张建林（上海复旦大学附属中山医院青浦分院检验科201700）
【中图分类号】R197【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）33-0155-02
【摘要】目的比较酶联免疫吸附试验(ELISA)及微粒子化学发光检测技术(MEIA)检测HBsAg样本的结果符合率,以了解两种检验方法的特异性和灵敏度。方法用两种方法平行检测收集的血清标本HBsAg,并相互比较。结果两种方法检测HBsAg的结果符合率为94.9%。结论ELISA的灵敏度和特异性分别为92.3%和94%,灵敏度和特异性较MEIA略低,检测HBsAg弱阳性样本时存在一定程度的漏检率,只能起筛查作用。当测定标本的OD值在cutoff附近,即检测灰区时,建议用MEIA复检。
【关键词】乙型肝炎表面抗原;酶联免疫吸附试验;微粒子化学发光检测技术
乙型肝炎是世界上最常见的传染病之一，每年死于该病的有100多万人[1]。因此,乙肝表面抗原(HBsAg)检测的准确性对不少受检者来说至关重要,也对乙型肝炎的早诊断、早治疗具有十分重要的意义[2]。乙肝病毒携带者约占正常人群的10％～15％，乙肝病毒携带者主要依靠血清标志物（HBsAg）来检查发现，但由于检查方法的多样性，有时会出现漏检和误检。我科用目前国内常用的两种检测方法对血清标本进行HBsAg测定,并对结果进行分析比较,现报告如下:
1材料与方法
1.1标本来源选取2008年9月～2009年9月我院门诊及住院患者静脉血清标本500份,所有标本及时分离血清于-200℃冰箱保存,标本无黄疸、脂血、溶血现象。
1.2试剂和仪器
1.2.1试剂酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒由上海科华生物技术有限公司提供,化学发光定量检测试剂为雅培公司提供的配套试剂。
1.2.2仪器美国雅培全自动免疫发光分析仪。
1.3方法将标本复溶后,分别以ELISA试剂盒和微粒子化学发光检测技术(MEIA)平行检测HBsAg。其中,ELISA测定严格按试剂盒操作说明书操作;MEIA操作前按要求做好试剂定标工作,并作室内质量控制。
2.结果
2.1两种检测方法的结果比较见表1。10例ELISA检测阳性的标本，MEIA复查为阴性，此10例为假阳性；40例ELISA检测为阴性的标本，MEIA复查为阳性，这40例测定标本的OD值在cutoff附近,即检测灰区时。
2.2两种检测方法测定血清HBsAg的各诊断指标见表2。
表1三种方法测定血清HBsAg低值弱阳性样本的结果比较
表2两种方法各诊断指标比较
ELISA(%)MEIA(%)
灵敏度92.398.9
特异性94100.0
阳性预示值96.7100.0
阴性预示值96.4100
总有效率9099.1
3.讨论
在临床检验工作中,HBsAg测定的方法学不同常常引起医疗纠纷及临床医师的误解,一般有以下几种情况:漏诊和误诊。就本文研究的两种方法而言，ELISA法成本低，不需要特殊设备，易开展，但存在一定的假阳性，与标本的前期处理、黄疸和溶血有关，对乙肝亚型和HBsAg低浓度有可能出现漏诊
目前国内临床检验多采用ELISA双抗体夹心法检测HBsAg,检测程序固定,方法不复杂,但由于标本及操作因素等多方面原因会造成假阳性。在HBsAg的ELISA法日常检测中,有时会遇到一些标本阳性而MEIA复查时为阴性，是由于标本溶血或加样时吸到红血球或洗板清洗不干净而导致的假阳性；但同有时也会遇到少许标本的S/CO值为1.0左右,其中部分患者因血清中纤维蛋白收缩差异,在标本首次检测时(即血液离体1h),结果为弱阳性,而在复查时,结果为阴性。但另有部分标本,经多次复查,HBsAg的S/CO值一直为1.00～1.50,此即为真HBsAg弱阳性[3,4]。因此目前普遍采用的检测方法,对溶血标本和低水平HBsAg易造成漏检,不仅对乙肝的确诊带来困难,尤可导致乙肝病毒通过手术,输血等途径发生传播等严重后果。因此,进一步提高血清HBsAg检测的灵敏度具有重要的现实意义。MEIA检测HBsAg是目前世界上检测乙肝标志物的金标准,它不但灵敏度高且抗干扰能力强,重复性好,并可单份检测,检测时间只需28分钟。由于仪器昂贵、试剂成本较高,在我国应用单位很少,只适用于大型医院开展针对弱阳性或可疑弱阳性标本的检测[5]。由于免疫学技术的不断发展,快速简便低成本的化学发光、电化学发光、荧光免疫技术等新一代检测方法的不断推出,已满足定量检测的要求[6],HBsAg检测的灵敏度、特异性明显提高,使HBsAg滴度表达很低的标本得以检出,对临床诊断及流行病学调查有着重要意义。
参考文献
[1]刘崇柏.我国乙型病毒性肝炎的流行现状及预防[J].中华预防医学杂志，1996；30（增刊）：6～7.
[2]姜玉章,余亚新,殷先德.HBsAg低值弱阳性的检测及其临床意义[J].中华微生物和免疫学杂志,2001,21(3):310.
[3]岳希全,石宏,李迎.ELISA法检测HBsAg影响结果的重要因素的分析[J].中国实验诊断学,2007,11(2):213-215.
[4]姜玉章,余亚新.HBsAg低值弱阳性的检测及其临床意义[J].中华微生物和免疫学杂志,2001,21(3):310.
[5]王健,闵福援.乙肝病毒血清标志物的检测方法及其临床意义[J].中华检验医学杂志,2005,28(1):113-115.
[6]卢敏,陆志檬.乙型肝炎的研究进展[J].国外医学,流行病学传染病学分册,2005,32:58.