导读:本文包含了真核基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,细胞,诱导,序列,元件,顺式,转染。
真核基因论文文献综述
胡伊乐,杨为民,郭绍芳[1]（2015）在《大豆油乳剂包裹真核基因载体在细胞转染中的应用》一文中研究指出目的探讨大豆油乳剂包裹真核基因载体在细胞转染中对转染率的影响。方法将大豆油与阳离子附加剂按一定比例混合后超声振荡制备阳离子乳剂,并包裹真核基因载体转染细胞并与裸质粒相对比。结果大豆油阳离子乳剂真核基因载体复合体在粒径、表面电荷携带等方面都达到要求,体外细胞培养结果显示可明显提高基因载体的细胞膜穿过率,转染率远高于裸质粒。结论大豆油阳离子乳剂具有制备简单、经济、高效等优点,可作为一种新的基因给药途径得以应用。(本文来源于《第五届全国解剖学技术学术会议论文集》期刊2015-07-25）
张伟,付云,李翠萍,渡部终五[2]（2014）在《红鳍东方鲀PPARγ真核基因表达载体构建及亚细胞定位研究》一文中研究指出[目的]旨在克隆红鳍东方鲀PPARγ基因的cDNA,并通过构建真核表达载体pCMV-3Tag-4A-PPARγ,分析myc-PPARγ融合蛋白在大鼠L6细胞的表达及亚细胞定位。[方法]利用RT-PCR技术克隆红鳍东方鲀PPARγ基因的cDNA,构建pCMV-3Tag-4A-PPARγ重组质粒,转染至大鼠L6细胞,共聚焦显微镜下观察myc-PPARγ的亚细胞定位。[结果]红鳍东方鲀PPARγ基因cDNA ORF全长1557 bp,共编码518个氨基酸,pCMV-3Tag-4A-PPARγ融合蛋白在大鼠L6细胞核中表达,为深入探讨鱼类PPARγ生物学功能奠定了基础。(本文来源于《现代农业科技》期刊2014年18期）
叶玲玲,刘红,李世崇,王启伟,蓝叁春[3]（2014）在《一种新型的生物素诱导的真核基因表达调控系统的建立》一文中研究指出为建立一种适用于生物制药工业和基因治疗领域的基因表达调控系统,构建枯草芽胞杆菌生物素连接酶(BS-BirA)与转录激活结构域的融合蛋白,以其表达载体为调控载体;在弱化的CMV启动子上游连接BS-BirA特异的操纵子序列,获得响应载体,从而得到响应于生物素的真核基因表达调控系统BS-Biotin-On。以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因对该系统进行考察,结果表明,与现有的类似调控系统相比,该系统具有良好的诱导率;可通过调节培养体系中生物素的浓度,实现对目的基因表达水平快速、较高效的调节。上述结果表明,BS-Biotin-On系统可能为外源基因的调控表达提供新的选择。(本文来源于《生物工程学报》期刊2014年08期）
郑大军[4]（2014）在《真核基因剪接位点的特征描述与识别算法研究》一文中研究指出基因剪接是基因表达中的重要过程,可以影响蛋白质翻译的结果,从而对生命活动产生影响。剪接位点的识别在基因发现和确定基因结构方面发挥着重要作用,因此是生物信息学中一个重要的研究方向。与传统实验方法相比,计算机信息处理方法实验花费少、工作效率高,且便于实现。通过文献学习,对现有的剪接位点识别算法进行了归纳和总结,对影响剪接位点识别精度的主要问题进行了分析,提出了从特征描述方法和识别算法两个方面进行改进的思路。本文从人类基因剪接位点预测的角度进行了方法研究和探讨,主要包括以下内容:(1)从信息熵的原理出发计算基因剪接序列中每个位点的不确定性减少量,并将这种减少量定义为位点的信息量,然后用贝叶斯方法建立了人类基因剪接位点的预测模型。(2)由于剪接位点是位于外显子和内含子的交界处,考虑到外显子/内含子、内含子/外显子的内在关系,所以对另外一种更复杂和有效的有向图模型——隐马尔科夫模型进行了研究。(3)设计了一个用于人类基因剪接位点预测的支持向量机模型。该模型被用于对不同特征提取方法的预测效果进行评估。(4)研究了不同的特征提取方法对预测效果的影响。对原始特征、基于统计方法提取的特征、基于主成分分析方法提取的特征、基于信息量的特征和基于核主成分方法提取的特征分别进行了研究。基于人类剪接位点数据库的计算结果表明,采用信息量特征、基于主成分分析和核主成分分析的特征,能进一步提高人类基因剪接位点的预测精度。(本文来源于《福建农林大学》期刊2014-04-01）
李晓霞,袁军,陈建苏[5]（2013）在《真核基因重组Sox2及其在小鼠角膜基质细胞中的表达》一文中研究指出目的基因重组构建具有穿膜活性的核转录因子Sox2真核表达系统,将其转染至小鼠角膜基质细胞,检测其在小鼠角膜基质细胞中的表达。方法利用重迭延伸PCR法重组目的基因Sox2-PTD构建质粒,测序检测重组DNA序列是否克隆正确。确定正确序列后将其转染至小鼠角膜基质细胞。倒置显微镜下观察细胞生长情况,转染后约10d免疫荧光化学鉴定其表达。结果成功构建质粒PCDNA3.1-Sox2-PTD;4个转录因子测序结果显示:Sox2基因测序结果与基因模板序列100%一致;成功转染至小鼠角膜基质细胞中;荧光显微镜下观察可见,Sox2-PTD在细胞浆和细胞核内均有表达,主要分布在细胞核内。结论成功构建核转录因子的真核表达系统,可转染至小鼠角膜基质细胞并引起细胞形态和表型的变化,为真核重组外源蛋白诱导角膜基质细胞转化为多能干细胞奠定基础。(本文来源于《眼科新进展》期刊2013年06期）
聂玉敏,刘宏德,孙啸[6]（2013）在《调控真核基因表达的非编码序列》一文中研究指出真核基因的表达是一个涉及从DNA转录到mRNA转录后加工和翻译后蛋白质修饰的复杂过程,真核生物的复杂性必然要求更为复杂和精确的表达调控机制,这也是真核基因组中有大量非编码序列存在的主要原因。在这些非编码序列中,顺式作用元件可以与反式作用因子相互作用于转录水平调控基因的表达,重复序列主要影响染色质的结构,内含子和非翻译区主要在转录后水平上调控基因的表达,而非编码RNA则调控基因表达的各个层次。文章就这些调控基因表达的非编码序列及它们的调控机制作简要的综述。(本文来源于《生物物理学报》期刊2013年04期）
董刚,郑建金,李涛,徐欣,卢恕来[7]（2012）在《血管内皮生长因子165真核基因转染载体转染的骨骼肌细胞》一文中研究指出背景:血管内皮生长因子基因转染治疗组织损伤的研究倍受关注,构建稳定可靠的人血管内皮生长因子真核表达载体有重要意义。目的:克隆人血管内皮生长因子基因血管内皮生长因子165片段,构建pcDNA4-HisMax-C/VEGF165真核表达质粒,并验证其转染大鼠骨骼肌细胞的可靠性。方法:采用反转录-聚合酶链反应技术,从人卵巢癌患者外周血中提取并扩增出血管内皮生长因子165基因片段,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pcDNA4-HisMax-C真核表达载体上,构建成pcDNA4-HisMax-C/VEGF165重组质粒,聚合酶链反应扩增,分别用酶切电泳分析和DNA测序的方法对提取和重组DNA进行鉴定。pcDNA4-HisMax-C/VEGF165重组质粒转染骨骼肌细胞1周后反转录-聚合酶链反应提取血管内皮生长因子基因并酶切电泳鉴定。结果与结论:构建的重组质粒目的基因片段为人血管内皮生长因子165cDNA,对大鼠骨骼肌细胞转染后检测到血管内皮生长因子165基因片段。提示成功地克隆了血管内皮生长因子165基因并构建了其真核表达质粒,能以此为载体转染至骨骼肌细胞,并已整合到骨骼肌的基因组参与转录,证明了其转染的有效性。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2012年37期）
亓合媛,张昭军,李雅娟,方向东[8]（2011）在《染色质构象调控真核基因的表达》一文中研究指出真核基因的表达受到各种顺式调控元件、反式作用因子、染色质DNA以及组蛋白表观遗传修饰等多因素、多层次的调控。染色质叁维空间结构的变化在调控真核基因表达方面也发挥了至关重要的作用。染色质构象的变化一方面可以使增强子等调控元件与靶基因相互靠近,从而促进基因表达;同时也可能通过形成空间位阻结构阻碍调控元件作用于靶基因,抑制基因表达。虽然染色质结构变化调控真核基因表达的机制仍缺乏较为精确的分子模型,但在组蛋白修饰、核小体定位、染色体领域以及染色质间相互作用等表观遗传学研究中,已经发现有诸多证据支持染色质构象在真核基因表达调控中的重要地位。文章主要综述了染色质结构及其构象的变化等对真核基因表达调控的影响。(本文来源于《遗传》期刊2011年12期）
段小君[9]（2011）在《真核基因的原核表达及分析》一文中研究指出利用原核细胞表达真核生物的蛋白质,是分子生物学研究的一个重要领域,也是获取大量纯化蛋白质、用于深入研究其性质及功能的有效途径之一。大肠杆菌表达系统完善,已被广泛用于外源基因的过量表达。本研究以大肠杆菌为表达体系,将12个来源不同的基因或融合基因,分别构建到不同细菌表达载体,转入细菌后,经IPTG诱导过量表达这些蛋白质,通过亲和层析纯化后用于分析鉴定。主要结果如下：1.通过PCR扩增目的基因几丁质酶(Chi)、禾谷镰刀菌特异单链抗体E1和E9叁个基因,以及几丁质酶和抗菌肽(MsrAl)分别与这两个抗体形成的Chie1、Chie9、MsrA1e1和MsrA1e9四个融合基因；霍乱毒素B亚基(CTB)分别与热休克多肽p277形成的单体、二聚体和叁聚体共叁个融合蛋白(CTB-p277、CTB-2p277和CTB-3p277)；受赤霉菌毒素诱导的小麦基因AN和UN；将这12个基因的DNA酶切后,分别克隆到原核表达载体pET-22b,其中AN和UN基因构建到pGEX-6p-1载体。2.将上述载体转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导外源蛋白表达,优化表达条件。结果表明,培养细菌至浓度为OD600=0.6时,加入终浓度为1 mmol/L的异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,不同蛋白的最佳诱导表达温度和时间如下：几丁质酶、抗体E1和E9、CTB-p277、CTB-2p277、CTB-3p277、AN和UN在28℃诱导6h的效果最好；而Chie1和Chie9融合蛋白37℃诱导6 h的表达量最高,MsrA1e1和MsrA1e9融合蛋白仅需在37℃诱导表达2 h。3.原核表达的12个外源蛋白经SDS-PAGE电泳和Western Blot分析,其分子量大小与预期完全一致。尽管这些蛋白在细菌中诱导表达的产物主要为包涵体,但利用8mol/L尿素缓冲液溶解蛋白包涵体,再经亲和层析柱纯化后,获得了大量可溶性蛋白；对部分蛋白的功能分析表明,它们具有抑制赤霉病菌的活性。这些研究结果为进一步研究这些蛋白的特性和功能打下了基础。(本文来源于《华中农业大学》期刊2011-06-01）
王科俊,吕俊杰,冯伟兴,王鑫,贺波[10]（2011）在《一种新的真核基因剪接位点识别方法》一文中研究指出剪接位点识别是基因组分析的关键步骤.为提高真核基因剪接位点识别的精度,提出一种融合多种信息的方法.在采用序列信息与剪接位点信号信息的基础上,增加剪接调控元件信息,并引入结构信息,针对供体位点与受体位点的不同特点,为其建立不同的识别模型.实验结果表明:该方法对剪接位点的识别具有较好的效果,其识别精度可达95%以上.(本文来源于《电子学报》期刊2011年05期）
真核基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
[目的]旨在克隆红鳍东方鲀PPARγ基因的cDNA,并通过构建真核表达载体pCMV-3Tag-4A-PPARγ,分析myc-PPARγ融合蛋白在大鼠L6细胞的表达及亚细胞定位。[方法]利用RT-PCR技术克隆红鳍东方鲀PPARγ基因的cDNA,构建pCMV-3Tag-4A-PPARγ重组质粒,转染至大鼠L6细胞,共聚焦显微镜下观察myc-PPARγ的亚细胞定位。[结果]红鳍东方鲀PPARγ基因cDNA ORF全长1557 bp,共编码518个氨基酸,pCMV-3Tag-4A-PPARγ融合蛋白在大鼠L6细胞核中表达,为深入探讨鱼类PPARγ生物学功能奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
真核基因论文参考文献
[1].胡伊乐,杨为民,郭绍芳.大豆油乳剂包裹真核基因载体在细胞转染中的应用[C].第五届全国解剖学技术学术会议论文集.2015
[2].张伟,付云,李翠萍,渡部终五.红鳍东方鲀PPARγ真核基因表达载体构建及亚细胞定位研究[J].现代农业科技.2014
[3].叶玲玲,刘红,李世崇,王启伟,蓝叁春.一种新型的生物素诱导的真核基因表达调控系统的建立[J].生物工程学报.2014
[4].郑大军.真核基因剪接位点的特征描述与识别算法研究[D].福建农林大学.2014
[5].李晓霞,袁军,陈建苏.真核基因重组Sox2及其在小鼠角膜基质细胞中的表达[J].眼科新进展.2013
[6].聂玉敏,刘宏德,孙啸.调控真核基因表达的非编码序列[J].生物物理学报.2013
[7].董刚,郑建金,李涛,徐欣,卢恕来.血管内皮生长因子165真核基因转染载体转染的骨骼肌细胞[J].中国组织工程研究.2012
[8].亓合媛,张昭军,李雅娟,方向东.染色质构象调控真核基因的表达[J].遗传.2011
[9].段小君.真核基因的原核表达及分析[D].华中农业大学.2011
[10].王科俊,吕俊杰,冯伟兴,王鑫,贺波.一种新的真核基因剪接位点识别方法[J].电子学报.2011
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