控制大豆长童期性状位点的挖掘与基因克隆

控制大豆长童期性状位点的挖掘与基因克隆

论文摘要

大豆[Glycine Max(L.)Merr.]是起源于温带地区的重要豆科作物。光周期反应是大豆纬度适应性的重要影响因素。温带地区的大豆品种在引种到低纬度地区时早熟并且产量降低。长童期(Long Juvenile)性状可以在短日照条件下延长大豆营养生长期并且提高大豆产量,使大豆可适应的纬度范围大大增加。目前对大豆长童期性状的研究并不详尽。本研究通过GWAS、QTL定位和图位克隆等手段挖掘控制大豆长青春期性状的位点,结果如下:1.以两个地点的短日照条件下检测的338份大豆种质资源的开花期数据作为表型数据,联合基因组重测序得到的基因型数据,对长童期性状进行全基因组关联分析。检测到两个稳定出现的长童期性状关联位点,分别位于6号和19号染色体,这两个位点均为尚未报道的位点。2.提出了一种使用多遗传群体联合简化重测序基因分型技术,快速定位QTL的策略。使用8个具有长童期性状的亲本和1个正常童期的亲本构建了 6个F2群体并在短日照条件下进行花期检测,联合简化重测序基因分型技术获得的高密度遗传图谱,发现了 7个与长童期性状相关的QTL,4个为尚未报道的位点,其中2个位点是在至少两个群体内重复出现的稳定位点,使用重测序数据和GO注释分析预测了这两个位点的候选基因。3.利用Paranagoiana(e6)×Harosoy(E6)群体在短日照条件下将E6基因定位到了一个239-kb的区间内,在区间内找到候选基因GmELF3,测序发现Paranagoiana中ELF3在第四个外显子插入了一个Tyl/copia样反转录转座子,导致翻译提前终止。通过互补试验证明ELF3是E6基因,e6是J基因的一种功能缺失型等位变异。本实验通过GWAS和QTL定位的方法各自找到了 2个新的与长童期性状相关的稳定位点,并且图位克隆了大豆长童期位点E6,证明E6由ELF3基因编码。本研究发现和克隆的控制大豆长童期性状的位点和基因对阐明大豆在低纬度地区的适应机制和低纬度地区的大豆育种具有重要意义。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 缩略词表
  • 第1章 绪论
  •   1.1 选题的背景与意义
  •   1.2 国内外研究进展
  •     1.2.1 光周期现象
  •     1.2.2 植物的光周期调控模型
  •     1.2.3 大豆主要生育期基因
  •     1.2.4 大豆长童期性状的研究进展
  •     1.2.5 大豆遗传图谱
  •     1.2.6 全基因组关联分析
  • 第2章 大豆长童期性状的GWAS分析
  •   2.1 实验材料
  •   2.2 实验方法
  •     2.2.1 开花期的统计
  •     2.2.2 SNP分型和群体结构分析
  •     2.2.3 全基因组关联分析
  •     2.2.4 关联基因分析及候选基因挖掘
  •   2.3 结果与分析
  •     2.3.1 开花期的统计
  •     2.3.2 测序数据统计
  •     2.3.3 系统发生树和主成分分析
  •     2.3.4 连锁不平衡分析
  •     2.3.5 QQ plot
  •     2.3.6 大豆长青春期性状的全基因组关联分析
  •     2.3.7 显著关联的SNP位点与已知长童期基因的比较分析
  •     2.3.8 显著关联位点的候选基因预测
  •   2.4 讨论
  • 第3章 大豆长童期性状相关位点的QTL定位
  •   3.1 实验材料
  •   3.2 实验方法
  •     3.2.1 开花期的统计
  •     3.2.2 DNA提取
  •     3.2.3 基因组测序
  •     3.2.4 遗传图谱构建
  •     3.2.5 QTL分析
  •     3.2.6 区间内变异信息分析
  •   3.3 结果与分析
  •     3.3.1 花期数据的分析
  •     3.2.2 QTL Mapping结果
  •     3.3.3 长童期候选基因分析
  •   3.4 讨论
  • 第4章 E6基因的图位克隆
  •   4.1 实验材料
  •   4.2 试验方法
  •     4.2.1 E6基因的精细定位
  •     4.2.2 E6基因的测序
  •     4.2.3 E6基因的3'RACE检测
  •     4.2.4 E6基因互补验证
  •     4.2.5 E6基因与大豆开花期基因的调控关系
  •     4.2.6 E6基因的分子标记
  •   4.3 结果与分析
  •     4.3.1 E6基因的精细定位
  •     4.3.2 E6候选基因克隆及测序分析
  •     4.3.3 互补植株表型
  •     4.3.4 近等基因系表型
  •     4.3.5 E6基因的表达及其与大豆开花期相关基因的表达分析
  •     4.3.6 E6位点在自然品种中的利用
  •   4.4 讨论
  •     4.4.1 E6的候选基因
  •     4.4.2 反转录转座子
  • 第5章 结论
  • 参考文献
  • 附录
  •   附表1 图位克隆引物
  •   附表2 基因表达检测引物
  • 作者简历
  • 攻读学位期间发表的学术论文
  • 致谢
  • 文章来源

    类型: 博士论文

    作者: 方超

    导师: 刘宝辉,李文华

    关键词: 大豆,长童期,全基因组关联分析

    来源: 中国科学院大学(中国科学院东北地理与农业生态研究所)

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,生物学,农作物

    单位: 中国科学院大学(中国科学院东北地理与农业生态研究所)

    分类号: S565.1;Q943.2

    总页数: 108

    文件大小: 7574K

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