不断发展创新,免疫胶体金层析诊断技术在不断发展,有效提高了临床应用上检出率与诊断的准确性。本文通过介绍免疫胶体金层析技术的原理、构造、分类应用及诊断来说明该技术在兽医临床诊断中的应用价值。(本文来源于《福建畜牧兽医》期刊2016年05期）
徐锐[4]（2013）在《海产品中恩诺沙星残留的免疫胶体金层析现场快速检测技术》一文中研究指出兽药残留愈来愈受到人们的关注，氟喹诺酮类药物是对较多细菌均具有抑制作用的广谱杀菌药，当前包括我国在内的大多数国家已开始禁止或限制氟喹诺酮类药物的使用。目前免疫胶体金在兽药残留方面越来越凸显其检测的优势，受到大范围的推广使用，这一检测技术使得对很多不同样品的分析过程变得简便而又快速。目前已有报道显示市场上已经出现了相应的免疫胶体金检测试纸卡，但对于这些试纸卡的有效性、如何简化免疫检测的前处理，如何在实际检测的过程中避免反复的离心、净化等繁琐操作还没有明确的报道与研究。本实验以大菱鲆为主要研究对象，利用叁氯乙酸(TCA)消除鱼肉中蛋白的基质效应，使建立的前处理方法减少对大型仪器的利用率，检测时间缩短到叁十分钟以内，检测灵敏度等主要性能且达到国家相关标准的要求。通过建立的简单有效快速的前处理方法，满足了现场快速检测的要求，进一步弥补了商品化试剂条普遍存在的前处理不合理问题。主要内容如下：1、探索基质效应对免疫胶体金检测卡的影响，确定蛋白质是最大影响基质，进而利用叁氯乙酸（TCA）去除鱼肉蛋白，确定叁氯乙酸（TCA）去除蛋白的最佳浓度。经实验证明叁氯乙酸（TCA）去除鱼肉蛋白最佳浓度为9%，免疫胶体金检测卡灵敏度提高。该方法去除蛋白的过程简单，不需要添加复杂的化学物质，能在较短的时间内使其蛋白变性而快速沉淀。2、优化前处理条件，确定最佳实验方案包括：实验装置与药残提取剂的优化；初步确定恩诺沙星药残检测的前处理方法及检出限（LOD），对初步建立的前处理方法采用HPLC法测定其回收率；进一步确定环丙沙星药残检测的前处理方法及检出限（LOD）；终方法对样本中恩诺沙星和环丙沙星的检出限，并将最终确定的方法应用于不同海产品检测。结果表明：确定优化后采用研钵充分研磨样本，针孔滤膜过滤样品提取液，pH试纸调节最终提取液pH；构建了以甲醇/PBS（1:1）与9%的TCA的混合液为提取剂，初步构建的前处理方法经高效液相回收率测定，回收率为40%~50%；建立的最终前处理方法操作时间在30分钟内，对大菱鲆样本中恩诺沙星和环丙沙星的检出限分别为10μg/kg、100ug/kg，大黄鱼和南美白对虾样本中恩诺沙星和环丙沙星的检出限与大菱鲆一致，能够满足国家对于动物性食品中恩诺沙星残留最高检出量的要求。说明该前处理方法基本建立成功。3、将所建立的前处理方法在实际样品中验证，主要过程包括：稀释不同浓度恩诺沙星和环丙沙星标准溶液测定检测卡灵敏度与重复性、选取将3种沙星药物（诺氟沙星、达氟沙星、沙拉沙星）和两种其他抗生素药物（金霉素、土霉素）测定检测卡的特异性、实际样本同时采用本实验方法和HPLC检测方法检测，观察检测结果是否一致。结果表明：检测卡对恩诺沙星标准品和环丙沙星标准品的最低检测灵敏度分别在1μg/kg~5μg/kg和20μg/kg~50μg/kg之间。在3种沙星药物和2种抗生素标准液浓度为100μg/kg时，检测卡均呈现明显阴性结果，该检测卡具有很好的特异性；实际样本经本实验方法和高效液相的方法同时检测结果一致，均呈现阴性结果，可用于实际样本的验证。(本文来源于《中国海洋大学》期刊2013-05-24）
朱晓磊[5]（2012）在《森林脑炎病毒免疫胶体金层析技术方法的建立与评价》一文中研究指出森林脑炎又称蜱传脑炎(Tick-borne encephalitis),是一种通过蜱叮咬人或动物宿主传播的中枢神经系统急性传染病。森林脑炎属于我国法定的乙类传染病,也是重要的自然疫源性疾病。森林脑炎患者发病急性期中可出现高烧、头痛、呕吐、晕厥等强烈的神经刺激症状,病死率约为5-20%。患者预后伴有不同程度的后遗症。我国东北部、新疆北部山地林区是森林脑炎的重要自然疫源地,其中农、林区从业者是罹患森脑的高危人群。蜱传脑炎病毒(Tick-borne encephalitis viruses, TBEV)是森林脑炎的病原体。该病毒是一种带有包膜结构的单股正链RNA病毒,在病毒学分类体系中属于黄病毒科(Flaviviridae)黄病毒属(Flavivirus),与本科中日本脑炎病毒、西尼罗脑炎病毒等蚊媒黄病毒亲缘关系高。目前蜱传脑炎致病机制还不十分清楚,尚缺少特效的抗病毒药物。目前针对森林脑炎的诊断方法主要包括经典的病毒学分离培养,间接免疫荧光、ELISA等血清学检测方法,以及一系列基于核酸扩增的病毒RNA检测技术等。上述检测方法在实验室环境已能对森林脑炎进行特异性诊断,但仍存在一些现实性困难。首先,病毒分离培养检测周期长,不能满足快速诊断的需求。其次,蜱传脑炎病毒与其它虫媒黄病毒成员具有一部分保守的抗原表位,血清学诊断容易出现交叉反应(cross-reactivity)导致误诊。第叁、森林脑炎感染急性期中病毒血症窗口期很短,利用核酸扩增方法直接检测病毒的成功率不高。此外,上述诊断方法对检测人员的技术、经验的要求高。诊断的经济性和便捷性也是影响诊断结果的现实因素之一。目前还缺少一种快速、简便的森林脑炎诊断方法。病毒特异性IgM抗体与IgG抗体能在血清中维持较长时间,因此针对病毒特异性抗体的检测能提高诊断效率。免疫胶体金快速诊断试纸条具有简便快速、准确可靠、经济高效等优点。因此,本研究通过原核表达对TBEV的抗原蛋白进行表达。在此基础上,建立并优化基于胶体金免疫层析技术的病毒特异性抗体检测方法,最后,对该检测方法的效能进行评价。为森林脑炎的快速诊断提供一种新方法。为保证胶体金检测方法的特异性与灵敏性,本研究首先对病毒包膜E蛋白结构域Ⅲ区与胞外分泌性NS1蛋白进行原核表达。以本实验室近期分离鉴定的森林脑炎病毒牡丹江分离株MDJ-01基因组全长序列为模板,分别设计针对E-Ⅲ、NS1的特异性引物。通过RT-PCR扩增获得E-Ⅲ,NS1的cDNA片段,利用T-A克隆方法获得上述片段的亚克隆质粒。测序结果表明克隆片段与病毒序列一致。进一步利用BamHⅠ和NotⅠ双酶切位点将上述片段插入pET32a原核表达载体,转化感受态细胞E.coli Rosseta,构建获得表达相应的抗原蛋白的工程菌。通过PCR、酶切等方法挑选克隆阳性菌株,接种于LB培养基,通过IPTG,37℃,4h进行诱导表达。SDS-PAGE结果表明,重组蛋白呈包涵体形式表达,分子量大小与预期一致。在此基础上,利用Ni-NTA亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,分别获得纯度在85%以上的E-Ⅲ、NS1蛋白。此外,本实验还进一步对NS1蛋白进行分节段表达,分别获得F1R2、F1R3、F1R5、F3R2和F2R4五个NS1节段。为对上述蛋白抗原性进行鉴定,本研究将NS1与E-Ⅲ纯化蛋白包被酶联板,利用酶联免疫吸附方法与TBEV兔抗血清进行反应。ELISA结果表明,NS1蛋白与E-Ⅲ蛋白均能与病毒抗血清发生特异性反应,但NS1蛋白的ELISA反应本底值较高。同时,上述病毒抗原与登革病毒、乙脑病毒与西尼罗脑炎病毒抗血清不发生交叉反应。最后,本研究选用E-Ⅲ蛋白做为检测抗原研制间接法免疫胶体金检测试纸条。通过条件的摸索优化,最后确定SPA的pH值为7的条件下标记43μg/ml为最佳标金量,检测线与指控线的划线浓度分别确定为2.5mg/ml与0.5mg/ml。分别使用E-Ⅲ单克隆抗体、兔抗病毒血清、确诊森脑病人血清标本对该方法特异性、灵敏性等进行评价。共检测临床阳性血清样本16份、阴性临床血清样本18份,与IFA、ELISA法相比,检测准确率为94.12%。本试纸条与其它虫媒黄病毒兔抗病毒血清不发生交叉反应。上述结果初步表明,本试纸条具备良好的特异性与灵敏性。此外,该试纸条能在5～10min内完成样品检测,操作过程简便快捷。37℃加速试验测试证明此试纸条的稳定性良好,保存期在半年以上。上述结果表明,本研究建立的森林脑炎胶体金快速检测方法具备特异性、灵敏性特点,使用便捷,可应用于森脑快速诊断。此方法建立后,可与临床诊断、流行病学调查、传统实验室检测相结合,方便临床病例做出快速准确的诊断,及早确定救治方案,因此具有一定的经济和社会效益。(本文来源于《吉林农业大学》期刊2012-06-01）
张立静[6]（2011）在《TEM1型β-内酰胺酶免疫胶体金层析检测方法的建立》一文中研究指出β-内酰胺酶是对β-内酰胺类抗生素耐药的细菌分泌的一种胞外酶,可选择性分解β-内酰胺类抗生素,是绝大多数致病菌对青霉素类药物产生耐药的主要原因。在牛奶中加入β-内酰胺酶后,能将β-内酰胺类抗生素全部降解,从而达到掩盖牛奶含有抗生素的目的。β-内酰胺酶在我国奶牛养殖和牛奶生产中很大程度上持续存在。因此,为确保牛奶及乳制品质量安全,保障消费者健康,建立牛奶中β-内酰胺酶的检测技术十分必要。牛奶中β-内酰胺酶的检测方法中微生物法灵敏度高,但检测时间较长;碘量法、高效液相色谱法等操作复杂,需要特殊的仪器设备。免疫胶体金层析法是一种快速、灵敏、特异和安全的检测技术,可以实现现场快速检测,为大规模筛选提供技术支持。本研究采用小鼠体内诱生法制备抗TEM1型β-内酰胺酶单克隆抗体,采用兔背部多点注射的方法制备抗TEM1型β-内酰胺酶的多克隆抗体。两种抗体经辛酸-硫酸铵法纯化后进行质量鉴定,单抗和多抗的蛋白质浓度分别为10mg/mL、6mg/mL。间接ELISA测得抗体效价分别为1:320 000和1:80 000。双抗夹心法结果表明两种抗体对TEM1型β-内酰胺酶的特异性较高,且对头孢菌素酶无交叉反应性。采用柠檬酸叁钠还原法制备出质量高、直径20nm的胶体金颗粒,对多克隆抗体进行标记的最适蛋白量为72μg/mL,最适pH值以加入0.1mol/L K2CO3的体积衡量,为35μL。金标抗体经纯化后采用浸泡法吸附在Ahlstrom8964玻璃纤维素膜上。将抗TEM1型β-内酰胺酶的单抗包被在NC膜上作为检测线,羊抗兔二抗作为质控线,并对免疫层析试纸条的样品垫、NC膜、金标垫等材料筛选以及相关处理液进行了优化。分别经过处理干燥后与吸水纸、PVC板组装成试纸条。所制备出的试纸条对PBS基质和牛奶基质中的最小检出限为6U/mL和10U/mL,4℃可保存叁个月。本研究对胶体金免疫层析检测TEM1型β-内酰胺酶进行了初步研究。采用双抗夹心法建立了TEM1型β-内酰胺酶的胶体金免疫层析方法,制备出快速检测试纸条,该试纸条灵敏度、特异性、稳定性均良好。(本文来源于《河北农业大学》期刊2011-06-04）
许欣[7]（2010）在《湖羊早期妊娠诊断免疫胶体金层析试纸条的初步研制》一文中研究指出在妊娠早期,母畜外周血浆中的孕酮含量远远高于发情期,所以可以通过测定血液中的孕酮含量来进行早期妊娠诊断。传统的测定方法主要有放射免疫测定法(RIA),酶免疫测定法(EIA)和乳胶凝集测定试验(LAIT),但是由于操作比较复杂,所以并未得到广泛的应用。胶体金免疫层析技术是20世纪90年代在免疫渗滤技术基础上建立的一种简易快速的免疫检测技术,其检测结果通过肉眼即可判断。这种技术具有操作简便,操作时间短等优点,已经广泛地应用于食品安全和激素的检测。本试验采用胶体金免疫层析技术,根据试验确立的湖羊妊娠孕酮临界值,应用竞争法研制出一种胶体金免疫层析试纸条；通过对配种后21d左右湖羊血液中的孕酮进行半定量测定,进行早期妊娠诊断,具有很好的应用价值。试验的主要内容包括以下3个部分：1.对85头配种后21 d左右未出现返情的湖羊采用放射免疫测定法(RIA)测定其外周血中的孕酮含量。研究结果表明,妊娠羊的孕酮含量为2.33±0.70ng/mL,未妊娠羊的孕酮含量为1.24±0.33ng/mL,怀孕羊的孕酮水平高于未怀孕羊,且差异显着(P<0.05)。设定孕酮含量大于1.7ng/mL为妊娠,低于1.5ng/mL为未妊娠,介于两者之间为疑似怀孕。根据上述标准,妊娠确诊率为100%,未妊娠确诊率为82.61%,疑似妊娠确诊率为64%。2.为了获得高质量的金标孕酮单抗,通过采用柠檬酸叁钠还原法制备出符合要求的30 nm的胶体金溶液,在此基础上摸索胶体金标记孕酮单克隆抗体的最佳条件,并对其进行质量鉴定。用柠檬酸叁钠还原法制备的30 nm胶体金溶液呈深红色,透射电镜观察,胶体金颗粒大小基本一致；胶体金标记孕酮单克隆抗体的最低稳定浓度为16μg/mL,最适稳定浓度为19.2μg/mL,最适标记pH为8.5。经电镜观察,制备的金标抗体复合物周围有一层明显的低电子密度晕圈,且其在520 nm处的OD值在0.2～0.4范围内。3.利用胶体金免疫层析技术竞争法原理,根据试验所得的湖羊早孕诊断血液孕酮临界值,用金标孕酮单抗复合物为探针制成金标垫,同时用11α-羟孕酮琥珀酸酯与BSA的偶联物和羊抗小鼠IgG二抗包被硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,制备了半定量检测孕酮的胶体金免疫层析试纸条。结果采用国产SB-08玻璃纤维膜作为样品垫材料,进口Ahlstrom8964玻璃纤维膜作为金标垫,Millipore135硝酸纤维素(NC)膜作为层析材料制成试纸条。检测线和质控线上的包被浓度分别为1.6mg/mL和1.2mg/mL,金标孕酮单抗按1:2稀释后浸金法制作金标垫。NC膜划线后用3%BSA的封闭液进行封闭。试纸条的特异性、稳定性及重复性良好。临床检测27头湖羊,结果显示,与RIA法的符合率为77.8%,与生产记录进行对比后发现,用试纸条进行诊断的妊娠准确率为83.3%,未妊娠准确率为66.7%。(本文来源于《南京农业大学》期刊2010-04-01）
郭玮,王星星,裴兆柱,吴国娟,张中文[8]（2009）在《免疫胶体金层析法检测动物性产品中磺胺类药物多残留》一文中研究指出【目的】以制备的磺胺类药物(SAs)母核结构(SH-BSA)为抗原,建立了动物性食品中磺胺类药物多残留检测的免疫胶体金检测方法(GICA)。【方法】采用柠檬酸叁钠还原法制备胶体金,用胶体金标记磺胺类药物母核结构的单克隆抗体,组装免疫胶体金试纸条,做药物的交叉反应;将动物样品进行前处理,做空白样品添加实验,用研制的试纸条进行检测。【结果】该方法可在15分钟内完成检测。对磺胺二甲氧嘧啶(SDM)、磺胺甲恶唑(SMZ)在猪肉、鸡肉、鸡肝、牛奶中的检测限达到25μg/kg,对磺胺-6-甲氧嘧啶(SMM)、磺胺嘧啶(SD)、磺胺喹恶啉(SQ)达到50μg/kg,最终确定该试纸条对磺胺类药物在动物性组织中的检测限为50μg/kg。用本方法和高效液相色谱法(HPLC)对20份鸡肉样品进行对比检测,符合率达到93.75%。结论:GICA检测快速、准确,无需特殊仪器设备,可作为SAs多残留的快速筛选方法。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十次研讨会论文摘要集》期刊2009-10-01）
高成秀,孙建和,严亚贤[9]（2009）在《大肠杆菌O_(157)及其Stx2免疫胶体金层析检测方法的建立》一文中研究指出建立了大肠杆菌O157和志贺毒素2(Stx2)的双抗体夹心免疫胶体金层析法,并运用该方法对上海市兽医生物技术重点实验室保存的已鉴定的58株大肠杆菌进行了检测,评估了其特异性、敏感性和重复性。结果显示,大肠杆菌O157层析法的敏感性为1×105CFU/mL,特异性为87.5%,批间和批内变异系数分别为8.6%和0;Stx2层析法的检测下限为200μL细菌培养液,特异性为50.0%,批间和批内变异系数分别为50.0%和33.0%。表明,该免疫胶体金层析法能快速、简便、特异地检测大肠杆菌O157;结合对Stx2的检测,能快速检出产Stx2的大肠杆菌O157菌株。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2009年02期）
罗立新,缪珑,潘力,岳振峰,谢丽琪[10]（2006）在《快速检测产单核李斯特菌免疫胶体金层析法的研究》一文中研究指出目的:为产单核李斯特菌提供了一个方便快捷切实有效的检测技术。方法:采用胶体金标记产单核李斯特菌抗体制备免疫层析检测试剂,通过免疫层析作用对产单核李斯特菌进行检测。结果:通过选用柠檬酸钠改良法制备胶体金,测定其最适结合蛋白浓度为28μg/m l,构建起免疫层析检测试剂和检测方法,检测了冷冻猪肉、牛奶、冰激凌以及不同稀释度的产单核李斯特菌标准样品,灵敏度达87.5%,具有良好的重现性。结论:免疫胶体金层析法用于快速检测产单核李斯特菌是可行的。(本文来源于《中国卫生检验杂志》期刊2006年02期）
免疫胶体金层析论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
弓形虫病对人类健康和畜牧业生产构成严重威胁,对疑似弓形虫病的快速筛查是预防和控制该病的关键。纳米金标记技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体检测的一种免疫标记技术。对传统胶体金层析技术进行创新改造,有利于该项技术的广泛应用和推广。本研究以弓形虫为模型,结合免疫层析法和流体动力学原理,建
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
免疫胶体金层析论文参考文献
[1].王缚鲲,冉向阳,陈晶,程琰,王廷廷.检测抗白色念珠菌烯醇化酶IgG抗体免疫胶体金层析试纸的制备[J].解放军医药杂志.2018
[2].蒋蔚,刘迎春,陈永军,陈国志,姚凯岭.一种检测动物弓形虫病的新型动态免疫胶体金层析技术的建立[C].中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会论文集.2016
[3].伍宏彪.免疫胶体金层析技术在兽医临床诊断中的应用[J].福建畜牧兽医.2016
[4].徐锐.海产品中恩诺沙星残留的免疫胶体金层析现场快速检测技术[D].中国海洋大学.2013
[5].朱晓磊.森林脑炎病毒免疫胶体金层析技术方法的建立与评价[D].吉林农业大学.2012
[6].张立静.TEM1型β-内酰胺酶免疫胶体金层析检测方法的建立[D].河北农业大学.2011
[7].许欣.湖羊早期妊娠诊断免疫胶体金层析试纸条的初步研制[D].南京农业大学.2010
[8].郭玮,王星星,裴兆柱,吴国娟,张中文.免疫胶体金层析法检测动物性产品中磺胺类药物多残留[C].中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十次研讨会论文摘要集.2009
[9].高成秀,孙建和,严亚贤.大肠杆菌O_(157)及其Stx2免疫胶体金层析检测方法的建立[J].中国兽医科学.2009
[10].罗立新,缪珑,潘力,岳振峰,谢丽琪.快速检测产单核李斯特菌免疫胶体金层析法的研究[J].中国卫生检验杂志.2006
论文知识图
