导读:本文包含了金属硫蛋白基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,金属,基因,多态性,糖尿病,转基因,肾脏。
金属硫蛋白基因论文文献综述
强承魁,秦越华,张明,梁玉莹,曹丹[1]（2019）在《小麦金属硫蛋白基因的克隆与组织表达分析》一文中研究指出为了解小麦金属硫蛋白(metallothionein, MT)的分子生物学特征及组织表达特性,本研究从‘徐麦30’(Xm-30)、‘保麦2号’(Bm-2)中克隆出该基因(TaMT)后进行序列分析,并采用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)解析了其在小麦不同组织间的表达差异。结果表明,2个品种中该基因DNA序列长度分别为339 bp和338 bp且一致性达99.71%,均编码49个氨基酸,含有1个CXC结构和2个CXXXC结构,预测的分子量和理论等电点分别为4.77 kD和4.78,二级结构中α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲各占20.41%、12.24%、8.16%和59.18%,亚细胞定位于细胞核、线粒体、细胞骨架、细胞质和液泡的比例分别为69.6%、13.0%、8.7%、4.3%和4.3%;TaMT蛋白与硬粒小麦的同源性高达100%,与大麦的同源性为95.9%,显示出高度保守性;qRT-PCR检测该基因在2个小麦的4种组织中均有表达,但存在组织特异性,其中茎表达量最高,其次依次为根、叶和籽粒;‘Bm-2’根、茎、叶和籽粒中的表达量均显着高于‘Xm-30’。上述研究结果可为后续开展小麦MT解毒机理和功能等研究提供理论依据。(本文来源于《分子植物育种》期刊2019年14期）
茅光耀,郭云海,张仪,肖宁[2]（2019）在《Cu~(2+)胁迫对福寿螺金属硫蛋白基因mRNA表达的影响》一文中研究指出探讨不同浓度Cu~(2+)胁迫对福寿螺肝胰腺组织金属硫蛋白(metallothionein, MT)基因表达的影响,取15只福寿螺,在100μg/L Cu~(2+)离子胁迫后的0、 1、 7、 14、 21 d,各取3只福寿螺,分离肝脏,提取RNA,反转录为c DNA,实时荧光定量PCR检测福寿螺金属硫蛋白基因(Pc MT) mRNA的相对表达水平。以cDNA为模板, PCR扩增Pc MT基因完整编码序列,连接至pET28a质粒,转入大肠埃希菌BL21 (DE3)感受态细胞中,挑取阳性克隆进行鉴定与测序。用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导重组蛋白表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物。结果显示, Cu~(2+)胁迫0～14 d,福寿螺肝脏中Pc MT基因mRNA的表达量持续上升,峰值为2.1±0.2, 21 d时下降为1.1±0.1。PCR扩增Pc MT基因,获得长度约300 bp的片段,构建的pET28a-Pc MT质粒经PCR、双酶切和测序鉴定,均与预期大小一致。SDS-PAGE结果显示, Pc MT蛋白的相对分子质量(Mr)约为17 000。(本文来源于《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》期刊2019年03期）
赵婧竞[3]（2019）在《细叶百合2型金属硫蛋白（LpMT2）基因的克隆及其功能解析》一文中研究指出细叶百合(Lilium pumilum)是百合科(Liliaceae)百合属(Lilium)多年生球根花卉,具有很高的观赏价值和很强的抗逆性,可作为百合抗性育种的重要亲本,但关于细叶百合抗性基因的研究少见报导;金属硫蛋白(metallothionein,简称MT)是一类富含半胱氨酸和金属离子的非酶类蛋白质,与植物抗盐碱胁迫、抗氧化胁迫以及清除自由基等机制有关。本研究以细叶百合叶片的cDNA为模版,采用PCR技术克隆得到一段长234bp,编码77个氨基酸的MT2基因读码框序列,命名为LpMT2,通过实时荧光定量PCR(QRT-PCR)技术分析了其表达模式。构建了 pBI121-LpMT2植物表达载体并成功转化到细叶百合中,对过表达LpMT2细叶百合的抗逆性进行了进一步解析,主要研究结果如下:(1)从细叶百合中分离的LpMT2基因编码蛋白具有Metallothio_2结构域,属于Metallothio_2超家族。氨基酸对比结果显示,LpMT2与铁皮石斛DcMT2、中华猕猴桃(原变种)AcMT2、大豆GmMT2以及拟南芥AtMT2a具有较高的同源性,推测其在响应逆境胁迫等方面的功能也与它们类似。亚细胞定位预测结果显示,LpMT2主要存在于细胞质中。(2)通过QRT-PCR分析了 LpMT2基因在细叶百合不同器官中的表达模式,发现LpMT2基因在细叶百合的花中表达量最高,其次是成熟叶片、幼嫩叶片、种子、鳞茎,在根中的表达量最低；通过对不同逆境胁迫下LpMT2基因在细叶百合叶片中的表达分析,发现LpMT2基因在盐胁迫和氧化胁迫下能够明显的被诱导。(3)构建了 pBI121-LpMT2植物表达载体,通过农杆菌介导法将其转入到细叶百合中,利用Northern杂交对卡那霉素筛选出的抗性植株进行鉴定,成功获得过表达LpMT2基因细叶百合植株。(4)用不同浓度的NaCl、NaHC03以及H202分别处理野生型和过表达LpMT2基因细叶百合48h,通过生理指标的测定发现,过表达LpMT2基因植株叶绿素和脯氨酸含量较高,丙二醛含量较低,细胞膜透性较小,超氧化物歧化酶活性较高,说明过表达LpMT2基因增强了植株的抗逆性。(5)用不同浓度的NaCl和NaHC03处理野生型和过表达LpMT2基因细叶百合48h，发现过表达LpMT2基因细叶百合的Na+含量较低、K+含量较高；在200mM NaCl和20mM NaHC03处理下过表达LpMT2基因细叶百合Na+的外流速度较高而K+的外流速度较低。说明在盐胁迫下,过表达LpMT2基因植株通过提高Na+的外流率、减少K+的外流率,以维持较低的Na+/K+,更好的适应盐胁迫。(本文来源于《东北林业大学》期刊2019-06-01）
邓小亮,钟秋珍,付欣,洪玮,谭茵[4]（2019）在《中华绒螯蟹金属硫蛋白基因在A549细胞中的表达及鉴定》一文中研究指出目的:克隆中华绒螯蟹金属硫蛋白(metallothionein,MT)基因至真核表达载体,表达蛋白,为进一步研究中华绒螯蟹金属硫蛋白的结构和功能打下基础。方法:设计特异性引物,PCR扩增得到MT基因编码序列,定向克隆至带GFP标签的真核表达载体p EGFP-C1,双酶切及测序鉴定重组质粒后转染A549细胞,荧光观察及Western Blot检测目的蛋白表达情况。结果:通过双酶切和测序确认成功构建了中华绒螯蟹MT基因的真核表达载体;重组质粒转染A549细胞24 h后观察到了绿色荧光,细胞裂解物经过Western Blot检测到符合预期的MT-GFP融合蛋白特异性条带。结论:成功构建了中华绒螯蟹MT基因的真核表达载体,证实了该基因能在A549细胞中成功表达,为进一步研究MT的结构功能打下了基础。(本文来源于《广州医科大学学报》期刊2019年01期）
刘东让,侯喜林,张昌伟,肖栋[5]（2018）在《不结球白菜金属硫蛋白基因的克隆及表达分析》一文中研究指出通过RACE技术,从不结球白菜抗病品种‘苏州青’叶片克隆到金属硫蛋白(metallothionein)基因的全长cDNA序列(BcMT2)。序列分析结果表明,BcMT2基因的cDNA全长为528bp,其中开放阅读框长度为243bp,共编码80个氨基酸,相对分子质量为8.02×10~(3 )Da,理论等电点是4.61。氨基酸同源系统进化分析表明,不结球白菜BcMT2基因属于Ⅱ类植物MT2基因家族,且与同科植物的进化关系相近,其中与大白菜第5号染色体的基因(Bra029765)相似性最高(100%)。qRT-PCR分析表明,BcMT2基因在不结球白菜叶中表达最强;霜霉病菌诱导后,BcMT2基因在抗病品种‘苏州青’中的表达量于48h达到峰值,而在感病品种‘矮脚黄’中的表达量于72h达到峰值;盐处理条件下,BcMT2基因在抗病品种‘苏州青’中的表达量于12h达到峰值,而在感病品种‘矮脚黄’中的表达量于24h达到峰值;ABA处理下,‘苏州青’中其表达量于24h达到峰值,且在‘矮脚黄’中BcMT2基因的表达趋势与‘苏州青’类似;干旱处理条件下BcMT2基因的表达在两材料中均受到抑制。BcMT2原核表达分析发现,在37℃、1.0mmol·L~(-1)IPTG诱导2、4、6h后,均检测到了一条蛋白分子质量约为8×10~(3 )Da的表达特异条带,这与预期融合蛋白的相对分子质量的理论值8.02×10~(3 )Da相符。研究表明,不结球白菜BcMT2基因在受到生物胁迫和非生物胁迫等逆境条件下均发挥着重要作用,且BcMT2在大肠杆菌中成功实现融合表达,为进一步进行蛋白水平和转基因功能研究奠定了基础,也为选育高产、优质的不结球白菜新品种提供重要的理论依据。(本文来源于《西北植物学报》期刊2018年12期）
魏霁[6]（2018）在《抗氧化剂锌和金属硫蛋白基因多态性与社区2型糖尿病的关系》一文中研究指出目的探析抗氧化剂锌(Zn)和金属硫蛋白(MT)基因多态性与社区2型糖尿病的关系。方法选取500例社区2型糖尿病患者纳入观察组,500例排除糖尿病的个体纳入对照组。所有受试者均于早晨空腹状态下检测血糖、血脂、锌离子、肝肾功能指标及rs2466295、rs11076160、rs11640851基因位点的基因型分布与频率。结果观察组血清TG、GLU高于对照组(P <0. 001),HDL低于对照组(P <0. 001)。观察组锌离子水平低于对照组,二者呈明显负相关(r=-0. 412,P=0. 020)。在rs11076161基因位点上,2组AA、AG、GG基因型分布的差异有统计学意义(P <0. 001);观察组A等位基因频率高于对照组(P <0. 001); rs11076161基因位点的基因多态性与糖尿病明显相关(OR=2. 778,P <0. 001)。在rs11640851基因位点上,2组AA、AG、GG基因型分差异有统计学意义(P <0. 001);观察组A等位基因频率(39. 00%)低于对照组(52. 00%)(P <0. 001); rs11640851基因位点的基因多态性与糖尿病明显相关(Or=0. 585,P <0. 001)。结论糖尿病与Zn T8及MT基因的多个多态性位点均有明显关联性,在rs2466295与rs11076161基因位点上,携带A等位基因的患病风险更大,在rs11640851基因位点上携带G基因的患病风险更大。(本文来源于《河北医药》期刊2018年22期）
李会芳,郭伟昌,颜穗珺,周晓伟,李佳丽[7]（2018）在《金属硫蛋白基因多态性与昆明地区汉族糖尿病肾脏疾病的相关性研究》一文中研究指出目的探讨金属硫蛋白(MT)2A基因rs28366003与昆明地区汉族人群DKD的相关性。方法采用TaqMan探针技术对89例并发DKD的T2DM患者(DKD组)、168例无DKD的T2DM患者(T2DM组)及108名健康对照者(NC组)的MT2A基因rs28366003多态性进行检测。结果 MT2A基因rs28366003多态性DKD组GG基因型频率高于NC组及T2DM组(χ~2=16.537, P=0.000;χ~2=9.086,P=0.011)。DKD组MT2A基因rs28366003位点G等位基因频率高于NC组及T2DM组(χ~2=17.341,P=0.01;χ~2=5.752,P=0.016)。Logistic回归分析显示,MT2A基因rs28366003位点GG基因型可能为DKD发生的独立危险因素。结论昆明地区汉族人群MT2A基因rs28366003多态性可能与DKD发生有关,GG基因型可能为DKD发生的危险因素。(本文来源于《中国糖尿病杂志》期刊2018年10期）
周焕新,王伟[8]（2019）在《四膜虫锌指结构蛋白Zfp1影响离子胁迫下金属硫蛋白基因的表达》一文中研究指出金属硫蛋白对细胞的环境应激起到重要的调节作用,在重金属离子胁迫下上调表达。然而其具体的表达调节机制并不清楚。本研究从嗜热四膜虫克隆了锌指蛋白基因ZFP1(TTHERM-01002770),ZFP1基因无内含子,全长2 160bp,编码719aa。构建了ZFP1敲除载体pN-ZFP1,通过同源重组的方法敲除ZFP1基因获得ZFP1敲除的突变细胞。ΔZFP1对Cu2+和Cd2+的EC50值分别为53.0μmol/L和25.3μmol/L,低于野生型细胞83.1μmol/L和32.8μmol/L.Cu2+胁迫下,ΔZFP1突变细胞中MTT2、MTT3、MTT4和MTT5的转录水平降低,MTT1转录水平上调;Cd2+诱导下,MTT4转录水平降低,MTT1、MTT2、MTT3和MTT5的转录水平上调,敲除ZFP1基因影响了细胞对Cu2+和Cd2+的耐受性,ZFP1的缺失导致Cu2+和Cd2+诱导下金属硫蛋白基因转录水平变化。结果表明Zfp1参与了金属离子胁迫下嗜热四膜虫金属硫蛋白基因的表达水平。(本文来源于《山西大学学报(自然科学版)》期刊2019年01期）
颜穗珺,郭伟昌,周晓伟,李佳丽,乐小婧[9]（2018）在《金属硫蛋白基因多态性与昆明地区汉族2型糖尿病的相关性研究》一文中研究指出目的 探讨金属硫蛋白(MT)1A基因rs8052394多态性与昆明地区汉族T2DM的相关性。方法 采用Taqman实时荧光定量PCR技术对257例T2DM患者(T2DM组)和108名健康对照(NC)组MT1A基因型进行检测。结果 T2DM组MT1A基因rs8052394A/A基因型频率及A等位基因频率高于NC组(χ~2=20.519、29.213,P<0.01)。Logistic回归分析显示,MT1A rs8052394A/A基因型携带者相对于A/G和G/G基因型携带者患T2DM的危险性增加。结论 昆明地区汉族人群MT1A基因rs8052394多态性可能与T2DM的发生有关,A等位基因可能增加T2DM的发病风险。(本文来源于《中国糖尿病杂志》期刊2018年07期）
胡真真[10]（2018）在《盐穗木金属硫蛋白基因启动子的克隆及其功能活性分析》一文中研究指出微量的金属离子在生物体内必不可少,而过量则会对生物体造成严重的毒害作用。金属硫蛋白是多种生物体内都表达的小分子物质,能够通过丰富的巯基簇结合大量的金属离子,参与体内金属离子的运输,调节体内金属离子的平衡,同时还具有解除重金属毒性、清除自由基等功能。而植物体内丰富多样的金属硫蛋白主要是通过启动子上的响应元件进行调控表达的。本研究鉴于已经获得的盐穗木(Halostachys caspica)金属硫蛋白(metallothionein)基因mRNA序列。首先克隆获得了盐穗木金属硫蛋白基因全长序列,全长2334 bp,由叁个外显子和两个内含子组成,叁个外显子的长度分别是64 bp,79 bp和94 bp,两个内含子的长度分别是836 bp和1261 bp。然后根据836 bp的第一个内含子序列设计3条特异性引物,通过染色体步移法克隆获得盐穗木金属硫蛋白基因启动子,该启动子片段长度为842 bp。启动子序列的在线分析软件PlantCARE分析发现,启动子上含有一般启动子所包含的核心序列:TATA-box和CAAT-box;还含有多种顺式调控元件:光和干旱响应元件、茉莉酸甲酯响应元件、水杨酸响应元件、胚乳特异性表达调控元件、分生组织特异性激活响应元件等。与已报道类金属响应元件的核心序列进行比对,在启动子序列上发现了两个铜响应元件(CURE)和4个不同于其它植物的类金属响应元件(MRElike),核心序列分别为5'-TGCAACG-3'(含有2个),5'-TGCAACT-3',5'-GAGAGAA-3'。推测该启动子参与了多种胁迫下对基因表达的精细调控。为了验证启动子活性及影响启动子活性的关键区域,结合盐穗木金属硫蛋白基因启动子的生物信息学分析,本研究设计了不同长度的截断启动子序列置换出植物表达载体pCAMBIA1304中位于报告基因GUS前的CaMV 35S组成型启动子。对瞬时注射不同长度启动子的本氏烟草(Nicotiana benthamiana)叶片进行GUS组织化学染色,结果发现都有深蓝色沉淀,表明,不同长度的HcMT基因启动子都具有启动下游基因表达的活性。对非胁迫下不同长度启动子产生的GUS酶进行酶活的定量分析,结果发现,在CaMV 35S启动子的作用下,GUS表现出最高酶活性;其它不同长度启动子作用下的GUS酶都有一定的活性,但相互之间并没有显着差异(P>0.05);P518启动子在所有金属硫蛋白片段启动子中启动的GUS酶活性最高,为28.27 pmol/h/μg;而长片段启动子(P842和P654)启动下的GUS酶活只有P518启动子的45.10%和34.31%。说明启动子的长度与基因的表达量并不呈相关关系,并推测该启动子在-842bp~-518bp片段之间存在负调控元件,导致基因表达受阻或抑制。对瞬时注射的本氏烟草叶片进行金属离子和盐溶液胁迫处理,结果发现在100μM铜离子胁迫下,P842启动子作用下的GUS酶活显着高(P<0.05)于其他长度的启动子,说明在盐穗木金属硫蛋白启动子-842~-654bp之间存在铜响应元件;在300μM锌离子胁迫下,P518、P654启动子活性显着高于P329、P416启动子,推测启动子在-654~-518bp之间可能含有锌离子的调控元件;另外研究发现该启动子在较短的区域内(P329)就可以实现对盐环境的高度响应。(本文来源于《新疆大学》期刊2018-05-20）
金属硫蛋白基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
探讨不同浓度Cu~(2+)胁迫对福寿螺肝胰腺组织金属硫蛋白(metallothionein, MT)基因表达的影响,取15只福寿螺,在100μg/L Cu~(2+)离子胁迫后的0、 1、 7、 14、 21 d,各取3只福寿螺,分离肝脏,提取RNA,反转录为c DNA,实时荧光定量PCR检测福寿螺金属硫蛋白基因(Pc MT) mRNA的相对表达水平。以cDNA为模板, PCR扩增Pc MT基因完整编码序列,连接至pET28a质粒,转入大肠埃希菌BL21 (DE3)感受态细胞中,挑取阳性克隆进行鉴定与测序。用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导重组蛋白表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物。结果显示, Cu~(2+)胁迫0～14 d,福寿螺肝脏中Pc MT基因mRNA的表达量持续上升,峰值为2.1±0.2, 21 d时下降为1.1±0.1。PCR扩增Pc MT基因,获得长度约300 bp的片段,构建的pET28a-Pc MT质粒经PCR、双酶切和测序鉴定,均与预期大小一致。SDS-PAGE结果显示, Pc MT蛋白的相对分子质量(Mr)约为17 000。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
金属硫蛋白基因论文参考文献
[1].强承魁,秦越华,张明,梁玉莹,曹丹.小麦金属硫蛋白基因的克隆与组织表达分析[J].分子植物育种.2019
[2].茅光耀,郭云海,张仪,肖宁.Cu~(2+)胁迫对福寿螺金属硫蛋白基因mRNA表达的影响[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志.2019
[3].赵婧竞.细叶百合2型金属硫蛋白（LpMT2）基因的克隆及其功能解析[D].东北林业大学.2019
[4].邓小亮,钟秋珍,付欣,洪玮,谭茵.中华绒螯蟹金属硫蛋白基因在A549细胞中的表达及鉴定[J].广州医科大学学报.2019
[5].刘东让,侯喜林,张昌伟,肖栋.不结球白菜金属硫蛋白基因的克隆及表达分析[J].西北植物学报.2018
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[9].颜穗珺,郭伟昌,周晓伟,李佳丽,乐小婧.金属硫蛋白基因多态性与昆明地区汉族2型糖尿病的相关性研究[J].中国糖尿病杂志.2018
[10].胡真真.盐穗木金属硫蛋白基因启动子的克隆及其功能活性分析[D].新疆大学.2018
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