乳酸菌对黄曲霉毒素B1的吸附作用效果

论文摘要

黄曲霉毒素（Aflatoxin,AFT）是由黄曲霉（aspergillus flavus）寄生曲霉（a.parasiticus）等真菌产生的次生代谢产物,它是一类化学结构类似的化合物,均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素广泛存在于饲料及食品中。黄曲霉毒素B1是黄曲霉毒素中毒素最强的一种,它会引起一系列急性中毒症状,还具有致癌毒性、基因毒性、生殖毒性、免疫毒性以及神经毒。目前对于AFB1的脱毒方法主要可分为三类:物理脱毒、化学脱毒和生物脱毒。其中物理脱毒和化学脱毒方法不仅投资大、成本高,而且有些会破坏食品中的营养成分。生物脱毒方法因其具有绿色清洁,高效和成本低的优点而引起了广泛关注。乳酸菌是一类广泛存在于人体肠道中的,被视作公认为安全的食品级微生物。本课题对实验室贮藏的乳酸菌进行了对AFB1吸附能力的比较,运用高效液相色谱法测定并计算了其吸附率。结果表明,四株乳酸菌均对AFB1具有吸附能力,其中,实验室贮藏的一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum P1的吸附率最高。为后续实验提供充足的实验菌体,提高乳酸菌菌体的生长率,节约生产的成本,本实验对Lactobacillus plantarum P1的生长条件进行了优化。运用Bioscreen C全自动微生物生长曲线分析仪绘制Lactobacillus plantarum P1的生长曲线,结果表明该菌在515 h处于生长对数期。本实验选用培养15 h的Lactobacillus plantarum P1进行实验。通过单因素实验得到最佳单因素条件为:初始接种量3%、初始pH为6、培养温度为37℃、番茄汁添加量为4%、盐浓度为1%。在此基础上设计Plackett-Burman（PB）试验以筛选对乳酸菌生长影响最为显著的因素,结果表明对Lactobacillus plantarum P1的生长影响最为显著的三个因素为:初始pH、初始接种量和培养温度。接下来对这三个因素进行了响应面实验分析,最终由方差分析得知该二次回归模型（P<0.0001）极显著,失拟项（P=0.7718>0.05）不显著,模型的校正确定系数R2Adj=0.9588,因此可以解释乳酸菌活菌数的变化情况。通过模型预测得到菌株Lactobacillus plantarum P1的最佳生长条件为:初始pH为6.1,初始接种量为2.9%,培养温度为37.1℃,预测在此条件下Lactobacillus plantarum P1的活菌数预测可达到10.73 lg（cfu/mL）。最后通过验证实验证明了该模型具有有效性。以Lactobacillus plantarum P1为吸附剂,研究了该菌对AFB1的吸附特性。结果表明:随着AFB1浓度增加,Lactobacillus plantarum P1对AFB1的吸附率逐渐降低。随着菌体浓度的增加,Lactobacillus plantarum P1对AFB1的吸附率逐渐增加,Lactobacillus plantarum P1对AFB1的吸附是一个快速的过程,在30 min左右即可达到最高,而后结合不牢的AFB1出现解析现象,使吸附率有所降低,吸附3 h吸附率达到平衡。随着吸附温度的增大,Lactobacillus plantarum P1对AFB1的吸附率呈增长趋势,且温度对吸附的影响显著。人工肠胃液下的吸附率有一定的降低,热处理致死后的Lactobacillus plantarum P1对AFB1的吸附率有明显增加。用Langmuir、Freundlich、Redlich-Peterson和Temkin四种常用模型拟合植物乳杆菌P1对AFB1的吸附过程,结果发现该吸附过程最符合Langmuir方程,说明该吸附存在单分子层吸附,并且通过分析分离因子RL可知,AFB1浓度越高,越有利于吸附的进行。再通过和Elovich方程、Lagergren准一级吸附动力学方程和Lagergren准二级吸附动力学方程三种模型构建植物乳杆菌P1吸附AFB1的吸附模型,发现该吸附过程最符合Elovich动力学方程,说明吸附过程存在非均相扩散。

论文目录

缩写符号说明

摘要

abstract

第一章绪论

1概述'> 1.1 黄曲霉毒素B₁概述

1的结构和理化性质'> 1.2 黄曲霉毒素B₁的结构和理化性质

1的危害'> 1.3 黄曲霉毒素B₁的危害

1.4 黄曲霉毒素的限量标准

1.4.1 国际食品法典委员会黄曲霉毒素限量标准

1.4.2 欧盟黄曲霉毒素限量标准

1.4.3 日本黄曲霉毒素限量标准

1.4.4 美国黄曲霉毒素限量标准

1.4.5 我国黄曲霉毒素限量标准

1.5 黄曲霉毒素的脱毒方法

1.5.1 物理脱毒

1.5.2 化学脱毒

1.5.3 生物脱毒

1.6 乳酸菌

1.7 研究目的和意义

1.8 本文的主要研究内容

1吸附能力的比较及乳酸菌的高密度培养'>第二章几株乳酸菌对黄曲霉毒素B₁吸附能力的比较及乳酸菌的高密度培养

2.1 实验材料与方法

2.1.1 实验菌株

2.1.2 实验器材

2.1.3 主要仪器设备

1吸附能力的测定'> 2.1.4 4株乳酸菌对AFB₁吸附能力的测定

1的高效液相色谱检测'> 2.1.5 AFB₁的高效液相色谱检测

2.1.6 菌种活化

2.1.7 种子的制备

2.1.8 发酵培养

2.1.9 乳酸菌生长曲线测定

2.1.10 菌体浓度的测定方法

2.1.11 高密度培养研究

2.1.12 响应面优化乳酸菌生长条件

2.2 结果与分析

1 的标准工作曲线'> 2.2.1 AFB₁的标准工作曲线

1吸附能力'> 2.2.2 4株乳酸菌对AFB₁吸附能力

2.2.3 生长曲线的测定

2.2.4 初始接种量对植物乳杆菌P1 生长的影响

2.2.5 初始pH对植物乳杆菌P1 生长的影响

2.2.6 培养温度对植物乳杆菌P1 生长的影响

2.2.7 番茄汁添加量对植物乳杆菌P1 生长的影响

2.2.8 盐浓度对植物乳杆菌P1 生长的影响

2.2.9 Plackett-Burman（ PB）试验结果

2.2.10 响应面试验结果

2.2.11 最佳生长条件的验证

2.3 本章小结

1的吸附特性的研究'>第三章植物乳杆菌P1 对黄曲霉毒素B₁的吸附特性的研究

3.1 实验材料和方法

3.1.1 实验材料

3.1.2 培养试剂

3.1.3 实验仪器

1 的高效液相色谱检测及标准曲线的绘制'> 3.1.4 AFB₁的高效液相色谱检测及标准曲线的绘制

3.1.5 吸附特性条件的设定

3.2 结果与分析

1 浓度对吸附的影响'> 3.2.1 AFB₁浓度对吸附的影响

3.2.2 Lactobacillus plantarum P1 菌体浓度对吸附的影响

3.2.3 吸附时间对吸附的影响

3.2.4 吸附温度对吸附的影响

3.2.5 吸附pH对吸附的影响

3.2.6 热致死处理Lactobacillus plantarum P1 菌体对吸附的影响

3.2.7 Lactobacillus plantarum P1菌体在人工肠胃液中的吸附情况

1 复合物的稳定性'> 3.2.8 Lactobacillus plantarum P1菌体-AFB₁复合物的稳定性

3.3 本章小结

1的吸附热力学及动力学研究'>第四章植物乳杆菌P1 对黄曲霉毒素B₁的吸附热力学及动力学研究

4.1 实验材料与设备

4.1.1 实验材料

4.1.2 实验仪器

4.2 实验方法

1 吸附行为的研究'> 4.2.1 Lactobacillus plantarum P1对AFB₁吸附行为的研究

1 吸附动力学的研究'> 4.2.2 植物乳杆菌P1对AFB₁吸附动力学的研究

4.3 实验结果与讨论

4.3.1 吸附等温线的绘制

4.3.2 吸附经验公式拟合结果分析

4.3.3 吸附动力学曲线绘制

4.3.4 吸附动力学拟合结果分析

4.4 本章小结

全文总结

致谢

参考文献

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 蒋采贝

导师: 欧杰

关键词: 乳酸菌,高密度培养,黄曲霉毒素,吸附,动力学,热力学

来源: 上海海洋大学

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 生物学,轻工业手工业

单位: 上海海洋大学

分类号: TS201.3

DOI: 10.27314/d.cnki.gsscu.2019.000376

总页数: 71

文件大小: 3235K

下载量: 100

乳酸菌对黄曲霉毒素B1的吸附作用效果

论文摘要

论文目录

文章来源

相关论文文献

猜你喜欢