磷酸化对人中心蛋白2与蜂毒素作用的影响

磷酸化对人中心蛋白2与蜂毒素作用的影响

论文摘要

人中心蛋白2(Human centrin 2,HsCen2)是一种重要的钙离子结合蛋白。文章通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native polyarylamide gel electrophoresis,native-PAGE)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS polyarylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、DEAE-Sepharose阴离子交换层析、远紫外圆二色光谱(circular dichroism,CD)及荧光光谱的方法,在0.01mol/L Hepes(pH 7.4,25℃),研究了磷酸化修饰对HsCen2与蜂毒素(melittin)结合的影响。结果表明,蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)可以催化人中心蛋白2Ser170磷酸化反应,形成磷酸化的HsCen2(phosphorylated HsCen2,HsCen2p)。磷酸化修饰使得HsCen2的α-螺旋含量明显减少,同时疏水空腔外露程度减弱。另外,HsCen2p中加入蜂毒素使蛋白的α-螺旋含量减少。荧光发射光谱表明HsCen2p与melittin形成1∶1的复合物,其结合能力为(1.5±0.05)×105L/mol。

论文目录

  • 0 引言
  • 1 实验部分
  •   1.1 材料
  •   1.2 HsCen2磷酸化修饰
  •   1.3 远紫外圆二色光谱
  •   1.4 荧光光谱测定
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 人中心蛋白2的磷酸化修饰
  •   2.2 磷酸化修饰后人中心蛋白2的构象变化
  •   2.3 HsCen2、HsCen2p与蜂毒素的相互作用
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 赵亚琴,杨静

    关键词: 人中心蛋白,磷酸化,蜂毒素

    来源: 山西大学学报(自然科学版) 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 生物学,化学

    单位: 山西大学分子科学研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室

    基金: 国家自然科学基金(20901048,21571117),教育部博士点专项基金(20131401110011)

    分类号: O641.3;Q51

    DOI: 10.13451/j.cnki.shanxi.univ(nat.sci.).2018.09.04.004

    页码: 592-598

    总页数: 7

    文件大小: 281K

    下载量: 64

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