论文摘要
本文探讨了CRISPR/dCas9系统对苜蓿中华根瘤菌Sinorhizobium meliloti 320内源hemE基因的弱化效果,以提高其维生素B12的能力。实验首先验证了CRISPR/dCas9系统及CRISPR/dCas9系统不同N20靶向位点在S.meliloti 320中对外源基因gfp的弱化效果。结果显示,当添加诱导剂1%木糖时,单位OD荧光值降低为对照菌株的34.18%,当N20靶位靠近翻译起始位点时,对结构基因弱化效果明显。进一步探究CRISPR/dCas9对S.meliloti 320中内源的弱化效果发现,在加入终浓度为1%木糖诱导后,hemE基因的转录水平与对照相比下降了28.3%。将hemE基因弱化后的工程菌进行摇瓶发酵,其维生素B12产量较对照株提高了9.86%。研究结果显示,hemE基因的弱化有效促进了代谢流引向维生素B12合成,CRISPR/dCas9系统对S.meliloti 320内源结构基因具有较好的弱化效果。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 吴香莹,董会娜,刘振权,张大伟
关键词: 维生素,基因
来源: 工业微生物 2019年06期
年度: 2019
分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑
专业: 生物学,一般化学工业
单位: 大连工业大学食品学院,中国科学院天津工业生物技术研究所
基金: 天津市杰出青年科学基金(17JCJQJC45300),国家自然科学基金(No.31800086)
分类号: Q943.2;TQ920.1
页码: 32-38
总页数: 7
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