导读:本文包含了包膜糖蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:蛋白,包膜,病毒,疫苗,出血热,综合征,疏水。
包膜糖蛋白论文文献综述
黄亚楠,王志玉[1](2019)在《副流感病毒5包膜糖蛋白的结构与功能》一文中研究指出副流感病毒5(Parainfluenza virus 5,PIV5)属于单股负链不分节段的RNA病毒,迄今尚未发现PIV5与人类已知的疾病有关,主要被用作疫苗载体。其包膜上存在叁种糖蛋白:融合(Fusion,F)蛋白、血凝素-神经氨酸酶(Hemaggulatinin-neuraminidase,HN)蛋白、小疏水性(Small hydrophobic,SH)蛋白。F蛋白能在同源性HN蛋白的协助下介导膜融合,HN蛋白具有受体识别、神经氨酸酶活性和促细胞融合活性,SH蛋白则在病毒致病机制中起作用。本文主要阐述了叁种包膜糖蛋白的结构和功能,旨在为PIV5的研究提供一些参考。(本文来源于《病毒学报》期刊2019年06期)
刘硕,张黎,王玉琳,黄维金,王佑春[2](2019)在《埃博拉病毒包膜糖蛋白变异及抗原表位研究进展》一文中研究指出埃博拉病毒在人类和非人灵长类中引起严重出血热疾病,死亡率高。包膜糖蛋白为埃博拉病毒唯一与病毒吸附宿主细胞、融合和进入等功能相关的蛋白。包膜糖蛋白突变会影响病毒感染力、细胞嗜性和与抗血清的中和敏感性。本文系统分析了埃博拉病毒包膜糖蛋白的氨基酸突变,结合抗体结合位点和T细胞表位分析其对于埃博拉病毒感染和疫苗保护效果的影响。(本文来源于《病毒学报》期刊2019年05期)
万明明[3](2019)在《以包膜糖蛋白gB/D为抗原的2型单纯疱疹病毒新型疫苗的研究》一文中研究指出2型单纯疱疹病毒(HSV-2)是一种世界范围内传播的最常见的性传播病毒之一,具有嗜神经性,通过潜伏在神经元细胞中而在体内持续存在。生殖器疱疹是2型单纯疱疹病毒引起的一种疾病,通常是通过直接接触被感染者皮肤表面或分泌物进行传播的,但由于HSV-2病毒通常与艾滋病病毒(HIV)协同感染,因此常能增加HIV感染风险3-4倍。单纯疱疹病毒具有一次感染,终身潜伏,反复复发的特点,光照、免疫功能下降,压力等都会造成病毒的复发。目前针对HSV-2病毒没有有效的疫苗来预防或治疗,感染HSV-2病毒后只能通过服用抗病毒药物,如阿昔洛韦等来进行治疗,但由于病毒感染时常伴随无症状脱落或轻微瘙痒,患者并不知道自己已经患病,使HSV-2病毒的预防变得极为困难,且长期服用抗病毒药物也容易造成耐药突变病毒株的产生,因此对于HSV-2病毒疫苗的研究变得非常重要。由于HSV-2病毒具有感染后潜伏并复发的现象,因此HSV-2病毒的疫苗分为预防性疫苗和治疗性疫苗两大类。预防性疫苗的目的是诱导机体产生中和抗体,预防HSV-2病毒的感染,防止病毒的潜伏,常用小鼠作为动物模型,而治疗性疫苗的目的是诱导机体细胞免疫应答,主要用于已经感染了HSV-2病毒的患者,通过细胞免疫清除机体内复发的病毒,以及通过缓解病毒复发时的症状产生来降低患者的痛苦,常用豚鼠作为动物模型。本实验分别研究了HSV-2病毒的预防性及治疗性疫苗在小鼠和豚鼠模型中的免疫原性及保护作用。(1)构建了两种质粒分别为Ucoe-mgB和Ucoe-gBFerritin,并验证了两种质粒在真核细胞293T中的表达。(2)使用293 6E细胞大量表达两种蛋白,并与DNA疫苗联合免疫小鼠,评价免疫原性及针对致死剂量攻毒的小鼠的保护力。(3)使用本实验室构建的重组腺病毒疫苗rAd-gD,rAd-△UL25,rAd-gD-△UL25免疫半数致死剂量攻毒的豚鼠,评价重组腺病毒疫苗对于豚鼠的保护力。结果表明:(1)在DNA疫苗的水平上,Ferritin的引入没有提升gB的免疫原性。(2)DNA疫苗与DNA-蛋白联合疫苗对于诱导细胞免疫和体液免疫水平上各有优势,细胞免疫对于清除体内初次感染后二次复制出的病毒具有很好的清除作用,而体液免疫对于初次感染的病毒具有杀伤作用,且几种疫苗均诱导Th1偏向的Th细胞免疫。(3)重组腺病毒疫苗可以诱导豚鼠产生特异性抗体和中和抗体,引入UL25作为免疫原后可以更好的保护豚鼠,可以降低病毒复发的频率,在病毒复发时抑制病理状况的产生。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-06-01)
张文帅,郭喜玲,迟莹,焦永军[4](2019)在《抗严重发热伴血小板减少综合征病毒包膜糖蛋白单链抗体的筛选和鉴定》一文中研究指出目的筛选及表达抗严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)包膜糖蛋白(Gn)单链抗体(scFv)。方法利用人源化SFTSV的scFv文库与固相化包被的SFTSV-Gn蛋白特异性结合,经过4轮"吸附-洗脱-扩增"筛选能特异性结合SFTSV-Gn蛋白的噬菌体scFv,随机挑取最后一轮单菌落进行噬菌体-ELISA鉴定,将经过测序鉴定正确的阳性克隆转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中原核表达,用Western blot法鉴定scFv的表达, ELISA鉴定纯化后scFv的结合活性。结果筛选出3株不同序列的抗SFTSV-Gn蛋白的scFv, Western blot法结果显示scFv得到正确表达, ELISA结果显示纯化后的scFv具有结合活性。结论成功筛选及表达了抗SFTSV-Gn蛋白的scFv。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2019年01期)
刘亚轻,王志玉[5](2018)在《新城疫病毒包膜糖蛋白的结构与功能》一文中研究指出新城疫是一种禽类传染病,可对养禽业带来严重的经济损失。其病原新城疫病毒具有包膜,基因组是单股、负链、不分节段的RNA,具有溶瘤活性,编码NP、P、M、F、HN和L六种结构蛋白,其中位于病毒包膜上的融合蛋白(F)和血凝素-神经氨酸酶(HN)两种糖蛋白对NDV的入侵及毒力有着重要的作用。本文首先总结了两种包膜糖蛋白结构与功能的基本情况,在此基础上,整合了近年来国内外的研究,发现了一些矛盾点,并且将HN蛋白的其他功能进行概述,为NDV包膜糖蛋白的研究提供了新的视角。(本文来源于《病毒学报》期刊2018年04期)
张锦鹏,张冠文,宣国云,张欢,姜东伯[6](2018)在《溶酶体靶向的汉坦病毒包膜糖蛋白DNA疫苗的体液免疫评价和攻毒保护效果》一文中研究指出目的:构建嵌合溶酶体相关膜蛋白(LAMP)的汉坦病毒糖基化蛋白DNA疫苗并对其免疫进行评价。方法:利用前期实验构建的重组质粒pVAX-Gn、pVAX-Gc、pVAX-LAMP/Gn和pVAX-LAMP/Gc以及inactivated疫苗免疫BALB/c小鼠,分别通过间接ELISA和中和试验检测免疫小鼠血清中的特异性抗体和中和抗体;攻毒实验检测小鼠体内的保护效力。结果:间接ELISA结果显示,pVAX-LAMP/Gc组特异性抗体滴度最高,依次为pVAX-Gc、pVAX-LAMP/Gn、pVAX-Gn与inactivated疫苗组;中和结果显示,LAMP组均优于相应传统DNA疫苗组,且抗体效价均优于Inactived vaccine组;攻毒实验显示,DNA疫苗和inactivated疫苗组小鼠体内无汉坦病毒特异性抗原检出。结论:LAMP分子的嵌合DNA疫苗可诱导更高水平的抗体,在小鼠体内有较好的保护效力,这一靶向策略有望成为提高DNA疫苗效价的有效方式。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2018年03期)
闻雁波,吴诗坡,侯利华,陈薇[7](2018)在《截短型马尔堡病毒包膜糖蛋白的原核表达纯化及鉴定》一文中研究指出目的:制备重组可溶性截短型马尔堡病毒包膜糖蛋白(MAGP),并验证其抗原性。方法:PCR扩增MAGP截短片段MAGP_(40-289)、MAGP_(148-526)、MAGP_(240-526)和MAGP_(258-526),克隆至原核表达载体pET-32a并转化至大肠杆菌进行诱导表达,经亲和层析、阴离子交换层析获得纯度良好的可溶性截短蛋白抗原,利用ELISA试验对该蛋白的抗原性进行验证。结果:截短抗原MAGP_(240-526)在大肠杆菌中可溶性表达良好,表达量约17 mg/L;Western印迹显示该抗原能与Ad5-MAGPopt免疫后的小鼠血清发生特异反应。结论:经原核系统表达的截短型MAGP具有良好的抗原性,可用于检测相关疫苗激发的抗MAGP抗体水平或评价抗MAGP的结合活性。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2018年01期)
张锦鹏,张冠文,宣国云,孟强,张哲[8](2017)在《汉滩病毒包膜糖蛋白嵌合DNA疫苗的细胞免疫评价及其优势表位的筛选》一文中研究指出目的:筛选Gn和Gc抗原优势表位,为汉滩病毒疫苗研究提供方向.方法:通过构建汉坦病毒包膜糖蛋白Gn与Gc嵌合溶酶体相关膜蛋白的DNA疫苗pVAX-LAMP/Gn,pVAX-LAMP/Gc,利用酶联免疫斑点实验(ELISpot)长期评估了BALB/c小鼠体内的细胞免疫应答.结果:在刺激T淋巴细胞的短效与长效免疫中,pVAX-LAMP/Gc组的效应优于其他组,并筛选出优势抗原表位.结论:目前许多新型汉滩病毒疫苗研究缺少细胞免疫应答评价和记忆免疫应答评价.筛选出的Gn和Gc的抗原优势表位,可以为新型汉滩病毒疫苗的研制奠定良好的基础.(本文来源于《转化医学电子杂志》期刊2017年10期)
张锦鹏,张冠文,宣国云,孟强,姜东伯[9](2017)在《汉坦病毒包膜糖蛋白Gn与Gc基因疫苗的免疫对比研究》一文中研究指出背景:肾综合征出血热(HFRS)是以发热、出血、急性肾功能损伤为主要临床表现的自然疫源性疾病。其病原体主要为布尼亚病毒科汉坦病毒属的汉滩病毒(HTNV)。我国是世界上发病人数最多的国家,严重威胁疫区人民的生命财产安全。汉坦病毒包膜糖蛋白Gn及Gc具有较好的免疫原性,可诱导产生良好的免疫应答。(本文来源于《第十二届全国免疫学学术大会分会场交流报告集》期刊2017-10-26)
马瑞雪[10](2017)在《汉滩病毒包膜糖蛋白H-2K~b限制性CTL表位的筛选与鉴定》一文中研究指出【研究背景】肾综合征出血热(Hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS),是一种急性病毒性传染病,全球90%的HFRS病例发生在我国,该病来势凶猛,变化较快,病死率较高,一直以来严重危害我国人民的身心健康。汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)是引起我国HFRS的主要病原之一,探究HTNV特异性T细胞应答规律以及鉴定HTNV结构蛋白上相关表位对研究其免疫应答机制、免疫治疗方法,以及研发HFRS新型疫苗均具有重要意义。现有的多数研究表明,HTNV核衣壳蛋白(Nucleocapsid protein,NP)上具有细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位,包膜糖蛋白(Glycoprotein,GP)上存在有中和表位和血凝表位。CTL在识别靶细胞后,可通过穿孔素途径和死亡受体途径杀伤病毒感染细胞,并引起感染细胞的死亡或凋亡,此外还可通过分泌细胞因子调节机体免疫功能。因此,HTNV CTL表位的研究对HTNV感染后的免疫保护和免疫治疗十分关键。近期研究发现HTNV GP也具有诱导T细胞应答的能力,并明确了HTNV GP上存在辅助性T淋巴细胞(Helper T lymphocyte,Th)表位,而目前尚无HTNV GP上是否存在特异性CTL表位的成熟研究报道。若能在HTNV GP上发现并鉴定出CTL特异性表位,对于HTNV新型疫苗的研究具有重要意义。本研究利用生物信息学软件对HTNV GP一级结构进行了相关参数分析,最终预测并合成了15个H-2K~b限制性CTL表位肽,并对其进行了筛选、鉴定及生物学活性和免疫学特性研究,以期明确HTNV GP上是否存在CTL特异性表位。【研究方法】用生物信息学表位预测软件IEDB(Immune epitope database and analysis resource)将HTNV GP一级结构进行相关参数分析,对可能存在的CTL表位进行预测;同时用另一生物信息学软件BIMAS(Bio Informatics and molecular analysis section),综合评价各预测表位与小鼠主要组织相容性复合体(Major histocompatibility complex,MHC)编码产物H-2K~b分子的结合指数,最后初步筛选出15个H-2K~b限制性HTNV CTL表位肽并合成。通过酶联免疫斑点实验(Enzyme Linked Immunospot assay,ELISPOT),将HTNV感染C57BL/6小鼠脾细胞,分别用上述预测的15个HTNV CTL表位肽刺激,并用已知HTNV NP特异性CTL表位肽NP1作为阳性对照,筛选出可有效刺激感染小鼠脾脏中T细胞分泌IFN-γ的多肽;进而,以CD4+T细胞去除后的小鼠脾细胞(CD4depleted SP)或CD8+T细胞去除后的小鼠脾细胞(CD8 depleted SP)作为效应细胞,利用ELISPOT实验筛选并鉴定出能刺激CD8+T细胞反应的CTL优势表位肽。通过CTL杀伤实验,以HTNV感染小鼠脾细胞作为效应细胞,分别用抗原肽致敏的EL-4细胞和HTNV感染的巨噬细胞作为CTL杀伤实验的靶细胞,进一步验证各HTNV GP CTL表位肽是否具有刺激效应细胞应答的潜能。在上述工作的基础上,我们进一步研究并分析了HTNV GP CTL表位肽的生物学活性及免疫学特性。通过淋巴细胞增殖实验检测CTL表位肽促进C57BL/6小鼠外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)增殖的能力;采用胞内细胞因子染色法检测CTL表位肽刺激小鼠脾细胞分泌IFN-γ的能力。进而,将CTL表位肽与弗氏佐剂充分乳化后,皮下多点注射免疫C57BL/6小鼠,以已知HTNV NP特异性CTL表位肽NP1、HFRS灭活疫苗作为阳性对照;以PBS、弗氏佐剂作为阴性对照。总共免疫4次,每次间隔10天,在末次免疫后第10天,通过ELISPOT和CTL杀伤实验,分别检测免疫小鼠脾细胞分泌IFN-γ的能力以及CTL的特异性杀伤活性,进而评价抗原表位肽在体内所介导的细胞免疫应答水平;通过酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunoadsordent assay,ELISA)和微量细胞中和实验,分别检测免疫小鼠血清中抗HTNV NP及GP的特异性抗体滴度和中和抗体滴度,进而评价抗原表位肽在体内所介导的体液免疫应答水平。同时取HTNV 76-118株以105 pfu/只的感染剂量,采用肌肉注射的途径感染免疫小鼠,病毒感染后第3天,通过ELISA和实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR),分别检测免疫小鼠各组织脏器中HTNV特异性抗原和核酸。从而综合评价CTL表位肽对HTNV感染小鼠的保护作用。【实验结果】根据IEDB预测表位肽的Percentile Rank排名(Percentile Rank值越低,意味着预测的CTL表位肽可能诱导机体产生的免疫应答能力越强),筛选出HTNV GP上排名前15个H-2K~b限制性CTL表位肽,均由8个氨基酸组成,分别为GP1(aa39-aa46:SVIGYVEL)、GP2(aa44-aa51:VELPPVPL)、GP3(aa64-aa71:SMDNHQSL)、GP4(aa208-aa215:IVCFFVAV)、GP5(aa420-aa427:VNFVCQRV)、GP6(aa456-aa463:ITSLFSLL)、GP7(aa489-aa496:VTFCFGWV)、GP8(aa499-aa506:PAITFIIL)、GP9(aa797-aa804:ITIRYSRR)、GP10(aa845-aa852:TLLFFGPL)、GP11(aa925-aa932:QSFNTSTM)、GP12(aa987-aa994:VGFTLTCL)、GP13(aa1102-aa1109:FSGNWIVL)、GP14(aa1113-aa1120:CVFLLFSL)、GP15(aa1114-aa1121:VFLLFSLV);BIMAS综合评价了各预测表位肽与H-2K~b分子的结合指数,表明预测的15个CTL表位肽均可与H-2K~b分子结合,结合指数越高意味着其与H-2K~b分子之间的亲和力越大。ELISPOT结果显示,在预测的15个CTL表位肽中,只有GP1、GP2、GP3、GP6、GP8、GP10等6个可诱导HTNV感染小鼠脾脏中T淋巴细胞分泌IFN-γ,其平均斑点形成细胞数(Spot-forming cells,SFC)分别为225,130,257,461,196,162。用上述6个阳性抗原肽分别刺激去除CD4+T细胞的淋巴细胞时,GP1、GP2、GP3、GP8、GP10均未明显诱导淋巴细胞分泌IFN-γ,而GP6保持较高的斑点数,其平均SFC为421;同时,用上述6个阳性抗原肽分别刺激去除CD8+T细胞的淋巴细胞时,结果恰好相反,GP1、GP2、GP3、GP8、GP10刺激淋巴细胞后保持较高的斑点数,其平均SFC分别为216、129、229、183、179,而GP6未明显诱导淋巴细胞分泌IFN-γ。而且GP6的实验结果与阳性对照NP1的实验结果一致。上述结果表明,GP6可能为HTNV GP特异性CTL优势表位肽。CTL杀伤实验结果显示,当HTNV感染的小鼠脾细胞分别用GP6、阳性对照NP1刺激后作为效应细胞,抗原肽致敏的EL-4细胞(H-2K~b限制性)、HTNV感染的小鼠腹腔巨噬细胞作为靶细胞时,随着效靶比(Effector cell/Target cell,E/T)的升高,其特异性杀伤活性也随之提高;然而,当抗原肽未致敏的EL-4细胞、HTNV未感染的巨噬细胞,以及P815细胞(H-2Dd限制性)作为靶细胞时,效应细胞的非特异性杀伤活性均较低,未超过10%。结果表明,GP6能够有效刺激CTL对HTNV感染的靶细胞进行特异性杀伤。对HTNV GP6进行生物学活性鉴定,其流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测结果显示,GP6可有效刺激小鼠PBMC的增殖,与阴性对照组相比,增殖的细胞占细胞总数的比例明显增加,二者存在显着的统计学差异;并且GP6可强烈诱导小鼠淋巴细胞分泌IFN-γ,与阴性对照组相比,其IFN-γ+CD8+T细胞占CD8+T细胞总数比例明显增加,二者存在显着的统计学差异。对HTNV GP6进行免疫学活性检测的结果表明,GP6可刺激C57BL/6小鼠产生强烈的细胞免疫应答,且免疫小鼠脾细胞IFN-γ应答水平均显著高于其他各组。CTL杀伤实验结果表明,随着E/T的升高,GP6特异性CTL的杀伤活性不断增强。但GP6未能诱导C57BL/6小鼠产生针对HTNV GP的特异性抗体以及中和抗体。对免疫小鼠进行动物保护实验的ELISA结果显示,在GP6和阳性对照NP1免疫组小鼠的肝脏、脾脏、肾脏中,其HTNV特异性抗原含量与PBS、弗氏佐剂对照组相比,明显降低。qRT-PCR结果显示,在GP6和阳性对照NP1免疫组小鼠的肝脏、脾脏和肾脏中,其HTNV核酸载量与PBS、弗氏佐剂对照组相比,明显降低,该结果与ELISA检测结果相一致。在GP6免疫组小鼠的肝脏、脾脏、肾脏中,其HTNV特异性抗原含量以及核酸载量,与阳性对照NP1免疫组相比,无统计学差异。上述结果表明,GP6在体内所介导的细胞免疫应答对HTNV感染小鼠具有一定的保护作用。【结论】本研究成功筛选并鉴定出HTNV GP上一个CTL优势表位肽—GP6,可强烈诱导CD8+T细胞应答,并具有良好的生物学活性。将其与弗氏佐剂混合免疫C57BL/6小鼠后,可有效诱导机体产生特异性细胞免疫应答,而且相关细胞免疫检测指标均优于HFRS灭活疫苗组。免疫小鼠保护实验结果证实,GP6抗原表位肽所介导的细胞免疫应答对HTNV感染小鼠具有一定的保护作用。本研究为探究HTNV GP上特异性CTL表位提供了依据。(本文来源于《第四军医大学》期刊2017-05-01)
包膜糖蛋白论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
埃博拉病毒在人类和非人灵长类中引起严重出血热疾病,死亡率高。包膜糖蛋白为埃博拉病毒唯一与病毒吸附宿主细胞、融合和进入等功能相关的蛋白。包膜糖蛋白突变会影响病毒感染力、细胞嗜性和与抗血清的中和敏感性。本文系统分析了埃博拉病毒包膜糖蛋白的氨基酸突变,结合抗体结合位点和T细胞表位分析其对于埃博拉病毒感染和疫苗保护效果的影响。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
包膜糖蛋白论文参考文献
[1].黄亚楠,王志玉.副流感病毒5包膜糖蛋白的结构与功能[J].病毒学报.2019
[2].刘硕,张黎,王玉琳,黄维金,王佑春.埃博拉病毒包膜糖蛋白变异及抗原表位研究进展[J].病毒学报.2019
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[9].张锦鹏,张冠文,宣国云,孟强,姜东伯.汉坦病毒包膜糖蛋白Gn与Gc基因疫苗的免疫对比研究[C].第十二届全国免疫学学术大会分会场交流报告集.2017
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