重组禽痘病毒转移载体论文_杨志

导读:本文包含了重组禽痘病毒转移载体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:病毒,细小,载体,基因,疫苗,禽流感病毒,氨酸。

重组禽痘病毒转移载体论文文献综述

杨志[1](2005)在《GPV与GPMV重组禽痘病毒转移载体和DNA疫苗的构建》一文中研究指出鹅细小病毒(goose parvovirus)和鹅副粘病毒(goose paramyxovirus)分别是小鹅瘟和鹅副粘病毒病的病原。小鹅瘟和鹅副粘病毒病都是养鹅生产中的烈性传染病,发病范围较广。除了小鹅瘟在非洲和美洲还未见报道外,几乎在世界各国均有暴发这两种疫病的报道。近年来,随着规模养鹅数量的增加,这两种疫病的危害性显得越来越突出。疾病暴发时来势迅猛,往往来不及进行有效治疗即造成染病鹅的死亡,而且还有可能造成细菌和真菌的继发性感染。各个品种的鹅均能感染这两种疾病,不仅小鹅易感,大鹅也易感。染病鹅死亡率较高,尤其是10 日龄内的雏鹅死亡率可达100%,给养鹅业生产带来及大的经济损失。雏鹅患病时,这两种疾病的症状类似,基层兽医工作人员和养殖单位经常将两种疾病混淆。目前对这两种疾病尚无有效的治疗方法,仍以预防为主,所以对于防治这两种疫病的疫苗研究工作尤为重要。预防这两种疫病的疫苗目前只是传统的灭活苗和弱毒苗,随着基因工程手段向疫苗研制工作的技术渗透,基因工程疫苗在疫病预防工作方面逐渐成为研究的热点,其中以病毒为载体的重组疫苗和DNA 疫苗尤为突出。这两种疫苗是借助分子生物学手段将外源特异性抗原基因分别重组到病毒活载体和构建到DNA 疫苗表达载体上,在注射到宿主体内后,使外源基因进行高效、持久的表达,诱导机体产生特异性免疫应答,达到预防疾病的作用。这两种疫苗有各自的优点,重组禽痘病毒疫苗研究得相对来说较早,也比较深入,引起免疫应答的效果也比较好;DNA 疫苗虽然还处于研究阶段,但它除了具有常规疫苗的各种优点以外,还具有生产工艺简单、生产成本低廉和安全性高等优点,而且对它的研究还在不断完善,开发潜力十分巨大。DNA 疫苗的众多特点无疑已使其成为继灭活苗、弱毒苗和亚单位苗之后的第叁代疫苗杰出代表。本实验是根据鹅细小病毒和鹅副粘病毒的生物学特点和当前疫苗研究工作的趋势所展开的,总共分为两部分:(1)扩增出鹅细小病毒疫苗株的结构蛋白基因VP3,并构建出重组质粒pcDNA3.1-VP3。然后将含有巨细胞病毒(CMV)启动子PCMV、VP3 基因、BGHpA 叁部分的DNA 片段PCMV-VP3-BGHpA 插入到分别带有鹅副粘病毒囊膜糖蛋白基因HN 和F 的重组质粒pcDNA3.1-F 和pcDNA3.1-HN 上,成功构建出双基因DNA 疫苗重组质粒pcDNA3.1-VP3-F、pcDNA3.1-VP3-HN。(2)将重组质粒pSY538-VP3 上含有启动子LP2EP2和VP3 基因的片段LP2EP2-VP3 插入到重组质粒pSY681-F 和pSY681-HN 中,构建出双基因重组禽痘病毒转移载体pSY681-VP3-F、pSY681-VP3-HN。重组质粒的构建工作是基因工程疫苗研究的前期工作,也是疫苗有效性和可靠性的关键保障。有了外源基因在理论上能够高效表达的可能性,才有可能使后期免疫工作得以顺利进行。一种疫苗能否达到令人满意的免疫效果受到众多条件的限制,为使其能达到令人满意的免疫效果,还需要在实践中逐渐的逐渐摸索不断完善。本实验所构建出的四个双基因重组质粒,为研制预防这两种疫病的基因工程疫苗奠定了基础。(本文来源于《东北农业大学》期刊2005-04-01)

乔传玲,于康震,邓国华,王秀荣,孟庆文[2](2003)在《禽流感病毒A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)NA基因的克隆及其重组禽痘病毒转移载体的构建》一文中研究指出采用 RT- PCR技术扩增了禽流感病毒 A/ Guangdong/ 3/ 96 (H5 N1) [GD3/ 96 ]神经氨酸酶 (NA)基因 ,并将其克隆到 p UC18质粒中进行测序。核苷酸序列测定结果为 :NA基因全长为 14 10 bp,共编码 4 6 9个氨基酸。从 p UCNA中切下 NA基因片段 ,将其亚克隆到质粒 p SY5 38的 Eco R 位点 ,将带有痘苗病毒启动子 P11的 L ac Z基因平端克隆到该质粒的 Sm a 位点 ,然后切下同时含有 NA及 L ac Z基因的片段 ,再亚克隆到禽痘病毒载体 p SY6 81的 Not 位点 ,经限制性内切酶分析、PCR鉴定等 ,证明含有禽流感病毒 NA基因的重组禽痘病毒转移载体已构建成功 ,从而为进一步筛选表达 NA蛋白的重组禽痘病毒及探讨该蛋白的免疫原性奠定了实验基础。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2003年02期)

田丽红,贾永清,王君伟,李一经,赵丽荣[3](2002)在《鹅细小病毒VP3基因重组禽痘病毒转移载体的构建》一文中研究指出从含有鹅细小病毒 (GPV)H1株主要结构蛋白VP3基因的重组质粒pPROEXHTb VP3中切取GPVH 1株VP3基因片段 ,将其亚克隆于 pSY5 3 8的EcoRⅠ位点 ,并将带有痘苗病毒启动子P11的LacZ报告基因平端克隆于上述重组子的SmaⅠ位点 ,再用NotⅠ切下同时含有VP3基因和LacZ报告基因的片段 ,亚克隆于pSY681的NotⅠ位点 ,构建了含有VP3基因的重组禽痘病毒转移载体。上述结果为GPV基因工程疫苗的研制奠定了基础(本文来源于《中国兽医科技》期刊2002年09期)

田丽红[4](2002)在《鹅细小病毒VP3基因克隆及重组禽痘病毒转移载体的构建》一文中研究指出鹅细小病毒(Goose Parvovirus, GPV)为小鹅瘟的病原体。小鹅瘟主要发生于1月龄内雏鹅和雏番鸭,是以急性肠炎及肝、肾、心实质脏器炎症为特征的烈性传染病,对养鹅业发展造成很大威胁。自1956年我国学者方定一首次发现并分离到GPV后,国外相继也有分离到该病毒的报道,说明该病毒在世界范围内有较为广泛的流行。利用PCR方法扩增和克隆GPV H1分离株主要免疫原性蛋白基因VP3,并对其进行原核和真核表达,是建立小鹅瘟分子诊断方法、构建VP3基因重组禽痘病毒活载体疫苗的基础,具有极为重要理论和实践意义。 本研究用接种鸭胚的病毒增殖方法获得了GPV H1分离株的大量增殖,增殖病毒经差速离心进行纯化。根据Zadori等发表的GPV B株全基因核苷酸序列,借助Oligo4.1软件设计了1对用以扩增主要结构蛋白VP3基因的引物GF/GR,通过PCR技术,从病毒基因组DNA中扩增出病毒主要结构蛋白VP3完整基因片段,经酶切鉴定后直接与pMD 18-T质粒载体连接。提取重组质粒经PCR鉴定和酶切鉴定后,对插入片段进行序列测定及分析。结果表明:鹅细小病毒H1分离株VP3基因全长1605bp,编码534个氨基酸,只有一个完整的开放阅读框架,与国外已发表的鹅细小病毒B株核苷酸序列同源性为98.5%,氨基酸序列同源性为98.3%,表明这二个毒株亲缘关系相近。该序列与国外发表的GPV B株VP3基因核苷酸序列相比较,共有24个核苷酸不同。除个别突变点外,大多数变异集中在两个区域,VP3基因5’端312bp-417bp区和3’端791bp-1276bp区,由该序列推导的氨基酸序列与GPV B株有9个氨基酸发生改变,集中在266位和417位氨基酸之间,这一区域可能是VP3基因的高变区。 本研究另从含有GPV H1分离株主要结构蛋白VP3基因的重组质粒pPROEX HTb-VP3中切取GPV H1株VP3基因片段,将其亚克隆于pSY538的EcoRI位点,然后将带有痘苗病毒启动子P11的LacZ报告基因平端克隆于上述重组子的SmaI位点,再用NotI切下同时含有VP3基因和LacZ报告基因的片段,再亚克隆于pSY681的NotI位点,构建出含有VP3基因的重组禽痘病毒转移载体,为构建表达VP3基因的重组禽痘病毒从而制备GPV基因工程疫苗奠定了基础。(本文来源于《东北农业大学》期刊2002-05-01)

重组禽痘病毒转移载体论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

采用 RT- PCR技术扩增了禽流感病毒 A/ Guangdong/ 3/ 96 (H5 N1) [GD3/ 96 ]神经氨酸酶 (NA)基因 ,并将其克隆到 p UC18质粒中进行测序。核苷酸序列测定结果为 :NA基因全长为 14 10 bp,共编码 4 6 9个氨基酸。从 p UCNA中切下 NA基因片段 ,将其亚克隆到质粒 p SY5 38的 Eco R 位点 ,将带有痘苗病毒启动子 P11的 L ac Z基因平端克隆到该质粒的 Sm a 位点 ,然后切下同时含有 NA及 L ac Z基因的片段 ,再亚克隆到禽痘病毒载体 p SY6 81的 Not 位点 ,经限制性内切酶分析、PCR鉴定等 ,证明含有禽流感病毒 NA基因的重组禽痘病毒转移载体已构建成功 ,从而为进一步筛选表达 NA蛋白的重组禽痘病毒及探讨该蛋白的免疫原性奠定了实验基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

重组禽痘病毒转移载体论文参考文献

[1].杨志.GPV与GPMV重组禽痘病毒转移载体和DNA疫苗的构建[D].东北农业大学.2005

[2].乔传玲,于康震,邓国华,王秀荣,孟庆文.禽流感病毒A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)NA基因的克隆及其重组禽痘病毒转移载体的构建[J].中国兽医学报.2003

[3].田丽红,贾永清,王君伟,李一经,赵丽荣.鹅细小病毒VP3基因重组禽痘病毒转移载体的构建[J].中国兽医科技.2002

[4].田丽红.鹅细小病毒VP3基因克隆及重组禽痘病毒转移载体的构建[D].东北农业大学.2002

论文知识图

重组禽痘病毒转移载体构建策略图rFPV-NA转移载体的构建转移载体pSY681-VP3-F-LacZXbaⅠ重组病毒PCR扩增Il-DIZOO():1、2.FPV;3...皿组白位有容的姗迭叭落2刀妇.坛幽a公n...延边白鹅IFN-α基因的PCR扩增结果

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