导读:本文包含了预培养论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:村官,酵母,氮素,低氧,刺激物,导电性,高校。
预培养论文文献综述
王华,宋翰奇,陈文羽[1]（2019）在《新时代背景下高校大学生村官预培养的现实意义研究》一文中研究指出中国特色社会主义已经进入了新时代,在新时代的背景下,国家大力推进新农村建设,重点实施乡村振兴战略。新农村建设迫切需要人才作支撑,大学生村官作为新农村建设的生力军,发挥着十分重要的作用。高校作为大学生村官培育的重要基地,开展大学生村官预培养工作,培养全面发展的高素质大学生人才,对于促进社会主义新农村建设、促进高校毕业生充分高质量等方面都具有重要意义。(本文来源于《休闲》期刊2019年05期）
吴晓丹[2]（2019）在《HMGB1/TLR4/TRAF6/NF-κB介导自噬在高糖预培养hiPSCs-CM缺氧复氧损伤中的作用机制研究》一文中研究指出缺血心肌在梗死相关血管开通后可能导致比血管闭塞时更严重的急性损伤,这种再灌注后自相矛盾地加重组织损伤被称为心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)。今天尽管冠状动脉介入治疗策略取得了显着进展,但糖尿病仍然与急性心肌梗死后较高的死亡率有关。该疾病增加了心肌对缺血再灌注损伤的易感性,也通过阻断或激活细胞内信号通路来改变心肌对缺血预处理策略的反应,从而降低了细胞对死亡的抵抗力。糖尿病带来的改变成为了糖尿病患者急性心肌梗死后不良预后的基础。自噬是一种进化上的保守机制,细胞内蛋白和细胞器通过被称为自噬体的双膜囊泡隔离并被递送至溶酶体进行降解。发生在基础水平的自噬参与维持细胞的稳态,但自噬也可以被进一步由应激诱导,从而介导细胞中的保护性或损伤性功能。高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)广泛存在于哺乳动物体内,通过受损、凋亡、坏死细胞主动分泌和被动释放的方式发挥调节基因转录,参与DNA修复,介导炎症反应等生物学效应。HMGB1是否通过相关信号通路调控自噬介导了高糖条件下的缺血再灌注损伤有待进一步研究。人多能诱导干细胞分化的心肌细胞(human induced pluripotent stem cells derived cardiomyocytes,hiPSCs-CMs)由可由体细胞诱导分化而来,避免了直接获取人类原代心肌细胞产生的损伤及伦理问题,更好的模仿人体心肌细胞的生理状态,得到更加客观的实验结果。本研究通过构建高糖预培养hiPSCs-CM缺氧复氧(Hypoxia reoxygenation,H/R)模型,模拟糖尿病患者体内心肌缺血再灌注损伤环境,在细胞及分子水平上观察缺氧复氧后心肌自噬水平的变化规律和特点,探讨缺氧复氧致高糖预培养缺氧复氧后心肌损伤与心肌自噬水平变化间的内在联系,揭示HMGB1及心肌自噬在该条件下致心肌损伤中的生理及病理功能,明确其对心肌损伤的具体作用。第一部分高糖预培养hiPSCs-CM缺氧复氧模型的建立目的:使用人体尿液细胞重编程后获取hiPSCs,分化得到hiPSCs-CM后建立高糖预培养缺氧复氧模型。方法:收集健康男性志愿者尿液,分离培养原代尿液细胞。使用含有Oct,Sox2,Klf4和c-Myc四个重编程因子的仙台病毒转染原代尿液细胞,获得hiPSCs。对获得的hiPSCs采用体外拟胚体分化、体内畸胎瘤成瘤、免疫荧光染色等方法鉴定所获得的细胞系具有多能性。采用的化学成分明确的小分子定向诱导心脏分化策略,使用仅包含叁种化学成分的培养基(基础培养基RPMI1640,1-抗坏血酸2-磷酸和水稻衍生的重组人白蛋白)和小分子定向诱导,分化hiPSCs得到hiPSCs-CM。采用免疫荧光染色及流式细胞术鉴定所获得的心肌细胞。对获得的hiPSCs-CM进行高糖预培养及缺氧复氧建模,采用CCK8等方法对建模进行评估。结果:1.成功建立一株具有多潜能的人体尿液细胞来源hiPSCs。2.在使用无动物源成分小分子定向诱导心肌分化策略得到的心肌细胞具有完整的肌丝肌节结构,在纯化培养后其纯度能达到95%以上。3.在25mM、35mM、45mM葡萄糖浓度CDM3高糖培养24h下,hiPSCs-CM细胞活性不会减低(P>0.05)。4.不同浓度高糖预培养hiPSCs-CM后放入叁气培养箱缺氧2h,复氧复糖2h培养,所有组细胞与正常对照组细胞相比细胞活力均下降,以35mM组下降最为明显(均P<0.05)。结论:35mM葡萄糖浓度培养基预培养hiPSCs-CMs 24h后缺氧2h复氧2h后心肌细胞活力明显下降。第二部分自噬在高糖预培养hiPSCs-CM缺氧复氧损伤中的作用目的:研究hiPSCs-CM在高糖预处理后的自噬水平与心肌细胞线粒体功能、凋亡等损伤标志的关系。方法:采用的化学成分明确的小分子定向诱导心脏分化策略,使用仅包含叁种化学成分的培养基(基础培养基RPMI1640,1-抗坏血酸2-磷酸和水稻衍生的重组人白蛋白)和小分子定向诱导,分化hiPSCs得到hiPSCs-CM,持续培养30天后根据第一部分所得条件建立高糖预培养hiPSCs-CM缺氧复氧模型。采用自噬双标腺病毒检测自噬流、qPCR检测自噬相关指标mRNA表达量、Western blot检测自噬相关蛋白表达量;采用JC-1染色、线粒体DNA(mtDNA)、Mitotracker染色、Mitosox染色检测线粒体相关功能;采用qPCR检测凋亡相关基因mRNA、Western blot检测凋亡相关蛋白表达。结果:1.自噬双标腺病毒检测自噬流:H/R组比CON组RFP光点数增加,35H/R组比35CON组RFP光点数增加,35H/R组RFP光点比H/R组明显增加(P<0.05)2.BECN1-mRNA表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组明显增加(P<0.05)。SQSTM1-mRNA表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.05)。LC3-mRNA表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.05)。3.BECN1蛋白表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组明显增加(P<0.05)。SQSTM1蛋白表达水平:35H/R组比35CON组表达量显着降低(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组降低(P<0.05)。LC3Ⅱ蛋白表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组显着加(P<0.05)。4.JC-1染色:35H/R组比35CON组相对荧光强度比值降低(P<0.01)。35H/R组相对荧光强度比值比H/R组明显降低(P<0.05)。5.线粒体DNA(mtDNA)检测:35H/R组比35CON组mtDNA平均拷贝数降低(P<0.05)。35H/R组mtDNA平均拷贝数比H/R组明显降低(P<0.05)。6.Mitotracker染色流式细胞仪检测:35H/R组比35CON组单个细胞平均相对荧光强度降低(P<0.01)。35H/R组单个细胞平均相对荧光强度比H/R组明显降低(P<0.05)。7.Mitosox染色流式细胞仪检测:35H/R组比35CON组单个细胞平均相对荧光强度降低(P<0.05)。35H/R组单个细胞平均相对荧光强度比H/R组明显降低(P<0.01)。8.凋亡相关基因mRNA表达量检测:CASP3-mRNA:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.01),35H/R组表达量比H/R组明显增加(P<0.05)。BCL2-mRNA表达水平:35H/R组比35CON组表达量显着增加(P<0.01),35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.01)。BAX-mRNA表达水平:35H/R组比35CON组表达量显着增加(P<0.01),35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.01)。9.Western blot检测凋亡相关蛋白表达:BAX蛋白表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组显着加(P<0.05)。BCL2蛋白表达水平:35H/R组比35CON组表达量显着降低(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组显着降低(P<0.05)。10.流式细胞仪检测细胞凋亡:35H/R组比35CON组Q3象限细胞数明显增加(P<0.05)。35H/R组Q3象限细胞数比H/R组明显增加(P<0.05)结论:高糖预培养组hiPSCs-CM在缺氧复氧后自噬水平明显增加高于正常培养的心肌细胞,且该组细胞线粒体损伤、凋亡最为严重。第叁部分HMGB1/TLR4/TRAF6/NF-κB信号通路调控自噬参与高糖预培养hiPSCs-CM缺氧复氧损伤目的:研究HMGB1/TLR4/TRAF6/NF-κB信号通路在高糖预培养hiPSCs-CM缺氧复氧模型中的激活情况及其介导心肌损伤的具体作用机制。方法:采用的化学成分明确的小分子定向诱导心脏分化策略,使用仅包含叁种化学成分的培养基(基础培养基RPMI1640,1-抗坏血酸2-磷酸和水稻衍生的重组人白蛋白)和小分子定向诱导,分化hiPSCs得到hiPSCs-CM,持续培养30天后根据第一部分所得条件建立高糖预培养hiPSCs-CM缺氧复氧模型。采用HMGB1抑制剂Glycyrrhizin及自噬抑制剂3-MA对高糖预培养缺氧复氧组hiPSCs-CM进行干预。采用CCK8检测抑制剂作用浓度与效果;分别用采用免疫荧光染色检测自噬流、qPCR检测信号通路相关指标mRNA表达量、Western blot检测信号通路相关蛋白表达量;流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果:1.HMGB1/TLR4/TRAF6/NF-κB信号通路相关基因mRNA表达量检测:HMGB1-mRNA:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组明显增加(P<0.05)。TLR4-mRNA表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.01),35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.01)。TRAF6-mRNA表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组明显增加(P<0.05)。NF-κBmRNA表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.05)。2.信号通路相关基因蛋白表达水平检测:HMGB1蛋白表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.05)。TLR4蛋白表达水平:35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.05)。TRAF6蛋白表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.05)。NF-κB蛋白表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.05)。3.免疫荧光染色检测HMGB1:H/R组及35H/R细胞胞浆内出现HMGB1蛋白特异性荧光,35H/R组比H/R组胞浆内荧光表达量增加(P<0.05)。4.CCK8检测细胞活性确定抑制剂效果:Gly(0.15μM)组和3-MA(10mM)组均改善了高糖缺氧复氧细胞损伤(P<0.05),而Gly组和3-MA组细胞活力和H/R组无差异。5.HMGB1抑制剂在高糖预处理缺氧复氧组均可对于通路相关基因及蛋白表达量降低于35H/R组(P<0.05)。6.在原有分组的基础上增加HMGB1抑制剂Glycyrrhizin干预组(Gly组)和自噬抑制剂3-MA干预组(3-MA组),造模结束后对细胞进行自噬相关蛋白(BECN1、SQSTM1、BECN1)表达量检测。与35H/R组相比HMGB1结果:抑制剂Glycyrrhizin和自噬抑制剂3-MA均可使实验组BECN1、BECN1表达量均降低(P<0.05),SQSTM1表达量均增加(P<0.05)。7.HMGB1及自噬抑制剂对细胞凋亡的影响:在原有分组的基础上增加HMGB1抑制剂Glycyrrhizin干预组(Gly组)和自噬抑制剂3-MA干预组(3-MA组),造模结束后对各组细胞进行流式细胞仪检测细胞凋亡水平。与35H/R组相比,Gly组和3-MA组细胞早期凋亡水平均下降(P<0.05),而Gly组和3-MA组细胞活凋亡水平和H/R组无差异。结论:高糖的条件激活了HMGB1/TLR4/TRAF6/NF-κB信号通路,而该信号通路过度的激活自噬造成了心肌细胞的损伤。(本文来源于《广西医科大学》期刊2019-05-01）
冯晓[3]（2017）在《人才培养视角下高校党建工作路径研究——以大学生村官预培养工作为例》一文中研究指出从人才培养的视角论述了高校党建工作主动对接大学生村官预培养工作的必要性,在分析对接大学生村官预培养工作现状的基础上提出了建立"青马工程"与大学生村官预培养的衔接机制、面向基层就业的校地协同育人机制,并探索了构建高校党建工作与大学生村官预培养对接体系的有效途径。(本文来源于《广东石油化工学院学报》期刊2017年05期）
尹富华,朱能武,周家智,沈伟航,吴平霄[4]（2017）在《微生物燃料电池恒电流预培养阳极生物膜分析表征》一文中研究指出阳极性能是影响微生物燃料电池(Microbial Fuel Cells,MFCs)性能的关键因素之一,同时阳极的接种挂膜过程是影响微生物燃料电池启动效率的关键因素.因此,本课题组提出了预培养阳极作为微生物燃料电池的一种新型阳极的概念,在叁电极体系下,通过外加恒定电流预培养阳极,在不同条件下对阳极表面进行电化学选择和生物膜驯化以丰富生物膜结构和厚度.结果表明,阳极的性能与预培养电流大小密切相关,预培养阳极CF-4i(外加4 A·m-2电流密度)通过循环伏安法、塔菲尔曲线、电化学阻抗谱测试,性能好于其他测试组及对照组,装配阳极CF-4i的微生物燃料电池能实现最大功率密度968.20 m W·m-2,是对照组的2.53倍.同时,通过共聚焦显微镜观察发现,生物膜大体分两层,外层的活细胞及内层的死细胞,外层活细胞长在内层死细胞之上.这种结构分布表明,阳极生物膜中的活细胞部分绝大多数都分布于生物膜的外侧,而不是均布于整个阳极生物膜中;同时这也表明不是整个阳极生物膜都具有新陈代谢活性,但死亡的细胞可以继续积累在电极表面附近,活的外层膜负责电流的产生,而内层的死细胞作为一种导电基质.(本文来源于《环境科学学报》期刊2017年11期）
范忠伟[5]（2017）在《低氧预培养脂肪间充质干细胞复合小肠粘膜下层构建组织工程肌腱修复大鼠跟腱缺损的实验研究》一文中研究指出目的:体外研究已证实低氧培养脂肪间充质干细胞(ADMSCs)可以提高它的的生存能力以及向肌腱细胞分化的潜能,本研究通过对ADMSCs经低氧预培养后再复合小肠粘膜下层(SIS)修复大鼠跟腱缺损的体内研究探讨ADMSCs复合SIS构建组织工程肌腱修复肌腱缺损的可能性,并进一步探讨低氧是否能促进ADMSCs复合SIS治疗肌腱缺损的治疗效果,为治疗肌腱损伤提供一种新的理论依据。方法:从Sprague-Dawley大鼠的脂肪组织分离、提取ADMSCs,并对其进行纯化、传代培养,将第3代ADMSCs采用流式细胞仪检测ADMSCs表面标志物的表达。将第3代ADMSCs分成两组,分别置于常氧(20%02)与低氧(2%02)培养箱中培养7天,然后采用CM-DiI标记两组细胞,再将标记的ADMSCs复合SIS后在常氧条件下培养48小时。选取50只(250—300g)雄性SD大鼠,随机选取30只分成A、B、C叁组,每组10只,剩余20只大鼠左侧跟腱记为D租,右侧跟腱记为E组。将A组作为假手术组,将B、C、D、E四组大鼠双侧跟腱的外侧束与后束去掉约0.5cm,作为大鼠跟腱缺损的模型,其中将B组作为自体肌腱移植组、C组作为单纯SIS组、D组作为常氧ADMSCs复合SIS组、E组作为低氧ADMSCs复合SIS组,采用改良的Kessler缝合法将自体离断的跟腱或SIS缝在缺损的跟腱上,然后将所有实验组双腿行石膏外固定,四周后观察移植段的大体情况,并进行HE、masson染色、免疫组织化学检查、图像分析以及生物力学测试。结果:(1)术后4周移植段he染色结果显示:a组可见肌腱细胞稀少且呈细小长梭形,肌腱胶原纤维呈致密波浪状并朝一个方向排列;b组可见大量成纤维细胞,细胞外基质排列顺序紊乱;c组、d组以及e组的sis上均有长梭形细胞沿着细胞外基质朝一个方向有规律的排列,e组中长梭形细胞数的比例高于c、d两组,但d组的长梭形细胞数却高于c组,c、d、e叁组中,e组的细胞外基质最多,但d组的细胞外基质却多于c组。(2)4周后masson染色显示:a组胶原纤维呈蓝色,细胞质呈红色,细胞核呈黑色,可见少量的梭形细胞沿胶原纤维方向排列;b组可见大量沿胶原纤维排列的梭形细胞,但胶原纤维呈无规则排列;c组、d组以及e组均有不同数量的长梭形细胞沿着胶原纤维朝一个方向有规律的排列,e组胶原纤维的沉积量最大、且排列顺序最整齐,但d组胶原纤维的沉积量以及排列顺序要优于c组。(3)d组与e组移植段免疫组织化学检查显示:d组与e组的长梭形细胞和椭圆形细胞中均有大量的腱调蛋白(tnmd)蛋白以及mkx(mohawkhomeobox)蛋白表达,通过对mkx蛋白表达阳性细胞数分析,e组中表达mkx阳性细胞数要明显高于d组(p<0.05)。以上结果表明e组移植段比d组更易塑造成肌腱样组织。(4)d组与e组移植段admscs检测与mkx免疫荧光化学染色检查显示:d组与e组均有大量的admscs存在,并且e组表达mkx蛋白阳性admscs的数量比例要高于d组(p<0.05)。(5)4周后生物力学测试显示:e组破坏力(32.34±2.71)n要高于c组(20.33±1.47)n及d组(27.78±2.11)n(p<0.05),e组最接近b组(37.62±1.54)n(p<0.05),而d组高于c组(p<0.05)。结论:(1)admscs复合sis构建组织工程肌腱修复肌腱缺损的治疗效果要优于单纯利用SIS修复。(2)低氧可以促进ADMSCs复合SIS治疗肌腱缺损的治疗效果。(3)附在SIS上的ADMSCs可能分化成了肌腱样细胞,并且低氧对ADMSCs向肌腱样细胞分化可能起到了促进作用。(本文来源于《西南医科大学》期刊2017-05-01）
李小冬,蔡璐,李世歌,莫本田,韩永芬[6]（2016）在《免预培养高效菊苣遗传转化方法》一文中研究指出转基因技术对基因功能研究与农作物种质资源创新具有重要作用,在牧草类作物菊苣中相应的研究还处于初级阶段。本研究改进了菊苣组织培养与遗传转化方法,采用暗光培养的菊苣子叶为外植体,经农杆菌侵染后置于光照条件下进行共培养,利用子叶细胞从暗光转移到光照条件下细胞迅速分裂的特点,实现植物遗传转化。与已报道的转化方法(光照条件下的真叶外植体先进行2~3d预培养,再进行农杆菌转化与共培养)相比,本方法出苗率与已报道方法相当,达90%以上;比不经预培养方法的出苗率要高80%~90%,能极大节省人力物力。同时本研究发现,在愈伤诱导、植物分化以及生根培养中,依次递减细胞分裂素的强度与浓度,能显着降低愈伤和再生苗的玻璃化程度,与一直采用强细胞分裂素相比,改进方法愈伤玻璃化比率下降约9%,再生苗玻璃化比例下降约16%。(本文来源于《草业学报》期刊2016年10期）
彭显龙,刘春艳,马昕,梁辰,于刚[7]（2016）在《预培养温度对稻田土壤氮素矿化影响》一文中研究指出为明确预培养温度对氮素矿化影响,选择南北方典型稻田土壤,经12、25和35℃预培养2周后,与风干土一起恒温培养28 d(25℃),测定培养前后铵态氮含量,分析预培养过程中土壤有机氮组分变化。结果表明,随预培养温度升高,初始铵态氮含量逐渐增加,矿化氮含量逐渐减少,当预培养温度为35℃时,矿化氮含量甚至降为负值。虽然12和25℃预培养不会影响土壤总矿化氮含量,但模型拟合显示,风干土矿化过程与经预培养的土壤矿化过程明显不同。风干土直接培养2周或经25℃预培养2周后,可酸解氮含量均有所增加,难酸解氮含量明显降低;与风干土相比,12℃预培养有机氮组分变化不明显;而随预培养温度升高,酸解氮含量先增后减,难酸解氮先减后增。可见,难酸解氮在矿化过程中可能也发挥重要作用。35℃预培养温度会改变土壤供氮过程,12℃预培养后土壤有机氮组分变化较小,矿化过程更符合实际。因此,测定土壤氮素矿化应以12℃作为预培养条件。(本文来源于《东北农业大学学报》期刊2016年04期）
王俊青,张峰,蒙健宗,韦珂[8]（2016）在《预培养冷冻干燥制备植物乳杆菌发酵剂》一文中研究指出为提高菌体冷冻干燥存活率,制备发酵活力高的植物乳杆菌发酵剂,通过在MRS培养基和蕉杆培养基中比较不同收获期的菌体发酵活力,确定菌体培养最佳收获期;通过单因素实验和正交实验考察预培养时间、温度和保护剂海藻糖浓度对冻干存活率的影响;比较冻干发酵剂和新鲜菌液在MRS培养基和蕉杆培养基中的发酵活力。结果表明:对数末期为培养植物乳杆菌S14的最佳收获期;预培养的最优条件为温度37℃,预培养时间45 min,海藻糖浓度10%,冻干存活率达89.9%;植物乳杆菌S14冻干发酵剂的发酵活力与新鲜菌液的发酵活力十分接近。该发酵剂适用于蕉秆青贮发酵。(本文来源于《食品科技》期刊2016年01期）
马宁,徐莹,张丹丹[9]（2015）在《蔗糖预培养对库德毕赤酵母及酿酒酵母镉抗性的影响》一文中研究指出良好的重金属抗性和积累特性是应用活性微生物在食品物料中进行重金属脱除的必要前提。本文研究了蔗糖预培养对库德毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)及酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)镉抗性及镉脱除率的影响,并从酵母菌镉积累特性和甘油、海藻糖积累量方面初步分析了其镉抗性提高原因。结果显示,蔗糖预培养(100-400 g/L)显着提高了镉胁迫下库德毕赤酵母及酿酒酵母的生物量和镉脱除率,并且显着降低了库德毕赤酵母及酿酒酵母的单位菌体镉积累量。库德毕赤酵母及酿酒酵母中胞内及细胞表面镉积累量在蔗糖预培养后均下降,由此推测镉积累量的下降是酵母镉抗性提高的重要原因。库德毕赤酵母镉胁迫下的甘油及海藻糖含量在蔗糖预培养后显着下降,然而,100 g/L蔗糖预培养却能够显着提高酿酒酵母在镉胁迫下的甘油及海藻糖含量。结果表明,蔗糖预培养能够提高库德毕赤酵母及酿酒酵母的镉抗性及脱除能力,并且库德毕赤酵母较酿酒酵母有更好的镉脱除效果。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十二届年会暨第八届中美食品业高层论坛论文摘要集》期刊2015-10-21）
叶晓馨,董淑琦,马永清[10]（2015）在《预培养过程对列当种子发芽响应敏感性影响》一文中研究指出列当是一种全寄生性的草本植物,完全依靠寄主提供营养和水分。给全世界的作物生产造成严重危害。寄生在向日葵上的向日葵列当和寄生在西红柿上的瓜列当在我国也均有发生,严重影响了我国向日葵和西红柿的产量。现有针对列当的防治措施并不成功,主要是由列当复杂的生活史造成的。普遍认为在经过一段时间适宜温湿度的预培养后,列当还需要寄主根系分泌的发芽刺激物质的刺激才能发茅。发芽后,列当的存活取决于能否在发芽后数天内与寄主植物建立联系。因此将列当发芽作为研究目标,可能从中建立有效的防控列当新方法。我们研究了不同的预培养介质(水及不同浓度赤霉素),时间(0-21天)以及发芽刺激物质(GR24,strigol,DCL,玉米根系分泌物以及烟草根系分泌物)对向日葵列当和瓜列当发芽的影响。本研究中探讨的叁个影响因素对向日葵列当和瓜列当的发茅率产生了显着地影响,预培养介质和发茅刺激物质间有显着地交互作用。使用GA3预培养的列当种子的平均发芽率显着高于使用蒸馏水预培养的发芽率。GA3作为预培养介质,还会迅速的促进列当种子对发芽刺激物的响应敏感性,即使仅用GA3预培养1 d,其平均发芽率相较蒸馏水预培养1 d增加了87%。在我们试验的21d里,施加GA3维持了列当对发芽刺激物的高敏感性。未经过预培养的向日葵列当和瓜列当种子表现出较低的发芽率,尤其是发芽刺激物质是根系分泌物的情况下。在不同预培养介质和发芽刺激物质情况下,向日葵列当和瓜列当在不同预培养时间下的发芽率都遵循叁次曲线模型。拟合的模型显示第一个拐点也就是最大的发芽率大都发生在预培养5-9 d。向日葵列当和瓜列当都对GR24和strigol高度响应,但是DCL刺激的发芽率较低。但两种列当对根系分泌物的响应表现出了截然相反的反应,验证了列当的寄主专一性。(本文来源于《第十二届全国杂草科学大会论文摘要集》期刊2015-08-04）
预培养论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
缺血心肌在梗死相关血管开通后可能导致比血管闭塞时更严重的急性损伤,这种再灌注后自相矛盾地加重组织损伤被称为心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)。今天尽管冠状动脉介入治疗策略取得了显着进展,但糖尿病仍然与急性心肌梗死后较高的死亡率有关。该疾病增加了心肌对缺血再灌注损伤的易感性,也通过阻断或激活细胞内信号通路来改变心肌对缺血预处理策略的反应,从而降低了细胞对死亡的抵抗力。糖尿病带来的改变成为了糖尿病患者急性心肌梗死后不良预后的基础。自噬是一种进化上的保守机制,细胞内蛋白和细胞器通过被称为自噬体的双膜囊泡隔离并被递送至溶酶体进行降解。发生在基础水平的自噬参与维持细胞的稳态,但自噬也可以被进一步由应激诱导,从而介导细胞中的保护性或损伤性功能。高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)广泛存在于哺乳动物体内,通过受损、凋亡、坏死细胞主动分泌和被动释放的方式发挥调节基因转录,参与DNA修复,介导炎症反应等生物学效应。HMGB1是否通过相关信号通路调控自噬介导了高糖条件下的缺血再灌注损伤有待进一步研究。人多能诱导干细胞分化的心肌细胞(human induced pluripotent stem cells derived cardiomyocytes,hiPSCs-CMs)由可由体细胞诱导分化而来,避免了直接获取人类原代心肌细胞产生的损伤及伦理问题,更好的模仿人体心肌细胞的生理状态,得到更加客观的实验结果。本研究通过构建高糖预培养hiPSCs-CM缺氧复氧(Hypoxia reoxygenation,H/R)模型,模拟糖尿病患者体内心肌缺血再灌注损伤环境,在细胞及分子水平上观察缺氧复氧后心肌自噬水平的变化规律和特点,探讨缺氧复氧致高糖预培养缺氧复氧后心肌损伤与心肌自噬水平变化间的内在联系,揭示HMGB1及心肌自噬在该条件下致心肌损伤中的生理及病理功能,明确其对心肌损伤的具体作用。第一部分高糖预培养hiPSCs-CM缺氧复氧模型的建立目的:使用人体尿液细胞重编程后获取hiPSCs,分化得到hiPSCs-CM后建立高糖预培养缺氧复氧模型。方法:收集健康男性志愿者尿液,分离培养原代尿液细胞。使用含有Oct,Sox2,Klf4和c-Myc四个重编程因子的仙台病毒转染原代尿液细胞,获得hiPSCs。对获得的hiPSCs采用体外拟胚体分化、体内畸胎瘤成瘤、免疫荧光染色等方法鉴定所获得的细胞系具有多能性。采用的化学成分明确的小分子定向诱导心脏分化策略,使用仅包含叁种化学成分的培养基(基础培养基RPMI1640,1-抗坏血酸2-磷酸和水稻衍生的重组人白蛋白)和小分子定向诱导,分化hiPSCs得到hiPSCs-CM。采用免疫荧光染色及流式细胞术鉴定所获得的心肌细胞。对获得的hiPSCs-CM进行高糖预培养及缺氧复氧建模,采用CCK8等方法对建模进行评估。结果:1.成功建立一株具有多潜能的人体尿液细胞来源hiPSCs。2.在使用无动物源成分小分子定向诱导心肌分化策略得到的心肌细胞具有完整的肌丝肌节结构,在纯化培养后其纯度能达到95%以上。3.在25mM、35mM、45mM葡萄糖浓度CDM3高糖培养24h下,hiPSCs-CM细胞活性不会减低(P>0.05)。4.不同浓度高糖预培养hiPSCs-CM后放入叁气培养箱缺氧2h,复氧复糖2h培养,所有组细胞与正常对照组细胞相比细胞活力均下降,以35mM组下降最为明显(均P<0.05)。结论:35mM葡萄糖浓度培养基预培养hiPSCs-CMs 24h后缺氧2h复氧2h后心肌细胞活力明显下降。第二部分自噬在高糖预培养hiPSCs-CM缺氧复氧损伤中的作用目的:研究hiPSCs-CM在高糖预处理后的自噬水平与心肌细胞线粒体功能、凋亡等损伤标志的关系。方法:采用的化学成分明确的小分子定向诱导心脏分化策略,使用仅包含叁种化学成分的培养基(基础培养基RPMI1640,1-抗坏血酸2-磷酸和水稻衍生的重组人白蛋白)和小分子定向诱导,分化hiPSCs得到hiPSCs-CM,持续培养30天后根据第一部分所得条件建立高糖预培养hiPSCs-CM缺氧复氧模型。采用自噬双标腺病毒检测自噬流、qPCR检测自噬相关指标mRNA表达量、Western blot检测自噬相关蛋白表达量;采用JC-1染色、线粒体DNA(mtDNA)、Mitotracker染色、Mitosox染色检测线粒体相关功能;采用qPCR检测凋亡相关基因mRNA、Western blot检测凋亡相关蛋白表达。结果:1.自噬双标腺病毒检测自噬流:H/R组比CON组RFP光点数增加,35H/R组比35CON组RFP光点数增加,35H/R组RFP光点比H/R组明显增加(P<0.05)2.BECN1-mRNA表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组明显增加(P<0.05)。SQSTM1-mRNA表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.05)。LC3-mRNA表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.05)。3.BECN1蛋白表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组明显增加(P<0.05)。SQSTM1蛋白表达水平:35H/R组比35CON组表达量显着降低(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组降低(P<0.05)。LC3Ⅱ蛋白表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组显着加(P<0.05)。4.JC-1染色:35H/R组比35CON组相对荧光强度比值降低(P<0.01)。35H/R组相对荧光强度比值比H/R组明显降低(P<0.05)。5.线粒体DNA(mtDNA)检测:35H/R组比35CON组mtDNA平均拷贝数降低(P<0.05)。35H/R组mtDNA平均拷贝数比H/R组明显降低(P<0.05)。6.Mitotracker染色流式细胞仪检测:35H/R组比35CON组单个细胞平均相对荧光强度降低(P<0.01)。35H/R组单个细胞平均相对荧光强度比H/R组明显降低(P<0.05)。7.Mitosox染色流式细胞仪检测:35H/R组比35CON组单个细胞平均相对荧光强度降低(P<0.05)。35H/R组单个细胞平均相对荧光强度比H/R组明显降低(P<0.01)。8.凋亡相关基因mRNA表达量检测:CASP3-mRNA:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.01),35H/R组表达量比H/R组明显增加(P<0.05)。BCL2-mRNA表达水平:35H/R组比35CON组表达量显着增加(P<0.01),35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.01)。BAX-mRNA表达水平:35H/R组比35CON组表达量显着增加(P<0.01),35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.01)。9.Western blot检测凋亡相关蛋白表达:BAX蛋白表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组显着加(P<0.05)。BCL2蛋白表达水平:35H/R组比35CON组表达量显着降低(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组显着降低(P<0.05)。10.流式细胞仪检测细胞凋亡:35H/R组比35CON组Q3象限细胞数明显增加(P<0.05)。35H/R组Q3象限细胞数比H/R组明显增加(P<0.05)结论:高糖预培养组hiPSCs-CM在缺氧复氧后自噬水平明显增加高于正常培养的心肌细胞,且该组细胞线粒体损伤、凋亡最为严重。第叁部分HMGB1/TLR4/TRAF6/NF-κB信号通路调控自噬参与高糖预培养hiPSCs-CM缺氧复氧损伤目的:研究HMGB1/TLR4/TRAF6/NF-κB信号通路在高糖预培养hiPSCs-CM缺氧复氧模型中的激活情况及其介导心肌损伤的具体作用机制。方法:采用的化学成分明确的小分子定向诱导心脏分化策略,使用仅包含叁种化学成分的培养基(基础培养基RPMI1640,1-抗坏血酸2-磷酸和水稻衍生的重组人白蛋白)和小分子定向诱导,分化hiPSCs得到hiPSCs-CM,持续培养30天后根据第一部分所得条件建立高糖预培养hiPSCs-CM缺氧复氧模型。采用HMGB1抑制剂Glycyrrhizin及自噬抑制剂3-MA对高糖预培养缺氧复氧组hiPSCs-CM进行干预。采用CCK8检测抑制剂作用浓度与效果;分别用采用免疫荧光染色检测自噬流、qPCR检测信号通路相关指标mRNA表达量、Western blot检测信号通路相关蛋白表达量;流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果:1.HMGB1/TLR4/TRAF6/NF-κB信号通路相关基因mRNA表达量检测:HMGB1-mRNA:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组明显增加(P<0.05)。TLR4-mRNA表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.01),35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.01)。TRAF6-mRNA表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组明显增加(P<0.05)。NF-κBmRNA表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.05)。2.信号通路相关基因蛋白表达水平检测:HMGB1蛋白表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.05)。TLR4蛋白表达水平:35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.05)。TRAF6蛋白表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.05)。NF-κB蛋白表达水平:35H/R组比35CON组表达量增加(P<0.05),35H/R组表达量比H/R组显着增加(P<0.05)。3.免疫荧光染色检测HMGB1:H/R组及35H/R细胞胞浆内出现HMGB1蛋白特异性荧光,35H/R组比H/R组胞浆内荧光表达量增加(P<0.05)。4.CCK8检测细胞活性确定抑制剂效果:Gly(0.15μM)组和3-MA(10mM)组均改善了高糖缺氧复氧细胞损伤(P<0.05),而Gly组和3-MA组细胞活力和H/R组无差异。5.HMGB1抑制剂在高糖预处理缺氧复氧组均可对于通路相关基因及蛋白表达量降低于35H/R组(P<0.05)。6.在原有分组的基础上增加HMGB1抑制剂Glycyrrhizin干预组(Gly组)和自噬抑制剂3-MA干预组(3-MA组),造模结束后对细胞进行自噬相关蛋白(BECN1、SQSTM1、BECN1)表达量检测。与35H/R组相比HMGB1结果:抑制剂Glycyrrhizin和自噬抑制剂3-MA均可使实验组BECN1、BECN1表达量均降低(P<0.05),SQSTM1表达量均增加(P<0.05)。7.HMGB1及自噬抑制剂对细胞凋亡的影响:在原有分组的基础上增加HMGB1抑制剂Glycyrrhizin干预组(Gly组)和自噬抑制剂3-MA干预组(3-MA组),造模结束后对各组细胞进行流式细胞仪检测细胞凋亡水平。与35H/R组相比,Gly组和3-MA组细胞早期凋亡水平均下降(P<0.05),而Gly组和3-MA组细胞活凋亡水平和H/R组无差异。结论:高糖的条件激活了HMGB1/TLR4/TRAF6/NF-κB信号通路,而该信号通路过度的激活自噬造成了心肌细胞的损伤。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
预培养论文参考文献
[1].王华,宋翰奇,陈文羽.新时代背景下高校大学生村官预培养的现实意义研究[J].休闲.2019
[2].吴晓丹.HMGB1/TLR4/TRAF6/NF-κB介导自噬在高糖预培养hiPSCs-CM缺氧复氧损伤中的作用机制研究[D].广西医科大学.2019
[3].冯晓.人才培养视角下高校党建工作路径研究——以大学生村官预培养工作为例[J].广东石油化工学院学报.2017
[4].尹富华,朱能武,周家智,沈伟航,吴平霄.微生物燃料电池恒电流预培养阳极生物膜分析表征[J].环境科学学报.2017
[5].范忠伟.低氧预培养脂肪间充质干细胞复合小肠粘膜下层构建组织工程肌腱修复大鼠跟腱缺损的实验研究[D].西南医科大学.2017
[6].李小冬,蔡璐,李世歌,莫本田,韩永芬.免预培养高效菊苣遗传转化方法[J].草业学报.2016
[7].彭显龙,刘春艳,马昕,梁辰,于刚.预培养温度对稻田土壤氮素矿化影响[J].东北农业大学学报.2016
[8].王俊青,张峰,蒙健宗,韦珂.预培养冷冻干燥制备植物乳杆菌发酵剂[J].食品科技.2016
[9].马宁,徐莹,张丹丹.蔗糖预培养对库德毕赤酵母及酿酒酵母镉抗性的影响[C].中国食品科学技术学会第十二届年会暨第八届中美食品业高层论坛论文摘要集.2015
[10].叶晓馨,董淑琦,马永清.预培养过程对列当种子发芽响应敏感性影响[C].第十二届全国杂草科学大会论文摘要集.2015
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