砂藓抗旱相关基因RcSOD的克隆及表达分析

砂藓抗旱相关基因RcSOD的克隆及表达分析

论文摘要

超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)是植物抗氧化系统的关键酶,在植物应对各种环境胁迫的过程中发挥重要的作用。本研究在砂藓(Racomitrium canescens)干旱胁迫转录组数据中发现一个表达量上调的SOD基因,将其命名为RcSOD。通过RT-PCR技术对RcSOD的开放阅读框进行了克隆及相关的生物信息学预测分析。通过实时荧光定量PCR (qPCR)对砂藓复水和脱水过程中RcSOD基因的表达量变化进行了检测分析。结果显示,该基因c DNA全长1 230 bp,开放阅读框长555 bp。RcSOD编码蛋白质的氨基酸数为184,相对分子质量为18.9 kD,理论等电点为5.94,不稳定指数为18.35,总平均亲水性为-0.172,预测该蛋白为疏水性蛋白,属于非跨膜、非分泌型蛋白,含有Cu/Zn SOD结构域。系统进化分析表明,RcSOD与藓类Cu/Zn SOD蛋白属于同一分枝。实时荧光定量PCR结果显示,RcSOD基因在复水和干旱的条件下均有差异性表达,在脱水过程中显著上调,初步推测RcSOD可能参与砂藓干旱胁迫应答反应。本研究对进一步研究砂藓中Cu/Zn SOD基因的生物学功能具有推动作用。

论文目录

  • 1 结果与分析
  •   1.1 RcSOD基因的克隆
  •   1.2 RcSOD蛋白质生物信息学分析
  •   1.3 RcSOD蛋白质系统进化分析
  •   1.4 砂藓复水和脱水过程中RcSOD表达分析
  • 2 讨论
  • 3 材料与方法
  •   3.1 材料
  •   3.2 总RNA的提取及cDNA第一条链的合成
  •   3.3 RcSOD基因的克隆
  •   3.4 生物信息学分析
  •   3.5 qPCR分析
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 沙伟,蒋卓君,张梅娟,马天意

    关键词: 砂藓,干旱胁迫,基因克隆,表达分析

    来源: 基因组学与应用生物学 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技

    专业: 生物学

    单位: 齐齐哈尔大学生命与农林学院

    基金: 齐齐哈尔大学研究生创新科研项目(YJSCX2016-ZD17),国家自然科学基金项目(31570207)共同资助

    分类号: Q943.2

    DOI: 10.13417/j.gab.038.002144

    页码: 2144-2151

    总页数: 8

    文件大小: 1941K

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