陈小军[1]2004年在《云南紫稻细胞质雄性不育系花药发育过程中钙离子的分布》文中指出本文以云南紫稻无花粉型细胞质雄性不育系(Oryza sativa L.)为材料,采用常规石蜡切片光镜观察和超薄切片电镜观察方法,对不同发育时期的紫稻不育系和保持系花药进行了败育的形态学观察、可育与不育花药中Ca~(2+)分布的比较观察,主要实验结果如下: 1.花药石蜡切片的观察:采用常规石蜡切片的固定、包埋方法,对不同发育时期的不育系和保持系花药进行光镜观察的结果表明,紫稻保持系花药发育正常,不育系花药发育异常,出现药室合并、绒毡层细胞延迟退化等现象。紫稻不育系败育主要发生在减数分裂期,只有少数在小孢子时期发生败育,属于无花粉型雄性不育败育途径。 2.超薄切片观察花药Ca~(2+)分布:运用焦锑酸钾沉淀法研究了不育系和保持系花药在发育过程中小孢子及绒毡层细胞Ca~(2+)分布的结果表明,在花粉发育过程中,保持系的花粉胞质内部基本无Ca~(2+)的沉淀,后期花粉外壁出现Ca~(2+)的沉淀。保持系早期绒毡层细胞形态正常,胞内有少量Ca~(2+)沉淀。后期绒毡层细胞开始凋亡,胞质凝集,胞内出现大量Ca~(2+)的颗粒;不育系花粉在发育的早期败育,胞质液泡化,内部出现大量Ca~(2+)的沉淀。不育系绒毡层细胞形态正常,没有出现退化现象,胞内无Ca~(2+)的沉淀。值得注意的是,我们发现在不育系花药中绒毡层和小孢子之间出现大量Ca~(2+)颗粒,在某些时期还形成一个含Ca~(2+)极为丰富的“Ca~(2+)区带”。这种现象在以前尚未有过类似报道。通过对保持系和不育系花药在不同发育时期的Ca~(2+)分布的比较观察,我们认为不育系花药绒毡层细胞与小孢子中这种Ca~(2+)的异常积累可能与雄性不育相关。
闫俊杰[2]2014年在《水稻不育系及其保持系的蛋白质组学和miRNA研究》文中指出细胞质雄性不育(Cytoplasmic Male Sterility, CMS)在植物中是一种广泛存在的现象,它的特征是在植株的生殖发育过程中雄蕊不能产生有功能的花粉,雌蕊发育正常。根据这一特征,细胞质雄性不育系被广泛用来制作杂交种子,省去了人工去雄的繁琐过程。研究表明,细胞质雄性不育是由细胞核基因和细胞质基因的不兼容而引起的,因此细胞质雄性不育也被用作研究核质互作的模型。在本研究中,以本实验室构建的不育系梅香A(MxA)和保持系梅香B (MxB)为材料,进行了蛋白质组学、miRNA的研究,以期对败育过程中细胞代谢调控、细胞质的反馈调节等细胞通路的变化有一个深入的了解,从而加深我们对于紫稻型细胞质-梅香A雄性不育机理和代谢调节的认识。此外,本研究还引入了分子动力学模拟等技术来研究水稻中蛋白质相互作用的分子机理。本研究的主要研究结果如下：1、对不育系MxA和保持系MxB的细胞学研究发现,MxA为碘败类型,DAPI染色的结果表明MxA其在小孢子发育的单核期败育。PCR分析表明,在MxA中有一个WA352的同源基因,测序显示它们只有两个碱基的差异,将其命名为ZD352。原核表达检测,ZD352蛋白可以诱导表达,并且不会致死大肠杆菌；在mRNA转录水平上,其广泛的表达于根、叶子、和幼穗中；而在蛋白质水平上则主要的在小孢子母细胞和减数分裂期细胞中累积。2、基于细胞学研究的结果,以MxA和MxB的单核期幼穗材料,对其蛋白质表达谱进行了iTRAQ定量蛋白质组学研究。结果表明,在两个材料中得到了688个蛋白的定量结果,设定MxA/MxB的蛋白质表达量>1.1或者<0.9为显着差异表达的阈值,发现有45个蛋白质发生了显着性的差异表达。在MxA中很多参与核糖体组装的蛋白质亚基发生了上调性的表达,而参与碳水化合物代谢,细胞应激反应,细胞代谢的很多蛋白则发生了下调表达。其中,有两个钙离子结合蛋白发生了下调表达。我们之前的研究表明,在不育系紫稻A的花药中游离的钙离子增加,说明钙离子在花粉败育过程中起着重要的调节作用。此外,研究还发现不育系幼穗线粒体中ROS水平更高,预示着ROS也可能参与了对细胞核基因的表达调控过程。3、已有的研究表明miRNA在植物生殖发育过程中发挥重要的调节作用。为了研究miRNA和CMS发生的关系,本研究通过高通量测序比较了不育系MxA和保持系MxB单核期幼穗miRNA的表达谱差异,结果显示有24个已知的miRNA发生了显着性差异表达,这些miRNA广泛参与了各种细胞代谢途径包括生殖发育调控、胁迫应答等,我们推测这些miRNA可能参与调控了CMS的发生。此外本研究还在幼穗中发现了miRNA编辑的现象。4、在细胞中,蛋白质常常和其它的蛋白质分子相互作用而调控各种生命活动。在本研究试图通过结构生物学借助分子动力学模拟的手段来研究水稻中Hsp90和Sgtl两个蛋白质相互识别的分子机理,分子动力学模拟和结合自由能计算表明有叁对非常强有力的盐桥作用对于维系Hsp90和Sgtl的互作非常重要。此外,Sgtl的Tyr173对于Hsp90和Sgtl之间的相互作用也非常重要,它既参与到和Hsp90的疏水相互作用,同时又有氢键作用。
刘树楠[3]2009年在《杂交水稻花粉发育超微结构比较与多光谱显微定量分析》文中研究指明植物雄性不育是水稻等农作物利用杂种优势的理论基础。在农作物遗传育种的研究领域中,一个基础性的研究课题就与水稻的雄性不育的有关。本文的研究是采用透射电子显微镜制片技术,以自主选育的云南紫稻和珍汕97为实验材料,比较观察了水稻花药发育的全过程以及两种水稻不育系花粉败育的不同特征；采用武汉大学自主开发研制的多光谱显微成像仪,首次将多光谱显微成像技术和细胞内生物大分子物质的定量分析研究结合起来,以珍汕97、紫稻、红莲、马协等四种不同的水稻胞质不育系及它们对应的保持系为材料,跟踪研究了水稻花药发育过程中,不育系和保持系花粉细胞内的多糖物质含量的动态变化规律。得到了如下实验结果：1、在小孢子发育的早期,云南紫稻不育系的小孢子细胞质中就出现了空腔,出现败育的迹象。和珍汕97不育系相比较,云南紫稻不育系败育的时期出现得更早,这说明云南紫稻不育系应该是一种新型的胞质不育类型,即为无花粉型败育。在云南紫稻不育系花药败育的时期,花粉囊壁的绒毡层细胞结构完整,细胞之间的界限分明,细胞胞质浓厚,没有出现败育的迹象。绒毡层细胞的正常发育,可能是引起云南紫稻不育系发生败育的原因之一。2、研究表明,在花药发育的过程中,保持系花粉细胞中多糖物质的多光谱曲线呈V字型,V字形的低谷出现在550nm-570nm波长范围内。不育系的花粉细胞在发生败育时,在420nm处多糖物质的多光谱曲线会出现显着的下降。这一显着的下降信号与水稻不育系花粉败育的时期相关联,可以作为判定水稻不育系败育时期的依据之一。3、在水稻保持系花药的发育过程中,花粉细胞中多糖物质含量的动态变化规律为：自花粉母细胞减数分裂到形成四分体细胞,花粉细胞中PAS反应染色较深,多糖颗粒小而丰富,花粉细胞中多糖物质的含量也稍有升高；在单核花粉细胞中,多糖颗粒大而显着,花粉细胞中多糖物质的含量开始降低；到了单核晚期,花粉细胞中多糖物质的含量达到最低值,在二核期细胞中,多糖颗粒开始融解,多糖含量升高；到成熟期,可育的水稻花粉发育成熟,在花粉粒中积累大量的淀粉颗粒,多糖物质(淀粉)含量也达到了最大值。4、与水稻保持系相比,不育系不仅在光谱曲线上,而且在多糖物质的含量上,均存在着很大的差别。在花粉母细胞和四分体时期,不育系细胞中多糖物质的含量稍高于保持系细胞中的含量,但它们之间差异不显着。在单核早期的花粉中,.红莲、马协、珍汕97不育系细胞中多糖物质的含量与保持系相比,它们之间的差异不显着,但是在紫稻不育系细胞中多糖含量明显高于保持系细胞中的含量。在单核边位期和二胞花粉期,红莲和马协不育系细胞中多糖物质的含量明显低于保持系细胞中的含量。到败育时期,败育花粉中多糖含量明显低于成熟花粉中的含量,且差异显着。此外,以黑叁棱属的两个代表种(密序黑叁棱(Sparganium glomeratum)和小黑叁棱(Sparganium simplex)为研究材料,采用FIASCO磁珠富集法,开展了一些有关核基因组SSR引物开发的研究工作。合成了54对密序黑叁棱基因组SSR引物,从中筛选出了13对有效的SSR引物,其中有9对引物为多态性SSR引物。利用这9对引物,我们在5份小黑叁棱材料中进行了跨种检测,其中有7对SSR引物在种间扩增成功,另外2对引物没有得到扩增的产物。运用筛选到的9对多态性SSR引物,对采自东叁省不同地区的45份密序黑叁棱进行了种质资源的群体遗传学分析,结果表明,分布在相同区域的密序黑叁棱材料聚类在一起,而分布在不同地域的材料则聚类在单独的分枝上。这些基础性的研究工作,对揭示黑叁棱属植物的地理分布特点,物种的遗传多样性,以及遗传变异与进化的关系都具有一定的参考价值。
杨鹏[4]2013年在《棉花晋A细胞质雄性不育系与保持系差异转录组和蛋白质组研究》文中研究说明棉花(Gossypium L.)是一种重要的经济作物,具有明显的杂种优势。细胞质雄性不育(cytoplasmic male sterility,CMS)不仅是植物杂种优势利用的基础,而且也是细胞质遗传、核质互作、细胞质对植物小孢子发育影响、环境对线粒体表达调控以及物种进化等遗传学研究的好材料。棉花花药发育涉及在孢子体和配子体组织中表达的多种基因的相互作用。然而,目前的研究只发现了少量的具体参与花粉发育过程的基因,而对于雄性不育的分子机理更是知之甚少。植物雄性不育的利用,促进了采用转录组与蛋白质组分析相结合来研究花药的发育。在本研究中,我们以晋A细胞质雄性不育系及其同核异质保持系在小孢子败育关键时期的花蕾为研究材料,将采用新一代测序技术的转录组研究(NGS)和采用双向凝胶电泳和质谱技术的蛋白质组研究相结合,对棉花CMS不育系JA及其同核异质保持系JB花药发育的差异表达基因和蛋白质进行综合研究,旨在找出与雄性不育相关的关键基因和途径。研究结果如下:1、本研究中,我们首次进行了棉花细胞质雄性不育系JA及其保持系JB在造孢细胞时期和小孢子母细胞时期的花蕾转录组分析,通过测序获得了2.8×107个reads,组装成的86093个基因(unigene),平均长度为755bp。2、对所获得的unigene进行生物信息学分析:(1)利用Nr、Nt、KOG、Swiss-Prot、KEGG和GO数据库进行基因功能注释;(2)根据NR、SwissProt、KEGG GENES的优先级顺序将unigene与以上蛋白库作blastx比对,根据最佳比对结果确定了36257个unigene的ORF读码框,并根据标准密码子表确定其CDS及编码的氨基酸序列;将与以上数据库比对不上的unigene用estscan(3.0.3)软件预测其CDS序列,共有28323个基因得到预测;(3)本研究共检测到518108个SNP位点、38345个Indel位点和17460个SSR基因位点,为开发标记设计了16496对PCR引物;(4)对不育系JA和保持系JB在花粉发育的造孢细胞和小孢子母细胞时期的基因表达数进行统计,并对不同材料在花粉发育的同一阶段以及同一材料在花粉发育的不同阶段的基因表达量进行了分析。结果显示:在花粉发育的两个阶段,分别有5457(SS)、3178(MS)和3608(SS)、3999(MS)个基因分别在JA和JB中差异表达。与保持系相比较,JA-CMS在造孢细胞时期共检测到709个差异表达基因,其中上调表达的基因293个,下调表达的基因416个;在小孢子母细胞时期共644个差异表达基因,其中上调表达的基因263个,下调表达的基因381个;JA在花粉发育的两个不同阶段(B3与B2)相比,差异表达基因共有17个,其中上调表达的基因有8个,下调表达的基因有9个;jb在花粉发育的两个不同阶段(k3与k2)相比,差异表达基因共有38个,其中上调表达的基因有29个,下调表达的基因有9个;(5)通过对dge进行层次聚类,k-means聚类和som聚类结果进行分析,发现ja细胞质雄性不育与能量代谢相关基因、碳水化合物代谢相关基因、转录因子、氨基酸代谢相关基因和信号转导相关基因可能相关;(6)对dge进行go和kegg富集分析,发现ja不育系与保持系相比,在ja花药发育的造孢细胞时期和小孢子母细胞时期的花蕾中氧化还原酶和双加氧酶活性下降,而与光合作用和黄酮类化合物的合成相关基因则更多地表现为上调表达。3、随机选取7个差异表达基因,应用荧光定量pcr对其进行表达模式验证,结果表明尽管实时定量pcr分析差异基因在表达量上有些差异,但基因总的表达趋势与转录组测序的结果完全一致。4、采用酚提取法分别提取棉花细胞质雄性不育系ja和保持系jb在造孢细胞时期和小孢子母细胞时期的花蕾总蛋白质。在对花蕾组织2-de电泳优化的基础上,采用18cm、ph3-10nl的ipg预制胶条,800ug的蛋白上样量,考马斯亮蓝染色,获得高清晰度和分辨率的蛋白质表达图谱,为棉花蛋白质组学的研究奠定了实验基础。5、不育系与保持系在花药发育的两个阶段棉花花蕾蛋白质组均得到了重复性好的凝胶图谱,pdquest8.0.1软件分析表明,不育系ja在花药发育的造孢细胞时期(b2)和小孢子母细胞时期(b3)的花蕾总蛋白斑点数分别为1505和1540;保持系jb在花药发育的造孢细胞时期(k2)和小孢子母细胞时期(k3)的花蕾总蛋白斑点数分别为1554和1540。这些蛋白质斑点的分子量分布在10-100kda,等电点分布在3-10。6、通过对棉花ja-cms和保持系造孢细胞时期和小孢子母细胞时期花蕾蛋白质组的差异定量研究和质谱分析,共鉴定了15个在两系间显着差异表达的蛋白质。用mascot搜索ncbinr绿色植物蛋白质数据库,并进行kegg和go功能分析。这些蛋白质分别参与能量代谢(3)、碳水化合物代谢(3)、碳代谢(3)、蛋白质和氨基酸代谢(1)、以及类脂(化合物)代谢(1)、花粉发育(1)、应激反应(1)、脂肪酸代谢(1)和一个线粒体上未知功能蛋白,分别位于线粒体、叶绿体、细胞核和膜上。7、棉花花药的发育是细胞中多个基因组相互作用、多条代谢途径的基因差异表达的结果。转录组和蛋白质组相结合的系统生物学研究方法将候选差异蛋白质和候选差异转录本相结合,可以更直接地反映这些基因产物的表达丰度和功能。差异表达蛋白质结合差异表达转录本的鉴定为全面解析cms提供了一条有效的研究方法。8、研究分析了线粒体基因的rna编辑,采用atp4、atp6、atp8、atp9和coxⅠ等5个基因的特异引物对JA-CMS及其保持系和恢复系进行PCR扩增,对所获得基因进行不育系、保持系、恢复系DNA序列比对,并且对atp4、atp9、atp8和coxⅠ基因的不育系与保持系cDNA序列进行RNA编辑分析。结果表明与其它双子叶植物相比,棉花atp4、atp8和atp9基因的RNA编辑具有保守性,而coxⅠ基因具有更多的编辑位点,并且认为coxⅠ基因的编辑不完全与雄性不育的产生相关。
杨淑娟[5]2007年在《宁夏枸杞花药发育过程中钙的分布特征》文中研究说明钙是植物生长发育过程中所必需的,它不仅是一种大量营养元素,而且也是一种转导许多生理过程的胞内信号分子,有很多重要的生理功能。高等植物的有性生殖是一个非常复杂的发育过程,包括一系列连续的发育事态。钙参与植物有性生殖过程中的许多环节,在被子植物有性生殖过程中钙的功能也越来越多地被揭示出,但是早期的实验主要集中在:1.离体条件下钙对花粉萌发和花粉管生长的影响;2.花粉管顶端梯度分布的游离钙与花粉管生长的关系;3.开花前后胚珠中的钙与花粉管定向生长的关系。在雄性生殖系统中,花药的发育和钙的分布特征存在什么关系?这方面的报道还比较缺乏。本实验采用焦锑酸盐沉淀法,以宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)为实验材料,对其花药发育过程中钙的分布特征进行了系统的研究,结果显示一个与花药发育事件相关的分布特征:孢原细胞时期,花药中基本上没有钙颗粒。到造孢细胞及小孢子母细胞时期,在胼胝质壁的表面积累了大量的钙颗粒,花药中的钙颗粒开始增加。小孢子母细胞准备减数分裂时,钙颗粒不断地进入胼胝质壁及小孢子母细胞中。四分体时期,胼胝质壁中钙颗粒进一步增加。当小孢子从四分体游离出来后,其周围的药室基质中充满了钙颗粒。随着花粉外壁的形成,在花粉外壁及萌发孔部位特异性地聚集了大量钙颗粒。在小孢子液泡化到最后形成大液泡的过程中,小孢子细胞质中的钙颗粒明显减少。很可能是因为Ca2+被集中到液泡中并被稀释,不能形成钙颗粒。当小孢子分裂形成二胞花粉后,在二胞花粉的大液泡中又出现了许多钙颗粒。接着大液泡缩小、分解至最后完全消失,在这个过程中花粉细胞质、细胞核及小液泡中的钙颗粒再次增加。同时在萌发孔的外方出现许多钙颗粒。至花粉完全成熟时,细胞质中基本上已看不到钙颗粒。钙在花粉发育过程中显示出时空分布特征与花粉发育中的生物学事件密切相关。枸杞的花药壁由表皮、药室内壁、中层、绒毡层四层细胞组成。在花药发育过程中,表皮、药室内壁、中层细胞高度液泡化,细胞质中的钙颗粒一直比较少,而绒毡层中分布的钙颗粒变化非常明显。枸杞绒毡层为双重起源,呈现出二型性,分为药隔绒毡层和药壁绒毡层。这两种绒毡层在钙颗粒分布上存在较明显的差异:药隔绒毡层中分布的钙颗粒一直较药壁绒毡层的多。小孢子母细胞时期,在绒毡层细胞的内切向壁上分布了较多的钙颗粒,到了四分体时期,绒毡层细胞内的钙颗粒明显增加,药室基质内的钙也随着明显增多。到小孢子液泡化时期,药隔绒毡层细胞先于药壁绒毡层开始解体,解体后的内含物及钙颗粒释放到药室中参与花粉粒的形成。
刘宏高[6]2010年在《一种鲁棒有序的mRNA差异显示新方法的建立及应用》文中进行了进一步梳理全基因表达谱方法是后基因组时代里生命科学研究领域的核心方法之一,发展性价比高和适用性广的全基因表达谱方法非常必要。目前的全基因表达谱方法可分为基于测序、基于杂交和基于凝胶电泳策略叁大类。测序类方法可提供样本的序列及丰度,但全长测序成本太高,而标签测序难以准确定位。杂交类的cDNA微阵列法获得了广泛的应用。虽然很成功,但它仅适用于具备基因组或cDNA数据库的少数物种,且只能检测已知的基因或转录本(”封闭性”)。这两类方法都需要昂贵的实验平台。凝胶类方法相对测序类和杂交类方法具有诸多的优点：如它只需要RT-PCR、DNA测序胶电泳、克隆和测序等常规分子生物学技术和常规仪器和试剂,因而适用面广；它不需要已知序列信息,因而适用于任何真核物种和任何转录本(”开放性”)；借助PCR可获得高灵敏度；通过一定数量的引物组合可达到高通量要求；两个或多个样本的多态可在同一凝胶相邻泳道中直观显示和比较；差异转录本衍生片段(Transcript-derived fragment, TDF)被回收、重扩增和克隆测序后可用于后续实验和分析等。(1)本研究基于凝胶电泳的基础建立了一种鲁棒有序的mRNA差异显示新方法。它通过巧妙的引物设计、poly(dT:A)置换技术、磁珠法分离技术和依赖于4碱基的覆盖率解决方案,充分结合两大基于凝胶的全基因表达谱方法mRNA差异显示和cDNA-AFLP方法的优点,并以有序的、无冗余的方式,获得了较高覆盖率。其基本原理为：利用5'-biotin-MlyI-AcuI-T16-V引物(bmaT16V引物)和样本的总RNA反转录合成双链cDNA。MspI酶切双链cDNA,连接MspI接头,利用磁珠法选择性地分离poly(A:T)端带生物素的酶切片段,洗脱其余片段以去除冗余。然后用Acul再次酶切分离出的片段,并利用磁珠法吸附新产生的酶切片段中带生物素的的部分即poly(dT:A)端,而释放出来的含不带生物素的酶切片段的上清被收集起来并连接AcuI假接头。以该连接产物作为常规cDNA-AFLP方法的模板进行预扩增和选择性扩增,并利用DNA测序胶电泳分离扩增片段,再通过银染的方法显示基因表达图谱,通过比较获得差异TDF片段。差异TDF片段可被切下回收、重扩、克隆和测序,供进一步分析。和mRNA差异显示方法相似,RoDD方法锚定1mRNAA的3'-UTR。从实验技术的角度而言这一区域的可靠性最好,从差异表达研究方法的角度而言非翻译区的多态性最为丰富。而RoDD的基本原理与实验步骤几乎同于基于磁珠法的cDNA-AFLP方法,因而它具有PCR效率高,PCR可靠性好、重复性好,假阳性少和无冗余等优点。鉴此,我们把它命名为鲁棒有序的mRNA差异显示方法(Robust ordered mRNA differential display, RoDD)。(2)为了对该方法进行评估,我们建立了简化的数学模型计算,利用perl语言编写的计算机软件进行模拟,还利用基因组、cDNA信息较完备的栽培稻日本晴(Oryza sativa L. ssp.japonica cv. Nipponbare)幼苗的叶和根为材料进行简单的验证实验。数学模型和计算机软件模拟结果显示RoDD方法分别覆盖了己发表的人类转录本92.79%和82.13%,水稻转录本的92.75%和84.56%,高于任一同类的方法。在以日本晴幼苗的叶和根为材料的RoDD方法验证实验中,我们通过32个PTT接头引物组合的选择性扩增在叶和根中分别得到1650(其中含552差异TDF)和1576(其中含478差异TDF)扩增条带,共计2128；据此推测通过全部的196个PTT引物组合可分别覆盖叶和根中的10106和9653扩增条带,共计13000种；同理,30个PNN组合选择性扩增分别在叶和根中得到1274(其中含368差异TDF)和1260(其中含354差异TDF)扩增条带,共计1628种条带,据此推测通过全部的240个PNN引物组合可分别覆盖叶和根中的7803和7717条带,共计13000种。合并起来,我们推测在水稻的叶和根中分别可获得17909和17370条带,并进一步推测在叶和根中分别有17909和17370个基因表达；同时通过432个引物组合可覆盖两种组织中的26000种转录本。这证实了RoDD确实具有很高的覆盖率。我们随机挑取了40个转录本衍生片段(TDF)中,BLAST结果显示39个被定位在日本晴的cDNA数据库,半定量RT-PCR结果确定34个TDF片段呈阳性。这说明RoDD方法具有较高的可靠性。值得注意的同源搜索失败的唯一TDF片段却在多次半定量RT-PCR重复实验中表现阳性,因而它可能是尚未在日本晴发现或注释的新基因。另外,本研究中还设计了引物效率比较实验和缩微版的RoDD实验,证明了RoDD引物策略中PCR效率高、可靠性好等优势。(3)RoDD方法的应用。云南紫稻细胞质雄性不育系是本实验室育成的一种新的细胞质源的水稻雄性不育系,但其细胞质效应、雄性不育和育性恢复机理尚缺乏深入研究。利用同核异质系是研究细胞质差异最有效的途径之一,所以我们构建了云南紫稻细胞质源的雄性不育系梅香A与6种与梅香A细胞核背景相近、但细胞质类型(野败型、K型、D型、冈型、印水型和马协型)不同的近等核异质雄性不育系,并将RoDD方法应用于它们的全基因表达谱比较研究中,同时RoDD方法还被应用于珍汕97A和K17A与梅香B核置换过程中历代杂种全基因表达谱差异的比较。结果发现不同类型的细胞质对近等核的全基因表达影响的差异很小,核置换历代杂种表达谱差异也很小。我们推测这可能是因为它们同属孢子体细胞质雄性不育系统,具有相同的起源和协同进化历程。实验中我们还发现了几个梅香A、B相对其6种近等核异质雄性不育系以及梅香A、B两者之间的特征谱带,对这些谱带的深入研究可能在分子水平上为云南紫稻细胞质的独特性提供一些佐证。
参考文献：
[1]. 云南紫稻细胞质雄性不育系花药发育过程中钙离子的分布[D]. 陈小军. 武汉大学. 2004
[2]. 水稻不育系及其保持系的蛋白质组学和miRNA研究[D]. 闫俊杰. 武汉大学. 2014
[3]. 杂交水稻花粉发育超微结构比较与多光谱显微定量分析[D]. 刘树楠. 武汉大学. 2009
[4]. 棉花晋A细胞质雄性不育系与保持系差异转录组和蛋白质组研究[D]. 杨鹏. 河南农业大学. 2013
[5]. 宁夏枸杞花药发育过程中钙的分布特征[D]. 杨淑娟. 厦门大学. 2007
[6]. 一种鲁棒有序的mRNA差异显示新方法的建立及应用[D]. 刘宏高. 武汉大学. 2010
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