基于核酸检测的虾过敏源标准物质研究

基于核酸检测的虾过敏源标准物质研究

论文摘要

选择最常食用的海产对虾作为虾过敏源标准物质的候选物,提取并纯化其基因组DNA,采用序列测定法对设定的目标基因成分进行定性鉴定。用数字PCR技术精确确定海虾16S基因、虾真核生物18S基因、胡萝卜真核生物18S基因的拷贝数,以胡萝卜基因组DNA为本底,重量法配置虾16S基因拷贝数/真核生物18S基因组拷贝数比值为1%。评定虾16S基因拷贝数/真核生物18S基因拷贝数比值的定值不确定度,扩展不确定度为0.09%。并利用数字PCR仪对配置的标准物质进行特性量值验证,结果一致性良好。可为基于核酸检测的食物过敏源标准物质的研制提供方法参考。

论文目录

  • 0 引言
  • 1 实验部分
  •   1.1 仪器设备
  •   1.2 材料试剂
  •   1.3 基因组DNA提取及纯度分析
  •   1.4 数字PCR方法
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 基因组提取DNA纯化分析
  •   2.2 目标基因扩增条件
  •   2.3 标准物质均匀性检验
  •   2.4 标准物质稳定性考察
  •   2.5 标准物质的定值
  •   2.6 标准物质的定值不确定度分析
  •     2.6.1 不确定度的量化
  •     2.6.2 合成标准不确定度
  •   2.7 定值结果
  • 3 数字PCR验证
  • 4 结束语
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李春,高运华,王治栋,黄文胜

    关键词: 核酸检测,过敏源,标准物质

    来源: 中国测试 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅱ辑,工程科技Ⅰ辑,农业科技

    专业: 轻工业手工业,水产和渔业

    单位: 中国计量科学研究院,中国检验检疫科学研究院

    基金: 国家质量研发重点专项项目(2017YFF0204604),国家质检公益行业科研专项(201510026),标准物质平台项目(32-APT1802-12)

    分类号: TS254.7

    页码: 49-53

    总页数: 5

    文件大小: 3014K

    下载量: 83

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