导读:本文包含了白藜芦醇合酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:葡萄,白藜芦醇合酶,基因克隆,序列分析
白藜芦醇合酶论文文献综述
翟逸,刘钦松,吴永坤,马云,张念强[1]（2017）在《葡萄白藜芦醇合酶基因的克隆与生物信息学分析》一文中研究指出以葡萄总RNA为模板,利用RT-PCR的方法从葡萄中扩增获得一条白藜芦醇合酶基因完整的c DNA序列,命名为RS。利用生物信息学软件对其核酸和蛋白质序列进行分析,结果表明,该序列长1179 bp,与已报道的葡萄白藜芦醇合酶基因的序列相似性达到94%~99%,氨基酸序列相似性为96%~99%;RS基因编码392个氨基酸,氨基酸序列含有完整的芪合酶家族的特征序列GVLFGPGLT和活性中心序列GCYAGGTVLR;预测的分子量为42.78 k Da,理论等电点为6.57,不稳定参数为35.92,在分类上属于稳定性蛋白;二级结构主要以α-螺旋、无规则卷曲以及β-折迭为主,其中α-螺旋含量为44.13%、无规则卷曲含量为26.53%,β-折迭含量为17.66%。(本文来源于《食品工业科技》期刊2017年19期）
孙诗雯[2]（2017）在《葡萄白藜芦醇合酶基因的克隆及转化黄芪的研究》一文中研究指出白藜芦醇合成酶(Resveratrol Synthase,RS)是白藜芦醇(Resveratrol,Res)生物合成代谢途径中的限速关键酶。RS基因无论是在植物,还是在微生物中都实现了遗传转化与生产活性产物,并且在两种表达体系中获得的Res在生物合成代谢途径和表达调控方面均具有生物学活性。随着Res的需求日益增大,通过对有效成分的直接提取,已经远远不能满足对Res的需求,通过现代生物技术和基因工程技术对植物产生改良或者超量表达的途径来有效的提高生产Res这种活性成分已经成为了有效的途径和可行的策略。因此,利用转基因植物技术进行异源植物生产Res的研究前景广阔,同时通过转化RS基因达到协同作用的理念受到了人们广泛的关注。本实验利用基因工程技术克隆RS基因并进行生物信息学分析,再通过农杆菌介导法将葡萄中克隆的RS基因转入黄芪中,由于黄芪中主要有效成分黄酮和白藜芦醇的生物合成途径都从苯丙氨酸合成途径开始,有相同的合成过程,所以选择黄芪为受体材料,不仅可以探索RS基因转化异源植物黄芪,达到异源植物生产白藜芦醇的可能,并为黄芪转基因育种提供技术支持;更可以提高黄芪抗性,进一步佐证白藜芦醇合成酶的功能,为中药现代化提供了有价值的理论参考。本论文获得了以下研究结果:1.RS基因编码一个含310个氨基酸残基的蛋白质,经Blast2go软件分析该基因编码白藜芦醇合成酶。2.成功构建了RS基因的表达载体:p BR121-RS并利用农杆菌遗传转化法对黄芪外植体进行感染,共获得抗性芽204棵,经过生根培养、炼苗、移栽后,共获得11株转基因阳性黄芪植株。3.经DNA、Southern blot杂交以及RT-PCR检测,获得3株转基因黄芪阳性植株,被证明RS基因完全整合到黄芪基因组中并表达产生白藜芦醇。4.经过比较转基因阳性植株和非转基因植株中的白藜芦醇含量,发现3株具有Southern blot杂交信号的阳性植株比非转基因植株的白藜芦醇含量高,其中黄芪非转基因植株的白藜芦醇含量为2029.46μg/g,而叁颗黄芪转基因植株的白藜芦醇含量分别为2998.32μg/g、3854.66μg/g、3989.77μg/g,分别提高了48.23%、91.27%和96.59%。本研究建立了黄芪再生及转化体系,并将来源于巨峰葡萄的RS基因成功的转入黄芪中进行表达,获得黄芪转基因阳性植株,这不仅可以探索RS基因转化异源植物黄芪,达到异源植物生产白藜芦醇的可能,并为黄芪转基因育种提供技术支持;更可以提高黄芪抗性,进一步佐证白藜芦醇合成酶的功能,为中药现代化提供了有价值的理论参考。(本文来源于《吉林大学》期刊2017-06-01）
张丽,郭丽,曲红玉,李爱歆,高山[3]（2016）在《小凹蛋白-1对内皮细胞损伤模型中内皮型一氧化氮合酶及一氧化氮表达的影响及白藜芦醇的作用机制》一文中研究指出目的探讨在人脐静脉内皮细胞损伤模型中小凹蛋白-1的表达情况及对内皮型一氧化氮合酶(e NOS)和一氧化氮(NO)表达的影响,研究白藜芦醇的作用机制。方法利用同型半胱氨酸诱导内皮细胞损伤模型,采用siRNA法抑制小凹蛋白-1的表达,采用Western印迹、RT-PCR及化学发光法测定小凹蛋白-1、e NOS和NO的表达情况;同时探讨白藜芦醇对e NOS和NO的表达影响。结果人脐静脉内皮细胞损伤模型中小凹蛋白-1表达升高,e NOS及NO表达降低;siRNA技术沉默小凹蛋白-1后e NOS及NO表达升高;siRNA技术沉默小凹蛋白-1后白藜芦醇对e NOS及NO的表达无影响。结论小凹蛋白-1一定程度上对e NOS及NO的表达有抑制作用,白藜芦醇发挥药理作用需要通过小凹蛋白-1介导。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2016年19期）
张晓丽,秦晨亮,代红军[4]（2016）在《半定量RT-PCR法检测赤霞珠葡萄白藜芦醇合酶STS基因的表达》一文中研究指出以赤霞珠葡萄(Vitis vinifera L.)为材料,以Actin基因为内参,采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测葡萄果实发育过程中白藜芦醇合酶(STS)基因表达量的变化,以期建立适于检测该基因表达的RT-PCR试验体系。结果表明,在退火温度58℃,扩增循环31次的时候,STS基因能够进行较好的扩增。在赤霞珠葡萄浆果发育的过程中,花后20、50 d STS基因表达量较少,在花后80 d表达量增到最大,花后110 d又降低。(本文来源于《湖北农业科学》期刊2016年03期）
夏海武,曹慧,王效忠[5]（2015）在《桑树白藜芦醇合酶基因全长克隆及序列分析》一文中研究指出根据已知的其他物种白藜芦醇合酶c DNA保守序列设计引物,用RT-PCR技术从桑葚中扩增获得白藜芦醇合酶基因部分c DNA序列,再用RACE技术获得其两端序列,并拼接得到完整的1 442 bp白藜芦醇合酶基因。经序列分析发现,桑树白藜芦醇合酶基因开放阅读框长1 170 bp,编码389个氨基酸,氨基酸序列含有芪合酶家族特征信号区GVLFGFGPGLT和活性中心序列GCFAGGTVLR;该基因与花生芪合酶基因的核苷酸序列同源性高达82.82%,氨基酸序列的同源性高达87.15%。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2015年04期）
郭辉力,罗在柒,杨亚东,杨明峰,吕鹤书[6]（2014）在《两种不同植物来源白藜芦醇生物合成关键酶——芪合酶催化效率比较》一文中研究指出白藜芦醇是一种天然植保素,且具有特殊的药理和保健功能,芪合酶(Stilbene synthase,STS)是该化合物生物合成的关键酶和限速酶。白藜芦醇存在于有限几种植物且含量差异很大,虎杖中白藜芦醇含量比葡萄、花生高1 000倍以上,推测不同STS的催化能力有可能是白藜芦醇含量差异的原因之一。为验证上述推测,文中通过overlap PCR技术从葡萄叶片基因组DNA中克隆得到葡萄STS基因,连同前期工作中获得的虎杖STS基因(PcPKS5),进行了原核表达分析。诱导表达产物经过Ni2+亲和柱纯化和PD-10柱脱盐后,均得到分子量约43 kDa的可溶性纯化蛋白。酶促产物分析结果表明,两种酶催化产物均为白藜芦醇。酶动力学分析表明,虎杖STS催化效率(Kcat/Km)是葡萄STS的2.4倍。文中从植物类型Ⅲ聚酮化合物合酶(Polyketide synthase,PKS)超家族催化活性位点和保守位点角度分析了造成上述两种酶活性产生差异可能存在的原因。(本文来源于《生物工程学报》期刊2014年10期）
潘晶晶,潘华晔,严珍珍,叶甫云,张耀洲[7]（2014）在《利用家蚕杆状病毒表达系统表达葡萄白藜芦醇芪合酶基因》一文中研究指出通过提取葡萄幼叶总RNA,用RT-PCR的方法获得白藜芦醇芪合酶基因,并将其成功克隆到pFastBac HTA中,获得重组pFastBac HTA-STS载体,转化DH10Bac大肠杆菌感受态细胞,筛选获得重组Bacmid DNA后转染家蚕BmN细胞,进一步筛选获得重组杆状病毒,重组病毒接种家蚕蛹,工程蚕蛹匀浆后经初步纯化收获粗酶液,利用粗酶液对葡萄提取液进行转化,体外生物合成白藜芦醇,提取液中的白藜芦醇含量显示出明显的上升。该研究为体外生物合成白藜芦醇提供了新途径。(本文来源于《药物生物技术》期刊2014年02期）
刘聃璐,林拥军[8]（2014）在《葡萄白藜芦醇合酶基因转化水稻的研究》一文中研究指出将来源于2个葡萄品种的白藜芦醇合酶基因以组成型表达的强启动子Ubiquitin驱动,并利用农杆菌介导的遗传转化引入粳稻品种中花11中。通过对单拷贝转基因家系基因表达量及白藜芦醇目标物的检测,发现大多数转基因家系的外源基因可稳定表达,但检测到的最终产物不是白藜芦醇,而是白藜芦醇苷(亦称云杉新苷),最高检出量达到了10.26μg/g,是野生型对照的1 000倍,推测这是在生成白藜芦醇的基础上,水稻内源的糖基转移酶作用的结果。虽然经抗病检测发现转基因植株并没有对稻瘟病菌表现出明显抗性,但是高含量的云杉新苷转基因家系可以作为提升水稻潜在营养价值的材料进行使用。(本文来源于《华中农业大学学报》期刊2014年02期）
郭辉力,罗在柒,杨亚东,马兰青,王有年[9]（2013）在《葡萄白藜芦醇合酶基因VvSTS的克隆及其在原核中的表达》一文中研究指出白藜芦醇是一种含有芪类结构的非黄酮类多酚化合物,存在于少数几种植物中,是一种植保素,同时具有多种药理和保健功能,如抗肿瘤、心血管保护、抗氧化功能等。白藜芦醇合酶是催化合成白藜芦醇的关键酶,为进一步验证葡萄白藜芦醇合酶基因的功能,比较其与其它物种白藜芦醇合酶催化活性的差异,筛选高活性表达白藜芦醇的基因。以‘京玉'葡萄为材料,从其叶片中提取基因组DNA,以其为模板,通过Overlap-PCR技术克隆得到葡萄白藜芦醇合酶(stilbene synthase,STS)基因。将回收的目的基因连接到克隆载体pMD18-T上,经酶切、测序对克隆基因进行鉴定,结果表明STS基因片段大小1 176 bp,编码392个氨基酸。(本文来源于《中国园艺学会2013年学术年会论文摘要集》期刊2013-10-20）
廖静文,郭丽琼,林俊芳,游楚镇[10]（2013）在《白藜芦醇合酶基因遗传转化杏鲍菇的研究》一文中研究指出目的:研究利用杏鲍菇作为生物反应器表达白藜芦醇。方法:以杏鲍菇菌株Pe18和P811为材料,以潮霉素浓度梯度对杏鲍菇原生质体与菌丝体对潮霉素的敏感浓度进行测定。采用PEG介导法将白藜芦醇合酶基因(rs)和潮霉素抗性基因(hph)共转化进杏鲍菇的原生质体中,采用潮霉素筛选与PCR扩增对拟转化子进行筛选鉴定。结果:Pe18和P811菌株的原生质体对潮霉素的最低敏感浓度分别为20μg/mL和10μg/mL,两菌株的菌丝体对潮霉素的敏感性均为160μg/mL;90个拟转化子中有30个同时整合了两个基因。结论:杏鲍菇不同菌株的原生质体的潮霉素敏感性不同,不同菌株菌丝体的潮霉素敏感性相同,相同菌株的原生质体和菌丝体的潮霉素敏感性不同,rs和hph两个基因在杏鲍菇中的共转化率为33%。(本文来源于《生物技术》期刊2013年05期）
白藜芦醇合酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
白藜芦醇合成酶(Resveratrol Synthase,RS)是白藜芦醇(Resveratrol,Res)生物合成代谢途径中的限速关键酶。RS基因无论是在植物,还是在微生物中都实现了遗传转化与生产活性产物,并且在两种表达体系中获得的Res在生物合成代谢途径和表达调控方面均具有生物学活性。随着Res的需求日益增大,通过对有效成分的直接提取,已经远远不能满足对Res的需求,通过现代生物技术和基因工程技术对植物产生改良或者超量表达的途径来有效的提高生产Res这种活性成分已经成为了有效的途径和可行的策略。因此,利用转基因植物技术进行异源植物生产Res的研究前景广阔,同时通过转化RS基因达到协同作用的理念受到了人们广泛的关注。本实验利用基因工程技术克隆RS基因并进行生物信息学分析,再通过农杆菌介导法将葡萄中克隆的RS基因转入黄芪中,由于黄芪中主要有效成分黄酮和白藜芦醇的生物合成途径都从苯丙氨酸合成途径开始,有相同的合成过程,所以选择黄芪为受体材料,不仅可以探索RS基因转化异源植物黄芪,达到异源植物生产白藜芦醇的可能,并为黄芪转基因育种提供技术支持;更可以提高黄芪抗性,进一步佐证白藜芦醇合成酶的功能,为中药现代化提供了有价值的理论参考。本论文获得了以下研究结果:1.RS基因编码一个含310个氨基酸残基的蛋白质,经Blast2go软件分析该基因编码白藜芦醇合成酶。2.成功构建了RS基因的表达载体:p BR121-RS并利用农杆菌遗传转化法对黄芪外植体进行感染,共获得抗性芽204棵,经过生根培养、炼苗、移栽后,共获得11株转基因阳性黄芪植株。3.经DNA、Southern blot杂交以及RT-PCR检测,获得3株转基因黄芪阳性植株,被证明RS基因完全整合到黄芪基因组中并表达产生白藜芦醇。4.经过比较转基因阳性植株和非转基因植株中的白藜芦醇含量,发现3株具有Southern blot杂交信号的阳性植株比非转基因植株的白藜芦醇含量高,其中黄芪非转基因植株的白藜芦醇含量为2029.46μg/g,而叁颗黄芪转基因植株的白藜芦醇含量分别为2998.32μg/g、3854.66μg/g、3989.77μg/g,分别提高了48.23%、91.27%和96.59%。本研究建立了黄芪再生及转化体系,并将来源于巨峰葡萄的RS基因成功的转入黄芪中进行表达,获得黄芪转基因阳性植株,这不仅可以探索RS基因转化异源植物黄芪,达到异源植物生产白藜芦醇的可能,并为黄芪转基因育种提供技术支持;更可以提高黄芪抗性,进一步佐证白藜芦醇合成酶的功能,为中药现代化提供了有价值的理论参考。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
白藜芦醇合酶论文参考文献
[1].翟逸,刘钦松,吴永坤,马云,张念强.葡萄白藜芦醇合酶基因的克隆与生物信息学分析[J].食品工业科技.2017
[2].孙诗雯.葡萄白藜芦醇合酶基因的克隆及转化黄芪的研究[D].吉林大学.2017
[3].张丽,郭丽,曲红玉,李爱歆,高山.小凹蛋白-1对内皮细胞损伤模型中内皮型一氧化氮合酶及一氧化氮表达的影响及白藜芦醇的作用机制[J].中国老年学杂志.2016
[4].张晓丽,秦晨亮,代红军.半定量RT-PCR法检测赤霞珠葡萄白藜芦醇合酶STS基因的表达[J].湖北农业科学.2016
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[6].郭辉力,罗在柒,杨亚东,杨明峰,吕鹤书.两种不同植物来源白藜芦醇生物合成关键酶——芪合酶催化效率比较[J].生物工程学报.2014
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[8].刘聃璐,林拥军.葡萄白藜芦醇合酶基因转化水稻的研究[J].华中农业大学学报.2014
[9].郭辉力,罗在柒,杨亚东,马兰青,王有年.葡萄白藜芦醇合酶基因VvSTS的克隆及其在原核中的表达[C].中国园艺学会2013年学术年会论文摘要集.2013
[10].廖静文,郭丽琼,林俊芳,游楚镇.白藜芦醇合酶基因遗传转化杏鲍菇的研究[J].生物技术.2013